橡胶树7-33-97悬浮细胞的建立及核黄素对其防卫反应的研究
发布时间：2020-12-24 11:11
植物在激发子的诱导处理下,可以产生如下的防卫反应:活性氧爆发、次生代谢产物累积和抗性基因的表达等,这些抗病因素共同抵御病原物的侵入和扩散。由于橡胶树高大生育期长,其相关基础性或机理性研究相对滞后。悬浮细胞培养作为植物生物技术中一种研究手段,由于其分散性佳,生长快速,方便控制,已被广泛用于各个方面的科学研究。因此,研究建立橡胶树悬浮细胞系有利于加快相关研究进程。本研究通过摸索建立橡胶树悬浮细胞系,研究核黄素激发橡胶树悬浮细胞系的防卫反应,为明确橡胶树抗病防卫机制和培育抗病品种提供理论基础与科学依据。本实验主要研究结果如下:1、以橡胶树品系7-33-97花药经诱导培养基诱导后获得的胚性愈伤组织为材料,通过对2,4-D、NAA和KT等关键激素及主要碳源蔗糖的最适浓度筛选,得到了改良的MS培养基,建立起了稳定的悬浮细胞系,作为后面实验开展的主要材料;结果表明,采用添加1.0mg/L的2,4-D、0.5mg/L的NAA、1.5mg/L的KT、30g/L的蔗糖的MS培养液,在此营养环境下,得到的悬浮细胞系稳定、生长速度佳,为后续实验需要大量的实验材料提供有效的保障;悬浮培养液的pH值变化与细胞生长...
【文章来源】：海南大学海南省 211工程院校
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３橡胶树７－３３－９７悬浮细胞系生长曲线??
图４橡胶树７－３３－９７悬浮细胞液ｐＨ值的变化??Ｆｉｇ４?Ｔｈｅ?ｃｈａｎｇｅｓ?ｉｎ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?Ｈｅｖｅａ?ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ７－３３－９７?ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ?ｃｅｌｌｓ??结合图３和图４我们可以分析得知，悬浮培养液的ｐＨ值变化与细胞生长??速率的快慢有着一定的关联。在培养２？８ｄ这个时间段内，悬浮培养液的ｐＨ有??一定程度的升高，而此时期正是悬浮细胞处于对数生长期的时候，悬浮细胞的湿??重和干重均有快速的增长，细胞分裂、增殖处于最佳的时期；在培养８？１２ｄ这个??时间段内，悬浮培养液的ｐＨ开始走下降趋势的时候，此时的悬浮细胞湿重几乎??无变化，而干重还出现一定程度的下降现象，这说明了此时的细胞生长，分裂缓??慢甚至停滞，或许ｐＨ值的降低还对悬浮细胞的增长产生一定的副作用。??２．?３不同的激素浓度对细胞悬浮系生长的影响??２．?３．１不同浓度的２，４－Ｄ对橡胶树７－３３－９７悬浮细胞生长的影响??笔者在实验中分别将稳定的橡胶树品系７－３３－９７悬浮细胞系接种到不同浓度??的２
时候达到了最大量，最大值为〇．１７ｇ，较Ｏｍｇ／Ｌ处悬浮细胞的干重量提升了?０．１２ｇ，??提升了?２．４倍，效果明显。当２，４－Ｄ浓度为１．２ｍｇ／Ｌ的时候，悬浮细胞的生长出??现了下降的情况（图５）。由此可知，在其他营养物质不变的情况下，应选择浓??度为ｌｍｇ／Ｌ的２，４－Ｄ，此浓度下的悬浮细胞生长速度最快，更适合大批量的后续??１５??
【参考文献】：
期刊论文
[1]转hpa1Xm基因烟草后代的分子检测及苗期生理生化指标测定[J]. 刘晓,金洋,冯霞,康迅,刘文波,林春花,缪卫国,郑服丛. 分子植物育种. 2017(05)
[2]核黄素对橡胶树（Hevea brasiliensis）7-33-97悬浮细胞防卫反应的激活作用[J]. 金洋,冯霞,康迅,刘晓,叶劲秋,刘文波,林春花,郑服丛,缪卫国. 分子植物育种. 2017(04)
[3]橡胶树白粉病菌OhPbs2的克隆及功能分析[J]. 冯霞,林春花,康迅,金洋,刘晓,何其光,刘文波,缪卫国,郑服丛. 中国农业科学. 2017(01)
[4]青霉菌灭活菌丝体诱导烟草BY-2悬浮细胞防卫反应的初步研究[J]. 钟宇,陈壮壮,谢虹,燕飞,时红敏,张鹏远,王建光,陈穗云. 植物病理学报. 2014(06)
[5]抗生素对巴西橡胶树胚性悬浮细胞生长的影响[J]. 周权男,谢黎黎,黄天带,华玉伟,戴雪梅,黄华孙. 西南农业学报. 2014(02)
[6]根癌农杆菌介导的巴西橡胶树胚性悬浮细胞的遗传转化[J]. 于波,吴华玲,黄天带,戴雪梅. 中国农学通报. 2012(31)
[7]半夏悬浮培养细胞的EMS诱变和耐高温突变体筛选[J]. 陶兴魁,张爱民,薛建平,滕井通,卢河东,薛涛. 中国中药杂志. 2012(12)
[8]磷脂酶C参与ParA1诱导的烟草悬浮细胞死亡和防卫反应[J]. 魏芳芳,王蕾,王莲莲,柳金伟,梁元存,王玉军. 中国农业科学. 2010(20)
[9]植物悬浮细胞的研究进展[J]. 杨帆,赵君,张之为,娜仁. 生命科学研究. 2010(03)
[10]转hpa1Xoo基因棉花悬浮细胞培养及其对黄、枯萎病菌的抗性[J]. 缪卫国,倪萌,宋从凤,王金生. 西北农业学报. 2010(01)
硕士论文
[1]磷脂酶C和磷脂酶D在核黄素诱导烟草悬浮细胞防卫反应中的作用[D]. 王莲莲.山东农业大学 2012
[2]根癌农杆菌介导的橡胶树胚性悬浮细胞遗传转化及植株再生研究[D]. 姜泽海.海南大学 2011
[3]橡胶树易碎胚性愈伤组织诱导、长期继代培养及其植株再生研究[D]. 倪燕妹.海南大学 2010
[4]拟南芥悬浮细胞系建立及硒对拟南芥生长的影响[D]. 邹洪波.湖南大学 2007
[5]杨树胚性悬浮细胞系建立与原生质体融合研究[D]. 谢华永.南京林业大学 2004
本文编号：2935553
【文章来源】：海南大学海南省 211工程院校
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３橡胶树７－３３－９７悬浮细胞系生长曲线??
图４橡胶树７－３３－９７悬浮细胞液ｐＨ值的变化??Ｆｉｇ４?Ｔｈｅ?ｃｈａｎｇｅｓ?ｉｎ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?Ｈｅｖｅａ?ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ７－３３－９７?ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ?ｃｅｌｌｓ??结合图３和图４我们可以分析得知，悬浮培养液的ｐＨ值变化与细胞生长??速率的快慢有着一定的关联。在培养２？８ｄ这个时间段内，悬浮培养液的ｐＨ有??一定程度的升高，而此时期正是悬浮细胞处于对数生长期的时候，悬浮细胞的湿??重和干重均有快速的增长，细胞分裂、增殖处于最佳的时期；在培养８？１２ｄ这个??时间段内，悬浮培养液的ｐＨ开始走下降趋势的时候，此时的悬浮细胞湿重几乎??无变化，而干重还出现一定程度的下降现象，这说明了此时的细胞生长，分裂缓??慢甚至停滞，或许ｐＨ值的降低还对悬浮细胞的增长产生一定的副作用。??２．?３不同的激素浓度对细胞悬浮系生长的影响??２．?３．１不同浓度的２，４－Ｄ对橡胶树７－３３－９７悬浮细胞生长的影响??笔者在实验中分别将稳定的橡胶树品系７－３３－９７悬浮细胞系接种到不同浓度??的２
时候达到了最大量，最大值为〇．１７ｇ，较Ｏｍｇ／Ｌ处悬浮细胞的干重量提升了?０．１２ｇ，??提升了?２．４倍，效果明显。当２，４－Ｄ浓度为１．２ｍｇ／Ｌ的时候，悬浮细胞的生长出??现了下降的情况（图５）。由此可知，在其他营养物质不变的情况下，应选择浓??度为ｌｍｇ／Ｌ的２，４－Ｄ，此浓度下的悬浮细胞生长速度最快，更适合大批量的后续??１５??
【参考文献】：
期刊论文
[1]转hpa1Xm基因烟草后代的分子检测及苗期生理生化指标测定[J]. 刘晓,金洋,冯霞,康迅,刘文波,林春花,缪卫国,郑服丛. 分子植物育种. 2017(05)
[2]核黄素对橡胶树（Hevea brasiliensis）7-33-97悬浮细胞防卫反应的激活作用[J]. 金洋,冯霞,康迅,刘晓,叶劲秋,刘文波,林春花,郑服丛,缪卫国. 分子植物育种. 2017(04)
[3]橡胶树白粉病菌OhPbs2的克隆及功能分析[J]. 冯霞,林春花,康迅,金洋,刘晓,何其光,刘文波,缪卫国,郑服丛. 中国农业科学. 2017(01)
[4]青霉菌灭活菌丝体诱导烟草BY-2悬浮细胞防卫反应的初步研究[J]. 钟宇,陈壮壮,谢虹,燕飞,时红敏,张鹏远,王建光,陈穗云. 植物病理学报. 2014(06)
[5]抗生素对巴西橡胶树胚性悬浮细胞生长的影响[J]. 周权男,谢黎黎,黄天带,华玉伟,戴雪梅,黄华孙. 西南农业学报. 2014(02)
[6]根癌农杆菌介导的巴西橡胶树胚性悬浮细胞的遗传转化[J]. 于波,吴华玲,黄天带,戴雪梅. 中国农学通报. 2012(31)
[7]半夏悬浮培养细胞的EMS诱变和耐高温突变体筛选[J]. 陶兴魁,张爱民,薛建平,滕井通,卢河东,薛涛. 中国中药杂志. 2012(12)
[8]磷脂酶C参与ParA1诱导的烟草悬浮细胞死亡和防卫反应[J]. 魏芳芳,王蕾,王莲莲,柳金伟,梁元存,王玉军. 中国农业科学. 2010(20)
[9]植物悬浮细胞的研究进展[J]. 杨帆,赵君,张之为,娜仁. 生命科学研究. 2010(03)
[10]转hpa1Xoo基因棉花悬浮细胞培养及其对黄、枯萎病菌的抗性[J]. 缪卫国,倪萌,宋从凤,王金生. 西北农业学报. 2010(01)
硕士论文
[1]磷脂酶C和磷脂酶D在核黄素诱导烟草悬浮细胞防卫反应中的作用[D]. 王莲莲.山东农业大学 2012
[2]根癌农杆菌介导的橡胶树胚性悬浮细胞遗传转化及植株再生研究[D]. 姜泽海.海南大学 2011
[3]橡胶树易碎胚性愈伤组织诱导、长期继代培养及其植株再生研究[D]. 倪燕妹.海南大学 2010
[4]拟南芥悬浮细胞系建立及硒对拟南芥生长的影响[D]. 邹洪波.湖南大学 2007
[5]杨树胚性悬浮细胞系建立与原生质体融合研究[D]. 谢华永.南京林业大学 2004
本文编号：2935553
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