miRNA319调控杨树叶片发育机制解析
发布时间：2021-02-19 04:31
叶片是植物光合作用和蒸腾作用的主要器官,不仅能将光能转化为化学能,还能以气体交换的方式降低植物体的温度,为植物正常的生长发育提供稳定的生长环境。miRNA319a及其靶基因是许多植物生长发育过程中的关键调节因子,如叶片的形态、花瓣和花粉粒的饱满度以及增强植物的抗寒性。因此,为研究miRNA319a对杨树叶片发育的影响,设置了以84K杨叶片为材料,通过农杆菌介导的miRNA319a基因的转化。共获得了14个转基因植株,鉴定了转基因植株中miRNA319a的表达量,调查了转基因植株的叶片性状、幼苗生长性状、叶片木质素含量、叶绿素含量、光合速率等;分析转基因数据,构建了miRNA319a在叶片发育过程中的调控网络。主要得到了以下几个方面的结果:（1）为鉴定miRNA319a在杨树中的过表达情况,本试验分别以五月生的miRNA319a过表达植株和野生型的叶片为材料,利用标准CTAB法提取叶片中的总RNA,采用qRT-PCR鉴定出miRNA319a过表达株系的表达量均高于野生型,找出了miRNA319a-1、miRNA319a-2、miRNA319a-7、miRNA319a-8和miRNA319...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 植物叶片的研究进展
1.1.1 叶片边缘形态
1.1.2 叶片的发生与形态建成
1.2 miRNAs的研究进展
1.3 研究意义与研究内容
1.4 技术路线
第二章 材料和方法
2.1 试验材料和生长条件
2.2 miRNA319a杨树转基因株系的开发
2.2.1 试验材料
2.2.2 试验仪器和药品
2.2.3 转基因株系获得
2.3 qRT-PCR分析确认p35S：miRNA319a表达
2.3.1 植物材料
2.3.2 实验仪器和药品
2.3.3 植物总RNA的提取
2.3.4 过表达植株和野生型植株叶片基因组DNA的去除与纯化
2.3.5 RNA质量的检测
2.3.6 cDNA的合成
2.3.7 实时定量PCR的反应体系和反应条件
2.4 供试植株生理指标和生长指标的检测
2.4.1 叶绿素含量的测定
2.4.2 光合速率的测定
2.4.3 株高和地径的测定
2.5 miRNA319a过表达株系叶片结构的解剖学分析
2.5.1 试验方法和材料
2.5.2 试验仪器和试剂
2.5.3 试验步骤
2.6 杨树miRNA319a过表达植株和野生型叶片中差异表达基因的分析
2.6.1 植物材料
2.6.2 RNA的提取
2.6.3 过表达植株和野生型植株叶片总RNA的高通量测序
2.6.4 原始数据的分析
2.6.5 过表达植株和野生型叶片基因组的GO注释和蛋白质结构域分析
2.7 杨树miRNA319a靶标TCP的系统分析
2.7.1 材料和工具
2.7.2 制作工具
2.7.3 由miRNA319a介导的多层基因调控网络的构建
第三章 结果与分析
3.1 miRNA319a过表达植株表达量的鉴定
3.2 miRNA319a过表达对杨树叶片表型和生长量的影响
3.2.1 表型分析
3.2.2 miRNA319a过表达对杨树地径和株高的影响
3.2.3 miRNA319a过表达对杨树叶片中木质素含量的影响
3.3 miRNA319a过表达对转基因杨树生理指标的影响
3.3.1 对叶绿素含量的影响
3.3.2 对光合速率的影响
3.4 转录组数据分析和差异表达基因的鉴定
3.5 全基因组鉴定杨树中miRNA319a的推定靶标
3.6 差异表达基因的GO enrichment和Protein domain分析
3.6.1 差异表达基因的GO enrichment
3.6.2 差异表达基因的蛋白质结构域富集分析
3.7 miRNA319a基因调控网络的构建
第四章 讨论与结论
4.1 讨论
4.1.1 miRNA319a过表达对杨树生长和生理指标的影响
4.1.2 miRNA319a过表达杨树叶片转录组数据分析
4.1.3 miRNA319a过表达杨树中木质素含量的分析
4.1.4 过表达杨树中miRNA319a靶基因的预测和系统发育发育树的构建
4.2 结论
参考文献
附录A
附录B
附录C
附录D
附录E
致谢
个人简历
本文编号：3040602
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 植物叶片的研究进展
1.1.1 叶片边缘形态
1.1.2 叶片的发生与形态建成
1.2 miRNAs的研究进展
1.3 研究意义与研究内容
1.4 技术路线
第二章 材料和方法
2.1 试验材料和生长条件
2.2 miRNA319a杨树转基因株系的开发
2.2.1 试验材料
2.2.2 试验仪器和药品
2.2.3 转基因株系获得
2.3 qRT-PCR分析确认p35S：miRNA319a表达
2.3.1 植物材料
2.3.2 实验仪器和药品
2.3.3 植物总RNA的提取
2.3.4 过表达植株和野生型植株叶片基因组DNA的去除与纯化
2.3.5 RNA质量的检测
2.3.6 cDNA的合成
2.3.7 实时定量PCR的反应体系和反应条件
2.4 供试植株生理指标和生长指标的检测
2.4.1 叶绿素含量的测定
2.4.2 光合速率的测定
2.4.3 株高和地径的测定
2.5 miRNA319a过表达株系叶片结构的解剖学分析
2.5.1 试验方法和材料
2.5.2 试验仪器和试剂
2.5.3 试验步骤
2.6 杨树miRNA319a过表达植株和野生型叶片中差异表达基因的分析
2.6.1 植物材料
2.6.2 RNA的提取
2.6.3 过表达植株和野生型植株叶片总RNA的高通量测序
2.6.4 原始数据的分析
2.6.5 过表达植株和野生型叶片基因组的GO注释和蛋白质结构域分析
2.7 杨树miRNA319a靶标TCP的系统分析
2.7.1 材料和工具
2.7.2 制作工具
2.7.3 由miRNA319a介导的多层基因调控网络的构建
第三章 结果与分析
3.1 miRNA319a过表达植株表达量的鉴定
3.2 miRNA319a过表达对杨树叶片表型和生长量的影响
3.2.1 表型分析
3.2.2 miRNA319a过表达对杨树地径和株高的影响
3.2.3 miRNA319a过表达对杨树叶片中木质素含量的影响
3.3 miRNA319a过表达对转基因杨树生理指标的影响
3.3.1 对叶绿素含量的影响
3.3.2 对光合速率的影响
3.4 转录组数据分析和差异表达基因的鉴定
3.5 全基因组鉴定杨树中miRNA319a的推定靶标
3.6 差异表达基因的GO enrichment和Protein domain分析
3.6.1 差异表达基因的GO enrichment
3.6.2 差异表达基因的蛋白质结构域富集分析
3.7 miRNA319a基因调控网络的构建
第四章 讨论与结论
4.1 讨论
4.1.1 miRNA319a过表达对杨树生长和生理指标的影响
4.1.2 miRNA319a过表达杨树叶片转录组数据分析
4.1.3 miRNA319a过表达杨树中木质素含量的分析
4.1.4 过表达杨树中miRNA319a靶基因的预测和系统发育发育树的构建
4.2 结论
参考文献
附录A
附录B
附录C
附录D
附录E
致谢
个人简历
本文编号：3040602
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/lylw/3040602.html
