橡胶树胶孢炭疽菌G蛋白信号调控因子CgRGS1、CgRGS2和CgRGS7的克隆及生物学功能
发布时间：2021-12-09 07:23
橡胶种植业在中国热区农业生产中具有举足轻重的地位,更作为海南经济的基础产业和优势产业,然而由胶孢炭疽菌引起的炭疽病是橡胶树的重大病害之一,对各时期的橡胶树叶片造成了不同程度的危害,严重降低橡胶的年产量。而导致该病害的主要病原真菌—胶孢炭疽菌不仅生长范围非常广泛,其侵染寄主方式也多种多样,由此可见,深入研究分析该菌在致病过程中相关基因的表达及调控网络,了解胶孢炭疽菌与宿主的互作机制,进而为有效防治该病菌提供重要的理论指导。G蛋白信号调控因子（Regulatorsof G-protein signaling, RGS）是G蛋白的一类负调控因子,在植物病原菌生长发育及致病过程中发挥着重要的作用,其中RGS结构域是RGS蛋白发挥GTP酶激活作用的关键基础。在本实验室的前期研究中,我们从胶孢炭疽菌中鉴定了 10个潜在的RGS蛋白,它们都包含RGS功能域,本研究在其基础上通过克隆胶孢炭疽菌的3个RGS基因,分别是CgRGS1、CgRGS2和CgRGS7,分析其蛋白序列,并进行相应的生物性状研究,进一步确证其生物学功能。取得的结果如下:1.克隆获得了 3个基因,经比对发现其分别与稻瘟病菌中的MoRG...
【文章来源】：海南大学海南省 211工程院校
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２?ＣｇＲＧＳｌ基因敲除原理??Ｆｉ．?２?Ｇｅｎｅ?ｋｎｏｃｋｏｕｔｒｉｎｃｉｌｅ?ｏｆ?ＣＲＧＳｌ??
５２８位氨基酸），在Ｃ末端第５６６？７１２位氨基酸含有一个ＲＧＳ功能域（图３）。理??化性质预测显示ＣｇＲＧＳｌ分子质量约为８０９７０．２７?Ｄａ，理论等电点（ｐｉ）为９．０９。??将ＣｇＲＧＳｌ在ＧｅｎＢａｎｋ中利用ＢＬＡＳＴｐ工具比对，利用氨基酸序列进行同源检??索，选择１２个来自不同真菌的ＲＧＳ蛋白序列构建系统发育树（图４）。ＣｇＲＧＳｌ与??同属同种的?Ｃ?ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ＂Ｎａｒａ?ｇｃ５?ＲＧＳ?蛋白（ＸＰ＿００７２７８４１６．１）相似度达到?９９％，??此外ＣｇＲＧＳｌ与棉花黄萎病菌（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ?ｄａｈｌｉａｅ）、苹果腐烂病菌ＱＶａｌｓａ?ｍａｌｆ）??
，阳性转化子居大多数，以提取出的转化子基因组为模版，并且以野生型基因组为模版??做空白对照，利用?３?对引物?ＣｇＲＧＳｌＦ＋ＣｇＲＧＳｌＲ、ＣｇＲＧＳｌＵＵ＋ＰＫ?ＰＩ?１＋ＣｇＲＧＳｌＤＤ??（附录１）进行筛选验证，结果显示转化子第６９号的ＣｇＲＧＳｌＦ＋ＣｇＲＧＳＩＲ无扩增条??带，而通过ＣｇＲＧＳｌ?ＵＵ＋ＰＩ、ＰＩｌ＋ＣｇＲＧＳＩＤＤ引物进行鉴定，扩增出的目的条带与??设计的引物序列大小一致，约１５００ｂｐ?（图５），即确定６９号为阳性转化子，命名为??
【参考文献】：
期刊论文
[1]胶孢炭疽菌致病相关基因Plv2功能分析[J]. 郑肖兰,李秋洁,许沛冬,吴伟怀,梁艳琼,郑金龙,习金根,李锐,黄兴,李乐,杨青青,贺春萍,易克贤. 植物病理学报. 2017(05)
[2]胶孢炭疽菌CgSho1基因的克隆与功能分析[J]. 张楠,柳志强,吴曼莉,李晓宇. 植物病理学报. 2017(01)
[3]萘乙酸对橡胶树胶胞炭疽菌生长速率、孢子萌发率和附着胞形成率的影响[J]. 郑肖兰,胡飞,梁艳琼,吴伟怀,郑金龙,习金根,李锐,贺春萍,易克贤. 热带农业科学. 2016(08)
[4]9种杀菌剂对核桃炭疽病菌的抑制作用及联合毒力[J]. 王凡,胡奎,江慧,陈然,李黎,方洋,李俊凯. 江苏农业科学. 2015(06)
[5]稻瘟菌侵染过程相关信号通路研究进展[J]. 叶幸,孙群,刘柱. 中国农业科技导报. 2015(01)
[6]胶孢炭疽菌侵染过程相关基因研究进展[J]. 韩长志. 广东农业科学. 2014(09)
[7]天然橡胶种植现状及市场需求预测分析[J]. 鞠岩峰,张剑,吴润,师君,王砚峰. 林业资源管理. 2014(01)
[8]丝状真菌G蛋白信号途径的研究进展[J]. 李利,陈莎,毛涛,陈福生. 微生物学通报. 2013(08)
[9]景洪农场橡胶树炭疽病的发生及防治措施[J]. 李兵,韩开伦,张云,王云忠,丁传. 农业科技通讯. 2012(03)
[10]2011年琼中县橡胶树炭疽病重发成因及防控对策[J]. 陈仁强. 现代农业科技. 2011(17)
博士论文
[1]稻瘟病菌G蛋白及MAPK信号途径相关基因的功能分析[D]. 张海峰.南京农业大学 2011
[2]大豆疫霉G蛋白和钙信号途径的功能分析[D]. 华辰雷.南京农业大学 2008
[3]玉米大斑病菌MAPK基因的克隆和功能分析[D]. 范永山.河北农业大学 2004
[4]钙信号传导途径参与稻瘟病菌生长及致病性的调控[D]. 王立安.南京农业大学 2004
硕士论文
[1]22种植物提取物防治橡胶树炭疽病的研究[D]. 古鑫.海南大学 2012
[2]橡胶老叶炭疽病病原菌的生物学、对药物的敏感性及ITS序列分析[D]. 崔昌华.华南热带农业大学 2006
本文编号：3530199
【文章来源】：海南大学海南省 211工程院校
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２?ＣｇＲＧＳｌ基因敲除原理??Ｆｉ．?２?Ｇｅｎｅ?ｋｎｏｃｋｏｕｔｒｉｎｃｉｌｅ?ｏｆ?ＣＲＧＳｌ??
５２８位氨基酸），在Ｃ末端第５６６？７１２位氨基酸含有一个ＲＧＳ功能域（图３）。理??化性质预测显示ＣｇＲＧＳｌ分子质量约为８０９７０．２７?Ｄａ，理论等电点（ｐｉ）为９．０９。??将ＣｇＲＧＳｌ在ＧｅｎＢａｎｋ中利用ＢＬＡＳＴｐ工具比对，利用氨基酸序列进行同源检??索，选择１２个来自不同真菌的ＲＧＳ蛋白序列构建系统发育树（图４）。ＣｇＲＧＳｌ与??同属同种的?Ｃ?ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ＂Ｎａｒａ?ｇｃ５?ＲＧＳ?蛋白（ＸＰ＿００７２７８４１６．１）相似度达到?９９％，??此外ＣｇＲＧＳｌ与棉花黄萎病菌（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ?ｄａｈｌｉａｅ）、苹果腐烂病菌ＱＶａｌｓａ?ｍａｌｆ）??
，阳性转化子居大多数，以提取出的转化子基因组为模版，并且以野生型基因组为模版??做空白对照，利用?３?对引物?ＣｇＲＧＳｌＦ＋ＣｇＲＧＳｌＲ、ＣｇＲＧＳｌＵＵ＋ＰＫ?ＰＩ?１＋ＣｇＲＧＳｌＤＤ??（附录１）进行筛选验证，结果显示转化子第６９号的ＣｇＲＧＳｌＦ＋ＣｇＲＧＳＩＲ无扩增条??带，而通过ＣｇＲＧＳｌ?ＵＵ＋ＰＩ、ＰＩｌ＋ＣｇＲＧＳＩＤＤ引物进行鉴定，扩增出的目的条带与??设计的引物序列大小一致，约１５００ｂｐ?（图５），即确定６９号为阳性转化子，命名为??
【参考文献】：
期刊论文
[1]胶孢炭疽菌致病相关基因Plv2功能分析[J]. 郑肖兰,李秋洁,许沛冬,吴伟怀,梁艳琼,郑金龙,习金根,李锐,黄兴,李乐,杨青青,贺春萍,易克贤. 植物病理学报. 2017(05)
[2]胶孢炭疽菌CgSho1基因的克隆与功能分析[J]. 张楠,柳志强,吴曼莉,李晓宇. 植物病理学报. 2017(01)
[3]萘乙酸对橡胶树胶胞炭疽菌生长速率、孢子萌发率和附着胞形成率的影响[J]. 郑肖兰,胡飞,梁艳琼,吴伟怀,郑金龙,习金根,李锐,贺春萍,易克贤. 热带农业科学. 2016(08)
[4]9种杀菌剂对核桃炭疽病菌的抑制作用及联合毒力[J]. 王凡,胡奎,江慧,陈然,李黎,方洋,李俊凯. 江苏农业科学. 2015(06)
[5]稻瘟菌侵染过程相关信号通路研究进展[J]. 叶幸,孙群,刘柱. 中国农业科技导报. 2015(01)
[6]胶孢炭疽菌侵染过程相关基因研究进展[J]. 韩长志. 广东农业科学. 2014(09)
[7]天然橡胶种植现状及市场需求预测分析[J]. 鞠岩峰,张剑,吴润,师君,王砚峰. 林业资源管理. 2014(01)
[8]丝状真菌G蛋白信号途径的研究进展[J]. 李利,陈莎,毛涛,陈福生. 微生物学通报. 2013(08)
[9]景洪农场橡胶树炭疽病的发生及防治措施[J]. 李兵,韩开伦,张云,王云忠,丁传. 农业科技通讯. 2012(03)
[10]2011年琼中县橡胶树炭疽病重发成因及防控对策[J]. 陈仁强. 现代农业科技. 2011(17)
博士论文
[1]稻瘟病菌G蛋白及MAPK信号途径相关基因的功能分析[D]. 张海峰.南京农业大学 2011
[2]大豆疫霉G蛋白和钙信号途径的功能分析[D]. 华辰雷.南京农业大学 2008
[3]玉米大斑病菌MAPK基因的克隆和功能分析[D]. 范永山.河北农业大学 2004
[4]钙信号传导途径参与稻瘟病菌生长及致病性的调控[D]. 王立安.南京农业大学 2004
硕士论文
[1]22种植物提取物防治橡胶树炭疽病的研究[D]. 古鑫.海南大学 2012
[2]橡胶老叶炭疽病病原菌的生物学、对药物的敏感性及ITS序列分析[D]. 崔昌华.华南热带农业大学 2006
本文编号：3530199
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