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橡胶树对草甘膦药害生理和分子响应机制研究

发布时间:2021-07-29 18:26
  草甘膦是世界销量最大的除草剂,其在橡胶园喷施除草会影响橡胶树生长,甚至会导致橡胶树死亡。但橡胶树草甘膦药害发生机制还不清楚。为了研究橡胶树对草甘膦药害生理和分子响应机制,本文采用植物生理学、分子生物学、生物信息学和转录组技术研究草甘膦对橡胶树药害的作用机制。采用植物生理学方法分析草甘膦对橡胶树叶片的生理指标变化的影响;采用RT-PCR技术克隆橡胶树HbEPSPS基因,用生物信息学分析橡胶树HbEPSPS结构,采用Q-RT-PCR技术系统地分析HbEPSPS在草甘膦、白粉菌、植物激素和胁迫处理后的表达模式;并对喷施草甘膦的橡胶树叶片进行转录组分析。结果如下:1、喷施170mg·L-1草甘膦导致橡胶树叶片脱落,引起新生叶片变长、畸形,下一蓬新生叶形状会部分恢复。草甘膦导致叶绿素含量下降,可溶性糖含量下降,脯氨酸含量升高,过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性增加,但含水量差异不显著。2、莽草酸积累量在草甘膦喷施橡胶树叶片前后呈显著差异,橡胶树叶片出现半黄半绿表型时莽草酸积累量上升,新生畸形叶和恢复叶中莽草酸含量下降。喷施草甘膦后各类型叶片生长素和赤霉素的含量均与未喷施前对照叶片差异不显著,脱落酸和... 

【文章来源】:海南大学海南省 211工程院校

【文章页数】:97 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

橡胶树对草甘膦药害生理和分子响应机制研究


图2莽草酸标准曲线??Fig.?2?Standard?curve?of?shikimic?acid??

橡胶树对草甘膦药害生理和分子响应机制研究


图3?IAA、GA、ABA和-ZR-标准齒线??Fig.?3?Standard?curve?of?IAA,?GA,ABA?and?ZR.??

标准曲线,标准曲线,橡胶树,测序


图5?4cft‘H标准曲线??Fig.5?Standard?curve?oiActin??草甘膦作用下橡胶树叶片转录组测序??1RNA?提取??艮据天根试剂盒说明书分别提取喷施后0?d、1?d、2?d和3?d的橡胶树叶片总??,用1.2?%琼脂糖凝胶电泳检测是否条带(4条或更多)和用超微量核酸蛋白分??测RNA浓度和纯度(OD26()/OD28〇在1.8-2.1)。??2?cDNA文库的建立和测序??图6所示,将检测合格的橡胶树叶片总RNA样品,用带有Oligo(dT)的??集mRNA。加入fragmentation?buffer将mRNA打断成短片段,以mRNA??板,合成cDNA,经过纯化并加EB缓冲液洗脱后做末端修复,加Poly(A)接测序接头,选择合适片段进行PCR扩增,建好的测序文库用Illumina?HiSeq测序。??A提取->?mRNA富集一>?mRNA片段—cDNA合成—>?片段筛选和—射??U?丨?丨?I?—?I?I?mrn?m??

【参考文献】:
期刊论文
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硕士论文
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[4]基于RNA-Seq技术的人转录组分析研究[D]. 陈超.中南大学 2011
[5]草甘膦对大豆叶片生理和形态结构的影响[D]. 卜贵军.东北农业大学 2009
[6]棉花epsps基因的克隆及其表达特性研究[D]. 刘东军.西北农林科技大学 2006



本文编号:3309826

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