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刚毛柽柳ThSZF3基因耐盐功能分析

发布时间:2021-04-02 00:53
  锌指蛋白(ZFP,Zinc Finger Proteins)是植物一大类重要的转录调控因子,参与调控一些重要的生理过程,如:形态建成、花粉发育、胁迫应答、胚胎发育等[1]。在前期研究中发现刚毛柽柳ThZFP基因可能是耐盐基因,因此本研究进一步对ThZFP基因的耐盐功能进行了研究,并对其耐盐调控机制进行了初步的分析。本研究从抗旱耐盐的木本植物刚毛柽柳转录组数据中鉴定了一条盐胁迫诱导表达的锌指蛋白(salt-induciblezincfinger)基因,命名为ThSZF3。ThSZF3基因全长1176bp,发现该基因编码391个氨基酸,分子量为97.26 kDa,理论等电点为5.00。亚细胞定位结果表明ThSZF3蛋白在细胞核中表达。构建了ThSZF3基因过表达载体pROKII-ThSZF3及RNAi载体pFGC5941-ThSZF3,将其与空pROKII载体瞬时转化到刚毛柽柳中,分别获得过表达(OE)、抑制表达(RNAi)及对照(CON)刚毛柽柳转基因植株并对转基因刚毛柽柳进行NaCl胁迫。分析比较了三种转基因刚毛柽柳中的DAB、NBT及Evans Blue染色以及POD、SOD、PRO... 

【文章来源】:东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:69 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

刚毛柽柳ThSZF3基因耐盐功能分析


图2-1?PCR扩增mSZFJ基因??送至测序,测序结果4转泌组数据序列比对完全相同,说明7762巧基因成功克??’

柽柳,刚毛,疏水结构,氨基酸


利用NCBI对776ZW编码的氨基酸进行保守区域分析,发现有典型的zf-CCCH??结构。结合ExPASy-PROSITE分析显示,ThSZF3蛋白序列的N-端含有3个保守的ZFP??结构域,为典型的CCCH类锌指蛋白,如图2-4所示:??|?5??1(9?1^0?2^*?2^*?3?*?3|??3J1??Query?■■BBMy?lllllillll??Specific?hits??Super?families?k<-tcc?|??1?100?200?300?400?500?600?700?800?900?1000??rUlef:?1..."—|__,.^..;..*.|..卜—.|..|.叫.4.二?H......|??LJ?S?E?R?S?E?Q?1?劝?wr你■>.似?(?3?9?1?3?3?)??www^??图2-4刚毛柽柳776ZFJ基因的保守结构域预测??2.3.23刚毛柽柳77AZFJ基因的二级结构分析??根据蛋白质二级结构预测,发现T/6ZFJ二级结构由无规则卷曲,a-螺旋和(3-折叠??组成。其中以无规则卷曲为主,占91.3%?(约357个氨基酸),其次是a-螺旋占5.12%??(约20个氨基酸)

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本文编号:3114279

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