四倍体刺槐凝集素TRpL1耐盐碱功能研究
发布时间：2021-08-19 08:02
刺槐（Robinia psudoacaciaLinn.）又名洋槐,属于豆科（Leguminosae）刺槐属（Robinia L.）落叶乔木,原产美国,具有较强的适应性。四倍体刺槐（Tetraploid Robinia pseudoacacia Linn.）也称多倍体刺槐,是由人工诱导二倍体刺槐染色体加倍而育成的优良树种。与二倍体刺槐相比,四倍体刺槐各项指标均优于二倍体,具有耐盐碱、耐干旱、抗病虫害能力强等特点。凝集素（lectin）是一类广泛存在于动物、植物和微生物中,调控着保护及防御等生物学过程。本研究利用分子生物技术,从盐胁迫的四倍体刺槐中克隆得到一个凝集素基因TRpL1,通过荧光定量、原核表达等方法对其进行了一系列生理生化与分子生物学研究,得到的结果如下:（1）利用生物信息学方法分析TRpL1蛋白的结构特点,预测了信号肽、结构域、亚细胞定位、修饰位点等,发现其定位在叶绿体或细胞膜中。（2）构建了重组蛋白原核表达载体pQE-TRpL1,并优化了 pQE-TRpL1蛋白的表达条件,结果显示TRpL1蛋白原核表达的最佳条件是:诱导温度为28℃,诱导4小时,诱导剂IPTG浓度为0.1 m...
【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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【参考文献】：
期刊论文
[1]拟南芥新基因SI（stress insensitive）参与非生物胁迫应答（英文）[J]. 邹婷,刘唤唤,刘永胜,汪松虎. 应用与环境生物学报. 2018(02)
[2]非生物逆境胁迫下甘蔗CBL1和CBL6基因表达分析[J]. 凌秋平,曾巧英,吴嘉云,胡斐,李奇伟,齐永文. 分子植物育种. 2018(02)
[3]盐胁迫下硝态氮对甘薯生长及渗透调节的影响[J]. 李威威,丁效东,刘庆,张德龙,李路瑶,张士荣. 热带作物学报. 2018(01)
[4]6-BA浸种对盐胁迫下绿豆萌发及幼苗生理特性的影响[J]. 刘建霞,张晓丹,王润梅,周凤,刘文英,刘支平. 作物杂志. 2018(01)
[5]肠杆菌FYP1101对盐胁迫下小麦幼苗的促生效应[J]. 许芳芳,袁立敏,邵玉芳,范国花,周心爱,郑文玲,李冬梅,冯福应. 微生物学通报. 2018(01)
[6]四倍体刺槐组织培养研究[J]. 秦秀兰,庞惠仙,王少龙. 西部林业科学. 2017(04)
[7]盐胁迫和水分胁迫对野生大豆种子萌发及幼苗生长的影响[J]. 李为民,李倩,柏国清,陈昊,李思锋. 分子植物育种. 2018(01)
[8]植物MAPK级联在逆境胁迫响应中的作用研究进展[J]. 林俐,吴健. 分子植物育种. 2018(01)
[9]非生物逆境胁迫对ABA影响的研究现状[J]. 杨果果,苗彩云,杨喜田. 河南农业. 2016(31)
[10]大豆GmPRP转基因拟南芥抗盐性鉴定[J]. 翟莹,张军,陈阳,杨晓杰,赵艳,侯美如,田俊. 大豆科学. 2015(02)
博士论文
[1]半夏属植物凝集素和拟南芥SWI-SNF相关的染色体结合蛋白基因的鉴定及功能研究[D]. 赵欢.四川农业大学 2015
[2]碳酸盐逆境下虎尾草叶片蛋白质组学研究[D]. 罗秋香.东北林业大学 2006
[3]利用裂殖酵母体系，拟南芥盐胁迫应答相关基因的克隆、鉴定及转基因分析[D]. 唐亚雄.四川大学 2002
硕士论文
[1]拟南芥JAL30基因的克隆及功能研究[D]. 卞江虎.福建农林大学 2017
[2]水稻OsJRL基因的克隆与分析[D]. 徐魏.四川农业大学 2015
[3]拟南芥类凝集素基因AtLECL1的功能研究[D]. 陈卓.河北农业大学 2013
[4]盐胁迫下四倍体刺槐的基因表达及蛋白质组学分析[D]. 刘磊.东北林业大学 2012
[5]四倍体刺槐的组培快繁及抗盐性研究[D]. 王疆江.东北林业大学 2009
本文编号：3351035
【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１四倍体刺槐凝集素基因的克隆??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?Ｃｌｏｎｉｎｇ?ｏｆ?ｌｅｃｔｉｎ?ｇｅｎｅ?ｆｒｏｍ?Ｔｅｔｒａｐｌｏｉｄ?Ｒ．?ｐｓｅｕｄｏａｃａｃｉａ．??
２．３．１四倍体刺槐凝集素基因克隆??利用试剂盒法提取总ＲＮＡ，反转录合成ｃＤＮＡ后，以ｃＤＮＡ为模板扩增得到；基??因（图２－１?Ａ），与Ｔ载体质粒连接，转化。挑取的４个单菌落ＰＣＲ检测，菌落的检测结果??均为显示阳性（图２－１?Ｂ）。阳性菌株测序获得一条８５８?ｂｐ的全长基因，说明克隆成??功。??ＤＬ?５０００?１?２?ＤＬ?５０Ｑ０?１２?３?４??＿＿Ｐ＿Ｓ謂３：警麗１１＿＿画＾?ｒ?覽冒??Ａ?Ｂ??图２－１四倍体刺槐凝集素基因的克隆??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?Ｃｌｏｎｉｎｇ?ｏｆ?ｌｅｃｔｉｎ?ｇｅｎｅ?ｆｒｏｍ?Ｔｅｔｒａｐｌｏｉｄ?Ｒ．?ｐｓｅｕｄｏａｃａｃｉａ．??２．３．２?基因生物信息学分析??（１）?７７？ｐＺＪ进化树分析??进化树结果显示７７０１７与其他刺槐凝集素亲缘关系最近，推测它们可能具有类似或同样??的功能；与百脉根聚为一类，与美国香槐的亲缘关系较远，与菜豆属的进化差异则更大，相??比于其他豆科凝集素有较大距离（图２－２）。??－１２－??
?１５０?２００??图２－４?７７０Ｚ／基因编码蛋白质二级结构预测??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４?Ｐｒｏｔｅｉｎ?Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ?Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ＴＲｐＬｌ?Ｇｅｎｅ?Ｅｎｃｏｄｉｎｇ??（４）蛋白质三级结构预测??利用ＳＷＩＳＳ－ＭＯＤＥＬ蛋白质三级结构在线预测工具对？?７７？ｐＺＪ基因编码的蛋白质的三级??结构进行预测
【参考文献】：
期刊论文
[1]拟南芥新基因SI（stress insensitive）参与非生物胁迫应答（英文）[J]. 邹婷,刘唤唤,刘永胜,汪松虎. 应用与环境生物学报. 2018(02)
[2]非生物逆境胁迫下甘蔗CBL1和CBL6基因表达分析[J]. 凌秋平,曾巧英,吴嘉云,胡斐,李奇伟,齐永文. 分子植物育种. 2018(02)
[3]盐胁迫下硝态氮对甘薯生长及渗透调节的影响[J]. 李威威,丁效东,刘庆,张德龙,李路瑶,张士荣. 热带作物学报. 2018(01)
[4]6-BA浸种对盐胁迫下绿豆萌发及幼苗生理特性的影响[J]. 刘建霞,张晓丹,王润梅,周凤,刘文英,刘支平. 作物杂志. 2018(01)
[5]肠杆菌FYP1101对盐胁迫下小麦幼苗的促生效应[J]. 许芳芳,袁立敏,邵玉芳,范国花,周心爱,郑文玲,李冬梅,冯福应. 微生物学通报. 2018(01)
[6]四倍体刺槐组织培养研究[J]. 秦秀兰,庞惠仙,王少龙. 西部林业科学. 2017(04)
[7]盐胁迫和水分胁迫对野生大豆种子萌发及幼苗生长的影响[J]. 李为民,李倩,柏国清,陈昊,李思锋. 分子植物育种. 2018(01)
[8]植物MAPK级联在逆境胁迫响应中的作用研究进展[J]. 林俐,吴健. 分子植物育种. 2018(01)
[9]非生物逆境胁迫对ABA影响的研究现状[J]. 杨果果,苗彩云,杨喜田. 河南农业. 2016(31)
[10]大豆GmPRP转基因拟南芥抗盐性鉴定[J]. 翟莹,张军,陈阳,杨晓杰,赵艳,侯美如,田俊. 大豆科学. 2015(02)
博士论文
[1]半夏属植物凝集素和拟南芥SWI-SNF相关的染色体结合蛋白基因的鉴定及功能研究[D]. 赵欢.四川农业大学 2015
[2]碳酸盐逆境下虎尾草叶片蛋白质组学研究[D]. 罗秋香.东北林业大学 2006
[3]利用裂殖酵母体系，拟南芥盐胁迫应答相关基因的克隆、鉴定及转基因分析[D]. 唐亚雄.四川大学 2002
硕士论文
[1]拟南芥JAL30基因的克隆及功能研究[D]. 卞江虎.福建农林大学 2017
[2]水稻OsJRL基因的克隆与分析[D]. 徐魏.四川农业大学 2015
[3]拟南芥类凝集素基因AtLECL1的功能研究[D]. 陈卓.河北农业大学 2013
[4]盐胁迫下四倍体刺槐的基因表达及蛋白质组学分析[D]. 刘磊.东北林业大学 2012
[5]四倍体刺槐的组培快繁及抗盐性研究[D]. 王疆江.东北林业大学 2009
本文编号：3351035
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