珙桐种子在萌发过程中的蛋白质组学分析
发布时间：2021-11-16 15:02
珙桐是我国特有的国家一级保护濒危植物,具有很高的学术价值和观赏价值。本研究以珙桐种子为研究对象,通过比较不同的蛋白提取方案,蛋白质含量测定,以及去高丰度蛋白方案,确定了珙桐种子全蛋白提取方法,利用i TRAQ技术比较了种子在不同层积时期蛋白组学的变化。主要研究结果如下:（1）对8种全蛋白提取方案,采用相同上样量,通过SDS-PAGE单向电泳,得到电泳条带较多、蛋白质组分完全且各组分量均匀的方案,即无沉淀分馏法。（2）同一层积时间段珙桐种子子叶的蛋白含量要比胚轴的少;在不同层积时期,珙桐种子胚轴中蛋白质含量随着层积时间的增加而减少。（3）由于大量的高丰度蛋白出现在电泳凝胶上,影响对低丰度蛋白的检测。通过去高丰度蛋白法的研究发现,以4%的体积比例在蛋白提取液中加入PEG6000粉末来沉淀高丰度蛋白的方案要比5%和6%的效果好,且当PEG的浓度12%的时候效果最佳。（4）运用i TRAQ技术共鉴定珙桐种子蛋白质867种,对层积前、湿砂层积8个月和13个月的珙桐种子蛋白表达谱进行两两相比,鉴定出差异表达蛋白质共计682种,其中差异倍数达到2倍的蛋白共300种,占到所鉴定蛋白总数的44%;在30...
【文章来源】：湖北民族大学湖北省
【文章页数】：104 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
去高丰度蛋白的实验流程
图 3.1 珙桐的果实与种子Fig. 3.1 The fruits and seeds of Davidia involucrata取蛋白方法的比较质的提取方法的不同，所提取的样品提取液的总蛋白含量也是用不同方案提取珙桐种子子叶蛋白质的含量。 可看出，方案一提取的的总蛋白是最高的，而方案五所提取的蛋取的珙桐种子子叶总蛋白的时候，TCA 沉淀法得到的蛋白含量的 0.3 倍，但是高丰度蛋白太多，会影响到接下来的分析。通过酸缓冲液提取的方法的结果，要比其他方案的蛋白含量要少，全，各组分的量也是参差不齐、不均匀。
图 3.2 用不同方案提取珙桐种子子叶蛋白质的含量比较mparison of extraction content of its seed cotyledon proteins different提取植物总蛋白的方法上，可以用 SDS-PAGE 电泳鉴定分析，取液的组分。图 3.3 即为方案一到方案八所提取的样品提取电泳而获得的凝胶图像。从左到右的泳道的顺序为 TCA 沉淀法、 1)、TCA-丙酮沉淀法 (样 2)、无沉淀分馏法 (样 1)、无沉淀分馏法甲醇\醋酸铵沉淀法、全蛋白提取液提取法、磷酸缓冲液提取法、萃取甲醇\醋酸铵沉淀改良法。ford 法测定的蛋白质浓度，虽然价格比较便宜，检测速度很快，白提取液提取法是为提取各种植物组织的全蛋白样品，而最为常是 TCA-丙酮沉淀法。从图中可以看出，方案一的高丰度蛋白太TCA-丙酮沉淀法的 2 个样品、无沉淀分馏法的 2 个样品和苯酚萃法所提取的共 5 个样品的蛋白含量相差不大，通过电泳实验和结
【参考文献】：
期刊论文
[1]珙桐苗木繁殖技术[J]. 南北花. 林业与生态. 2015(01)
[2]珍稀濒危植物珙桐初代培养研究[J]. 植爽,胡艳,曹婧,肖小君,陈文年. 江苏林业科技. 2014(04)
[3]水稻草状矮化病毒侵染寄主水稻差异表达蛋白的鉴定和分析[J]. 丁新伦,谢荔岩,吴祖建. 中国农业科学. 2014(09)
[4]珍稀濒危植物珙桐的研究现状及展望[J]. 陈文年,肖小君,陈发军,植爽. 安徽农学通报. 2014(07)
[5]晋麦47幼苗叶片水分胁迫差异表达蛋白的鉴定与分析[J]. 范锋贵,金秀锋,叶石,任万杰,张帆,鞠丽萍,王宏礼,张晓科. 麦类作物学报. 2013(03)
[6]玉米杂交种与亲本雌穗花器官形成期蛋白差异表达谱分析[J]. 郭宝健,宋方威,冯万军,隋志鹏,孙其信,倪中福. 作物学报. 2013(05)
[7]种子蛋白质组的研究现状与展望[J]. 刘迪,沈海龙,张鹏. 种子. 2012(06)
[8]小麦磷饥饿前后根系蛋白质组差异表达谱建立及差异表达蛋白的鉴定[J]. 冯万军,李振兴,郭宝健,彭惠茹,姚颖垠,倪中福,孙其信. 作物学报. 2012(05)
[9]ABA在种子发育·休眠和萌发过程中的生理调控[J]. 葛苏洁,李淑娟. 安徽农业科学. 2011(18)
[10]三江口自然保护区光叶珙桐的种群特征和保护对策[J]. 王磊,代勋,汤家鑫,黄良江,祁岑,杨顺强. 安徽农业科学. 2010(30)
博士论文
[1]哈密瓜响应青霉菌侵染的转录组和蛋白组研究及相关抗性酶变化分析[D]. 单春会.江南大学 2015
[2]苜蓿雄性不育性的转录组和蛋白质组差异表达分析[D]. 伊风艳.内蒙古农业大学 2014
[3]棉花响应黄萎病菌分子机制的蛋白质组学研究及HDTF1基因的功能鉴定[D]. 高巍.华中农业大学 2014
[4]根瘤提高紫花苜蓿耐盐性的蛋白质组研究[D]. 张攀.西北农林科技大学 2014
[5]水稻种子萌发的蛋白质组学研究[D]. 韩超.中国科学院研究生院（武汉植物园） 2014
[6]甘蔗应答黑穗病菌侵染的转录组与蛋白组研究及抗性相关基因挖掘[D]. 苏亚春.福建农林大学 2014
[7]黄瓜果实弯曲性蛋白质组学研究[D]. 王丽莉.东北农业大学 2013
[8]不同致病力柑橘衰退病毒株系诱导甜橙表达差异蛋白质组学研究[D]. 杨方云.西南大学 2012
[9]Candidatus liberibacter asiaticus诱导的柑橘转录组学及蛋白组学研究[D]. 钟云.湖南农业大学 2012
[10]种子保存过程中生活力丧失特性及其机理研究[D]. 辛霞.中国农业科学院 2012
硕士论文
[1]低温胁迫下香蕉幼苗叶片生理指标及差异蛋白表达研究[D]. 庞昇泽.广西大学 2015
[2]野生和栽培大豆苗期根尖解剖结构及蛋白表达差异[D]. 李锋.南昌大学 2014
[3]基于iTRAQ技术的小麦BNS雄性不育差异表达蛋白分离鉴定与分析[D]. 秦志英.河南科技学院 2013
[4]低氮胁迫下烟草叶片差异表达蛋白的筛选及鉴定[D]. 许俐.河南农业大学 2013
[5]龙眼子叶胚发育过程中差异表达蛋白的研究[D]. 王静.福建农林大学 2009
本文编号：3499119
【文章来源】：湖北民族大学湖北省
【文章页数】：104 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
去高丰度蛋白的实验流程
图 3.1 珙桐的果实与种子Fig. 3.1 The fruits and seeds of Davidia involucrata取蛋白方法的比较质的提取方法的不同，所提取的样品提取液的总蛋白含量也是用不同方案提取珙桐种子子叶蛋白质的含量。 可看出，方案一提取的的总蛋白是最高的，而方案五所提取的蛋取的珙桐种子子叶总蛋白的时候，TCA 沉淀法得到的蛋白含量的 0.3 倍，但是高丰度蛋白太多，会影响到接下来的分析。通过酸缓冲液提取的方法的结果，要比其他方案的蛋白含量要少，全，各组分的量也是参差不齐、不均匀。
图 3.2 用不同方案提取珙桐种子子叶蛋白质的含量比较mparison of extraction content of its seed cotyledon proteins different提取植物总蛋白的方法上，可以用 SDS-PAGE 电泳鉴定分析，取液的组分。图 3.3 即为方案一到方案八所提取的样品提取电泳而获得的凝胶图像。从左到右的泳道的顺序为 TCA 沉淀法、 1)、TCA-丙酮沉淀法 (样 2)、无沉淀分馏法 (样 1)、无沉淀分馏法甲醇\醋酸铵沉淀法、全蛋白提取液提取法、磷酸缓冲液提取法、萃取甲醇\醋酸铵沉淀改良法。ford 法测定的蛋白质浓度，虽然价格比较便宜，检测速度很快，白提取液提取法是为提取各种植物组织的全蛋白样品，而最为常是 TCA-丙酮沉淀法。从图中可以看出，方案一的高丰度蛋白太TCA-丙酮沉淀法的 2 个样品、无沉淀分馏法的 2 个样品和苯酚萃法所提取的共 5 个样品的蛋白含量相差不大，通过电泳实验和结
【参考文献】：
期刊论文
[1]珙桐苗木繁殖技术[J]. 南北花. 林业与生态. 2015(01)
[2]珍稀濒危植物珙桐初代培养研究[J]. 植爽,胡艳,曹婧,肖小君,陈文年. 江苏林业科技. 2014(04)
[3]水稻草状矮化病毒侵染寄主水稻差异表达蛋白的鉴定和分析[J]. 丁新伦,谢荔岩,吴祖建. 中国农业科学. 2014(09)
[4]珍稀濒危植物珙桐的研究现状及展望[J]. 陈文年,肖小君,陈发军,植爽. 安徽农学通报. 2014(07)
[5]晋麦47幼苗叶片水分胁迫差异表达蛋白的鉴定与分析[J]. 范锋贵,金秀锋,叶石,任万杰,张帆,鞠丽萍,王宏礼,张晓科. 麦类作物学报. 2013(03)
[6]玉米杂交种与亲本雌穗花器官形成期蛋白差异表达谱分析[J]. 郭宝健,宋方威,冯万军,隋志鹏,孙其信,倪中福. 作物学报. 2013(05)
[7]种子蛋白质组的研究现状与展望[J]. 刘迪,沈海龙,张鹏. 种子. 2012(06)
[8]小麦磷饥饿前后根系蛋白质组差异表达谱建立及差异表达蛋白的鉴定[J]. 冯万军,李振兴,郭宝健,彭惠茹,姚颖垠,倪中福,孙其信. 作物学报. 2012(05)
[9]ABA在种子发育·休眠和萌发过程中的生理调控[J]. 葛苏洁,李淑娟. 安徽农业科学. 2011(18)
[10]三江口自然保护区光叶珙桐的种群特征和保护对策[J]. 王磊,代勋,汤家鑫,黄良江,祁岑,杨顺强. 安徽农业科学. 2010(30)
博士论文
[1]哈密瓜响应青霉菌侵染的转录组和蛋白组研究及相关抗性酶变化分析[D]. 单春会.江南大学 2015
[2]苜蓿雄性不育性的转录组和蛋白质组差异表达分析[D]. 伊风艳.内蒙古农业大学 2014
[3]棉花响应黄萎病菌分子机制的蛋白质组学研究及HDTF1基因的功能鉴定[D]. 高巍.华中农业大学 2014
[4]根瘤提高紫花苜蓿耐盐性的蛋白质组研究[D]. 张攀.西北农林科技大学 2014
[5]水稻种子萌发的蛋白质组学研究[D]. 韩超.中国科学院研究生院（武汉植物园） 2014
[6]甘蔗应答黑穗病菌侵染的转录组与蛋白组研究及抗性相关基因挖掘[D]. 苏亚春.福建农林大学 2014
[7]黄瓜果实弯曲性蛋白质组学研究[D]. 王丽莉.东北农业大学 2013
[8]不同致病力柑橘衰退病毒株系诱导甜橙表达差异蛋白质组学研究[D]. 杨方云.西南大学 2012
[9]Candidatus liberibacter asiaticus诱导的柑橘转录组学及蛋白组学研究[D]. 钟云.湖南农业大学 2012
[10]种子保存过程中生活力丧失特性及其机理研究[D]. 辛霞.中国农业科学院 2012
硕士论文
[1]低温胁迫下香蕉幼苗叶片生理指标及差异蛋白表达研究[D]. 庞昇泽.广西大学 2015
[2]野生和栽培大豆苗期根尖解剖结构及蛋白表达差异[D]. 李锋.南昌大学 2014
[3]基于iTRAQ技术的小麦BNS雄性不育差异表达蛋白分离鉴定与分析[D]. 秦志英.河南科技学院 2013
[4]低氮胁迫下烟草叶片差异表达蛋白的筛选及鉴定[D]. 许俐.河南农业大学 2013
[5]龙眼子叶胚发育过程中差异表达蛋白的研究[D]. 王静.福建农林大学 2009
本文编号：3499119
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