不同温度干燥处理下的降香黄檀木材DNA提取方法的研究
发布时间：2021-08-02 06:33
传统的木材识别技术主要是通过比较不同木材间的解剖特征和化学组分的差异将木材识别到属。但近缘物种之间的木材解剖学特征差异性较小,采用传统的木材识别方法难以科学、快速地鉴定木材。随着分子生物学技术的不断发展,很多领域的科研工作者已将分子生物学技术大量应用到自己的研究工作中,期望获得更深层次的突破。分子生物学技术在法医学和考古学研究邻域的成功应用,为科学准确地识别木材提供了新的方法和手段。从木材中提取出足够质量和数量的DNA是应用DNA技术识别木材的前提条件。相比较那些新鲜、幼嫩且具有分生能力的植物组织而言,从木材组织中提取和扩增DNA要困难的多。特别是在木材制品生产和加工过程中,需要对木材进行高温干燥处理,进一步加剧木材DNA的降解增加木材DNA提取难度。因此,本研究以不同干燥温度（25℃、40℃、60℃、80℃和105℃）处理的降香黄檀心、边材为研究对象,采用改良的SDS法、CTAB法和PTB法提取不同干燥温度处理的降香黄檀不同部位木材DNA,并扩增其叶绿体（rbcL和trnH-psbA）和ITS2核基因DNA条形码序列。比较采用三种DNA提取方法对不同干燥温度处理对降香黄檀木材不同部位...
【文章来源】：安徽农业大学安徽省
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同方法提取降香黄檀心、边材DNA浓度Figure5-1TheconcentrationsoftheDNAextractswithdifferentextractionmethodsfromthesapwoodand
由图5-1可以看出，用CTAB法提取的降香黄檀边材DNA浓度最高，用PTB法提取的DNA浓度最低，改良的SDS法提取的DNA浓度介于CTAB法和PTB法之间；用PTB法提取的降香黄檀心材DNA浓度依次高于CTAB法和改良的SDS法。由图5-2可以看出，采用改良的SDS法和CTAB法提取的降香黄檀边材DNA的纯度较好，A260/A280的值分别在在1.85~1.98和1.99~2.02之间；而对于降香黄檀心材而言，采用改良的SDS法和CTAB法提取的DNA的A260/A280的值分别在1.52~1.73和1.38~1.58之间，说明改良的SDS法提取的心材DNA纯度比CTAB法提取的更好。PTB法提取的降香黄檀心、边材DNA的纯度均低于其他两种方法，其A260/A280的值分别在2.96~2.75和2.46~2.80之间。综合比较可知，使用改良的SDS法和CTAB法这两种方法提取的降香黄檀边材DNA纯度较好，能够满足后续PCR对模板DNA纯度的要求；而同样的方法用于降香黄檀心材的DNA提取时发现
图 5-2 不同干燥温度、不同提取方法的降香黄檀边材 rbcL 序列扩增电泳图Figure 5-2 Agarose gel electrophoresis analysis of PCR products rbcL of the sapwood ofDalbergia odoriferaT.Chen from different heat treatments using different kinds of DNA extraction methods注：1-3 号泳道分别为 25℃处理条件下，采用改良的 SDS 法、CTAB 法、PTB 法提取的降香
【参考文献】：
期刊论文
[1]进口黄檀属木材DNA提取与分子鉴定方法初步研究[J]. 伏建国,刘金良,杨晓军,安榆林,骆嘉言. 浙江农林大学学报. 2013(04)
[2]植物DNA条形码研究进展[J]. 鲁松. 四川林业科技. 2012(05)
[3]DNA条形码研究进展[J]. 程希婷,王爱民,顾志峰,王嫣,战欣,石耀华. 基因组学与应用生物学. 2011(06)
[4]改良SDS法提取多种植物基因组DNA研究[J]. 单志,吴宏亮,李成磊,陈惠,吴琦. 广东农业科学. 2011(08)
[5]树种识别技术的研究进展[J]. 贾潇然,刘迎涛. 林业机械与木工设备. 2009(09)
[6]国际生命条形码计划—DNA Barcoding[J]. 程佳月,王丽华,彭克美,张宁波,唐中林,杨述林,李奎. 中国畜牧兽医. 2009(08)
[7]DNA条形码技术的研究进展及其应用[J]. 彭居俐,王绪桢,何舜平. 水生生物学报. 2008(06)
[8]我国木材材种识别技术的新进展[J]. 任洪娥,高洁,马岩. 木材加工机械. 2007(04)
[9]生物分子标记在林木研究中的应用与现状[J]. 张巧仙,范冬梅. 雁北师范学院学报. 2005(02)
[10]海南特有珍贵红木树种——降香黄檀[J]. 邱治军,周光益,陈升华. 林业实用技术. 2004(06)
本文编号：3317084
【文章来源】：安徽农业大学安徽省
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同方法提取降香黄檀心、边材DNA浓度Figure5-1TheconcentrationsoftheDNAextractswithdifferentextractionmethodsfromthesapwoodand
由图5-1可以看出，用CTAB法提取的降香黄檀边材DNA浓度最高，用PTB法提取的DNA浓度最低，改良的SDS法提取的DNA浓度介于CTAB法和PTB法之间；用PTB法提取的降香黄檀心材DNA浓度依次高于CTAB法和改良的SDS法。由图5-2可以看出，采用改良的SDS法和CTAB法提取的降香黄檀边材DNA的纯度较好，A260/A280的值分别在在1.85~1.98和1.99~2.02之间；而对于降香黄檀心材而言，采用改良的SDS法和CTAB法提取的DNA的A260/A280的值分别在1.52~1.73和1.38~1.58之间，说明改良的SDS法提取的心材DNA纯度比CTAB法提取的更好。PTB法提取的降香黄檀心、边材DNA的纯度均低于其他两种方法，其A260/A280的值分别在2.96~2.75和2.46~2.80之间。综合比较可知，使用改良的SDS法和CTAB法这两种方法提取的降香黄檀边材DNA纯度较好，能够满足后续PCR对模板DNA纯度的要求；而同样的方法用于降香黄檀心材的DNA提取时发现
图 5-2 不同干燥温度、不同提取方法的降香黄檀边材 rbcL 序列扩增电泳图Figure 5-2 Agarose gel electrophoresis analysis of PCR products rbcL of the sapwood ofDalbergia odoriferaT.Chen from different heat treatments using different kinds of DNA extraction methods注：1-3 号泳道分别为 25℃处理条件下，采用改良的 SDS 法、CTAB 法、PTB 法提取的降香
【参考文献】：
期刊论文
[1]进口黄檀属木材DNA提取与分子鉴定方法初步研究[J]. 伏建国,刘金良,杨晓军,安榆林,骆嘉言. 浙江农林大学学报. 2013(04)
[2]植物DNA条形码研究进展[J]. 鲁松. 四川林业科技. 2012(05)
[3]DNA条形码研究进展[J]. 程希婷,王爱民,顾志峰,王嫣,战欣,石耀华. 基因组学与应用生物学. 2011(06)
[4]改良SDS法提取多种植物基因组DNA研究[J]. 单志,吴宏亮,李成磊,陈惠,吴琦. 广东农业科学. 2011(08)
[5]树种识别技术的研究进展[J]. 贾潇然,刘迎涛. 林业机械与木工设备. 2009(09)
[6]国际生命条形码计划—DNA Barcoding[J]. 程佳月,王丽华,彭克美,张宁波,唐中林,杨述林,李奎. 中国畜牧兽医. 2009(08)
[7]DNA条形码技术的研究进展及其应用[J]. 彭居俐,王绪桢,何舜平. 水生生物学报. 2008(06)
[8]我国木材材种识别技术的新进展[J]. 任洪娥,高洁,马岩. 木材加工机械. 2007(04)
[9]生物分子标记在林木研究中的应用与现状[J]. 张巧仙,范冬梅. 雁北师范学院学报. 2005(02)
[10]海南特有珍贵红木树种——降香黄檀[J]. 邱治军,周光益,陈升华. 林业实用技术. 2004(06)
本文编号：3317084
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