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Pu-miR172d调控大青杨气孔发育响应干旱胁迫的机理研究

发布时间:2021-12-25 10:40
  气孔是植物表皮由两个保卫细胞围绕形成的小孔,在调节植物光合固碳和水分散失的平衡方面影响颇大。气孔的发生是一种复杂的生物学过程,受多种基因所调控。气孔的发育不但可以影响植物的生长,也关系到植物应对环境胁迫的能力。目前,已有一些报道发现miRNA可以参与到气孔的发生过程,但其分子作用机制仍然不是很清晰。本研究旨在初步阐明大青杨miR172调控气孔发育响应干旱胁迫的分子机理。利用生物化学、分子生物学和基因工程等手段对大青杨Pu-miR172d及其靶基因PuGTL1的分子功能进行了分析鉴定。(1)小RNA转录组数据中靶基因预测结果发现Trihelix基因家族成员PuGTL1是Pu-miR172d的靶基因。利用5’RLM-RACE技术及农杆菌瞬时转化实验验证了 PuGTL1确实为Pu-miR172d的靶基因。首次在大青杨中发现了Pu-miR 72可以结合Trihelix家族的转录因子;(2)利用生物信息学方法和qRT-PCR技术对毛果杨Trihelix转录因子家族进行初步的分类及功能鉴定。Trihelix家族由56个成员构成,可分为五个亚族。其中,大多数基因都可以响应渗透胁迫。exImage分析... 

【文章来源】:东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:163 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

Pu-miR172d调控大青杨气孔发育响应干旱胁迫的机理研究


图2-2三个时期花芽相对于叶芽和茎尖的表达水平??X轴表示?

Pu-miR172d调控大青杨气孔发育响应干旱胁迫的机理研究


图2-3?miRNA的聚类分析??

花芽发育,内参


通过qRT-PCR分析了?6个直接或间接与开花相关的miRNA,这里同样以叶芽和??茎尖作为对照组。在这些miRNA中,和?m7?777e上调表达,而miR156e、??和下调(如图2-5)。的表达水平随着花芽发育而逐渐??增加。尽管w认在花芽发育中与对照相比表达量下调,但是仍然具有上升??的趋势。总的结果与聚类分析相一致,因此证明了本研宄数据结果的可信性较??高。??^?^?^?、?miR164s?〇?EBi(tI64a?^?,??tRl?6?f??i^i?y.,,?i?J?i?11?ijl?§?111111?i?nil??mrmmmd?>n.i.ii?????■nWMl???i__.il?tiin.1????ill.?■?—??a?nuR!6?a?b??iR]6?办?^??tiR393a?a?miH393A???inlKlTle??bj?I?一?}:L」"?jULl?]j?111????|_-?I?i?■?r?&mm?n?I:?hMM?_?■??I:?*?_*1?MM3?MBril?H??n?I??—_l1?_??l??图2-5六个花芽发育相关miRNA的qRT-PCR验证??5.8S?rRNA作为qRT-PCR的内参。实验进行三次生物重复。??Fig.2-5?QRT-PCR?of?six?flower-related?miRNAs

【参考文献】:
期刊论文
[1]植物Trihelix转录因子家族研究进展[J]. 罗军玲,赵娜,卢长明.  遗传. 2012(12)
[2]调控植物花发育的miRNAs的研究进展[J]. 覃成,张志明,刘红军,高健,荣廷昭,潘光堂.  农业生物技术学报. 2011(05)
[3]植物GT元件和GT因子的研究进展[J]. 关秋玲,陈焕新,张毅,李秋莉.  遗传. 2009(02)
[4]植物C2H2型锌指蛋白的结构与功能[J]. 黄骥,王建飞,张红生.  遗传. 2004(03)
[5]植物转录因子的结构与调控作用[J]. 刘强,张贵友,陈受宜.  科学通报. 2000(14)



本文编号:3552303

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