亚洲型舞毒蛾及近缘种遗传多样性与快速鉴定研究
发布时间：2021-05-09 13:52
舞毒蛾Lymantria20dispar20（Linnaeus）,属鳞翅目（Lepidoptera）裳蛾科（Erebidae）毒蛾亚科（Lymantriinae）,是一种广泛危害的食叶害虫,通常分为欧洲型舞毒蛾和亚洲型舞毒蛾。2009年北美植物保护组织（NAPPO）正式通过了第33号植物卫生措施区域标准,对来自亚洲型舞毒蛾疫区的30个（包括中国）被重点关注口岸的船舶及货物实施特别检疫措施,对我国的出口外贸带来极大的不便。然而我国对美贸易港口主要位于舞毒蛾低密度发生区,且这些地区都属于之前经常误报舞毒蛾的地区（因舞毒蛾与其近缘种外形非常相似）,所以从总体上来说,输美船舶集装箱在我国港口感染舞毒蛾的几率应该排除掉之前误报导的舞毒蛾近缘种感染的几率。因此,研究亚洲型舞毒蛾及其近缘种的基因差异,解决快速种群鉴定问题已迫在眉睫,它是解决美国对中国实施贸易壁垒的关键因素。鉴于此,本研究以亚洲型舞毒蛾及其在我国常见的两种近缘种——模毒蛾和木毒蛾为研究对象,采用ISSR技术和线粒体DNA20（mtDNA）20Coxl基因片段对三种毒蛾的遗传多样性进行了研究,并利用四段mtDNA序列对其分子快速鉴定技术...
【文章来源】：北京林业大学北京市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
1 前言
1.1 亚洲型舞毒蛾概述
1.1.1 舞毒蛾的分类地位及生物学特性
1.1.2 舞毒蛾的危害状况及其影响
1.2 舞毒蛾主要近缘种概述
1.2.1 模毒蛾的生物学特性及危害现状
1.2.2 木毒蛾的生物学特性及危害现状
1.3 舞毒蛾及其近缘种遗传多样性研究进展
1.3.1 基于分子标记技术的研究进展
1.3.1.1 RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism)
1.3.1.2 RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)
1.3.1.3 AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)
1.3.1.4 SSR(Simple Sequence Repeat)
1.3.1.5 ISSR(Inter Simple Sequence Repeat)
1.3.2 基于线粒体DNA的研究进展
1.4 研究目的意义与研究内容
1.5 技术路线
2 基于ISSR-PCR的舞毒蛾及其近缘种遗传多样性分析
2.1 实验材料
2.1.1 供试样品来源
2.1.2 舞毒蛾室内饲养
2.1.3 试验所用试剂及其配制
2.1.4 实验所用仪器设备
2.2 研究方法
2.2.1 昆虫基因组DNA提取
2.2.2 基因组DNA检测
2.2.2.1 DNA纯度检测
2.2.2.2 DNA浓度检测
2.2.3 ISSR-PCR扩增反应体系的优化
2.2.4 ISSR引物筛选
2.3 数据分析
2.4 结果与分析
2.4.1 舞毒蛾及其近缘种的野外初步鉴别
2.4.1.1 形态特征
2.4.1.2 采集时间及采集位置
2.4.2 ISSR-PCR扩增反应体系的建立
2.4.2.1 dNTP对ISSR-PCR扩增的影响
2.4.2.2 Mg~(2+)对ISSR-PCR扩增的影响
2.4.2.3 引物对ISSR-PCR扩增的影响
2.4.2.4 基因组DNA模板对ISSR-PCR扩增的影响
2.4.2.5 TaqDNA聚合酶对ISSR-PCR扩增的影响
2.4.3 ISSR-PCR扩增引物的筛选
2.4.4 遗传多样性分析
2.5 讨论
2.5.1 基因组DNA的提取
2.5.2 ISSR反应体系和条件的优化
2.5.3 舞毒蛾及近缘种遗传多样性
3 基于线粒体DNA的舞毒蛾及其近缘种快速鉴定及系统发育分析
3.1 材料与方法
3.1.1 供试样品
3.1.2 基因组DNA提取、扩增及测序
3.1.3 数据处理分析与引物设计
3.2 结果与分析
3.2.1 PCR扩增、测序结果
3.2.2 特异性引物设计及筛选
3.2.3 Cox1序列片段特征分析
3.3 讨论
4 结论与展望
4.1 结论
4.2 展望
参考文献
个人简介
导师简介
获得成果目录
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同预处理方法影响昆虫干标本DNA提取效果[J]. 李枷霖,郑斯竹,蔡平,詹国辉,高渊. 基因组学与应用生物学. 2015(02)
[2]模毒蛾的种群动态与生活史[J]. 张军生. 林业科技. 2014(03)
[3]由亚洲型舞毒蛾检疫问题引发的几点思考[J]. 谌运清,安榆林,刘翔,钱路,颜柳松,胡伟毅,邱建德. 植物检疫. 2012(04)
[4]5种方法对蝴蝶干标本DNA的提取效果研究[J]. 乔枫,陈振宁,耿贵工,李思未. 安徽农业科学. 2011(28)
[5]中国舞毒蛾六个地理种群的RAPD分析及SCAR标记构建[J]. 张浩,陈乃中,李正西. 昆虫学报. 2011(06)
[6]舞毒蛾线粒体DNA全序列分析[J]. 朱雅君,周国梁,房蕊,叶军,易建平. 植物检疫. 2010(04)
[7]龙眼木毒蛾的生物学特性[J]. 陈加福. 福建农业学报. 2010(03)
[8]舞毒蛾在阿勒泰地区的发生规律与综防措施[J]. 崔保成. 农村科技. 2010(04)
[9]基于分子遗传标记技术的舞毒蛾种群遗传关系研究进展[J]. 周贤,陈乃中,杨定. 植物保护. 2009(05)
[10]舞毒蛾种群分子系统学初步研究[J]. 周贤,陈岩,杨定,陈乃中. 植物检疫. 2009(04)
博士论文
[1]天牛科基因条形码构建及分子快速鉴定技术研究[D]. 郑斯竹.南京林业大学 2012
[2]中国野生毛木耳遗传多样性研究[D]. 杜萍.北京林业大学 2011
硕士论文
[1]厦门地区毒蛾的监测和风险分析[D]. 施宣杰.福建农林大学 2010
[2]秦艽及其近缘种的ISSR和HPLC研究[D]. 张文勇.西北大学 2010
[3]樟树几种化学类型及近缘种遗传多样性研究[D]. 邢建宏.福建农林大学 2006
本文编号：3177419
【文章来源】：北京林业大学北京市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
1 前言
1.1 亚洲型舞毒蛾概述
1.1.1 舞毒蛾的分类地位及生物学特性
1.1.2 舞毒蛾的危害状况及其影响
1.2 舞毒蛾主要近缘种概述
1.2.1 模毒蛾的生物学特性及危害现状
1.2.2 木毒蛾的生物学特性及危害现状
1.3 舞毒蛾及其近缘种遗传多样性研究进展
1.3.1 基于分子标记技术的研究进展
1.3.1.1 RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism)
1.3.1.2 RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)
1.3.1.3 AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)
1.3.1.4 SSR(Simple Sequence Repeat)
1.3.1.5 ISSR(Inter Simple Sequence Repeat)
1.3.2 基于线粒体DNA的研究进展
1.4 研究目的意义与研究内容
1.5 技术路线
2 基于ISSR-PCR的舞毒蛾及其近缘种遗传多样性分析
2.1 实验材料
2.1.1 供试样品来源
2.1.2 舞毒蛾室内饲养
2.1.3 试验所用试剂及其配制
2.1.4 实验所用仪器设备
2.2 研究方法
2.2.1 昆虫基因组DNA提取
2.2.2 基因组DNA检测
2.2.2.1 DNA纯度检测
2.2.2.2 DNA浓度检测
2.2.3 ISSR-PCR扩增反应体系的优化
2.2.4 ISSR引物筛选
2.3 数据分析
2.4 结果与分析
2.4.1 舞毒蛾及其近缘种的野外初步鉴别
2.4.1.1 形态特征
2.4.1.2 采集时间及采集位置
2.4.2 ISSR-PCR扩增反应体系的建立
2.4.2.1 dNTP对ISSR-PCR扩增的影响
2.4.2.2 Mg~(2+)对ISSR-PCR扩增的影响
2.4.2.3 引物对ISSR-PCR扩增的影响
2.4.2.4 基因组DNA模板对ISSR-PCR扩增的影响
2.4.2.5 TaqDNA聚合酶对ISSR-PCR扩增的影响
2.4.3 ISSR-PCR扩增引物的筛选
2.4.4 遗传多样性分析
2.5 讨论
2.5.1 基因组DNA的提取
2.5.2 ISSR反应体系和条件的优化
2.5.3 舞毒蛾及近缘种遗传多样性
3 基于线粒体DNA的舞毒蛾及其近缘种快速鉴定及系统发育分析
3.1 材料与方法
3.1.1 供试样品
3.1.2 基因组DNA提取、扩增及测序
3.1.3 数据处理分析与引物设计
3.2 结果与分析
3.2.1 PCR扩增、测序结果
3.2.2 特异性引物设计及筛选
3.2.3 Cox1序列片段特征分析
3.3 讨论
4 结论与展望
4.1 结论
4.2 展望
参考文献
个人简介
导师简介
获得成果目录
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同预处理方法影响昆虫干标本DNA提取效果[J]. 李枷霖,郑斯竹,蔡平,詹国辉,高渊. 基因组学与应用生物学. 2015(02)
[2]模毒蛾的种群动态与生活史[J]. 张军生. 林业科技. 2014(03)
[3]由亚洲型舞毒蛾检疫问题引发的几点思考[J]. 谌运清,安榆林,刘翔,钱路,颜柳松,胡伟毅,邱建德. 植物检疫. 2012(04)
[4]5种方法对蝴蝶干标本DNA的提取效果研究[J]. 乔枫,陈振宁,耿贵工,李思未. 安徽农业科学. 2011(28)
[5]中国舞毒蛾六个地理种群的RAPD分析及SCAR标记构建[J]. 张浩,陈乃中,李正西. 昆虫学报. 2011(06)
[6]舞毒蛾线粒体DNA全序列分析[J]. 朱雅君,周国梁,房蕊,叶军,易建平. 植物检疫. 2010(04)
[7]龙眼木毒蛾的生物学特性[J]. 陈加福. 福建农业学报. 2010(03)
[8]舞毒蛾在阿勒泰地区的发生规律与综防措施[J]. 崔保成. 农村科技. 2010(04)
[9]基于分子遗传标记技术的舞毒蛾种群遗传关系研究进展[J]. 周贤,陈乃中,杨定. 植物保护. 2009(05)
[10]舞毒蛾种群分子系统学初步研究[J]. 周贤,陈岩,杨定,陈乃中. 植物检疫. 2009(04)
博士论文
[1]天牛科基因条形码构建及分子快速鉴定技术研究[D]. 郑斯竹.南京林业大学 2012
[2]中国野生毛木耳遗传多样性研究[D]. 杜萍.北京林业大学 2011
硕士论文
[1]厦门地区毒蛾的监测和风险分析[D]. 施宣杰.福建农林大学 2010
[2]秦艽及其近缘种的ISSR和HPLC研究[D]. 张文勇.西北大学 2010
[3]樟树几种化学类型及近缘种遗传多样性研究[D]. 邢建宏.福建农林大学 2006
本文编号：3177419
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