珙桐离体胚轴超低温保存及其脱水耐性和低温耐性机制
发布时间：2022-02-10 23:58
超低温保存目前被认为是非正常性种子长期保存最理想的方式。珙桐（Davidia involucrata Baill）是中国特有的濒危孑遗植物,其种子同时具有顽拗性和休眠特性,自然条件下萌发困难且活力保持时间短,实现其种质的长期保存具有重要意义。本研究以珙桐离体胚轴为研究对象,利用变色硅胶对其进行适当的快速脱水处理后投入液氮保存,保存一定时间后解冻并通过组培方法检测存活率;在成功实现超低温保存后,还通过相对电导率测定、主要抗氧化酶活性测定等常规植物生理学实验,以及蛋白质组学和转录组学技术对其脱水耐性和低温耐性的生理机制进行了探讨,主要结果如下:（1）珙桐离体胚轴能耐受一定程度的脱水,并且适当脱水后的离体胚轴能够耐受液氮低温实现超低温保存。脱水至10.7±0.2%含水量时的存活率为55%,投入液氮保存后的存活率可达35%。（2）3 h的硅胶快速脱水及其随后的超低温保存对脂质过氧化无显著性影响。（3）3 h的硅胶快速脱水不会导致珙桐离体胚轴电解质发生显著渗漏,但随后的超低温保存则会大大增加电解质渗漏。（4）珙桐离体胚轴中的抗氧化酶系统对3 h的硅胶快速脱水及其随后的超低温保存具有不同的响应机制...
【文章来源】：湖北民族大学湖北省
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
活性氧清除的酶和非酶机制(修改自Coweyetal.,1985;Gillespie,2010)
2 材料与方法2.8 差异表达蛋白分析差异表达蛋白鉴定及分析是交由具有专业鉴定及分析能力的华大基因进行分析体实验方法及步骤如下。2.8.1 转录组学分析考虑到珙桐目前没有可用的全基因组测序信息，为了增加蛋白质组学分析时蛋定率，特设置了转录组学分析实验。转录组组装步骤如下（图 2-1）：
体胚轴在脱水过程中含水量的变化。ges of moisture content in excised embryonic axes from Davidia invration. 可知，新采收的成熟珙桐离体胚轴通过组培的成苗率高达 81%培成苗率下降，脱水 3 h 后的组培成苗率为 55%，脱水 4 h 后水 3 h 后超低温保存的组培成苗率为 35%，且皆为正常幼苗 (图
【参考文献】：
期刊论文
[1]四川小凉山珙桐更新及种群稳定性研究[J]. 雷妮娅,陈勇,李俊清,唐晓军. 北京林业大学学报. 2007(01)
[2]珍稀濒危植物珙桐不同采收期的种子特性研究[J]. 王伟伟,苏智先,胡进耀,雷泞菲,朱利君,张亚爽. 广西植物. 2006(02)
[3]珙桐外中果皮对贮藏种子生活力的影响[J]. 范川,李贤伟,鲜俊仁,陈小红. 四川农业大学学报. 2005(04)
[4]菠菜种子超干贮藏后抗老化作用的生理特性[J]. 李玉红,陈鹏,王绮,关志华,程智慧. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2005(08)
[5]湖北七姊妹山珙桐种群结构研究[J]. 马宇飞,李俊清. 北京林业大学学报. 2005(03)
[6]天然珙桐群体的RAPD标记遗传多样性研究[J]. 宋丛文,包满珠. 林业科学. 2004(04)
[7]珙桐（Davidia involucrata Baill）木材导管壁的细微结构特征[J]. 戴大临,文艺. 电子显微学报. 2003(06)
[8]珙桐叶中的黄酮甙成分[J]. 欧阳明安,周剑宁. 广西植物. 2003(06)
[9]宣恩七姊妹山珙桐群落种间联结分析[J]. 胡理乐,李新,江明喜,黄汉东,满金山,苏长江. 武汉植物学研究. 2003(03)
[10]光叶珙桐的等位酶分析及其生物地理学意义[J]. 彭玉兰,胡运乾,孙航. 云南植物研究. 2003(01)
博士论文
[1]敖汉苜蓿小花与种子响应硼胁迫的蛋白质组学与代谢组学分析[D]. 陈玲玲.中国农业大学 2017
硕士论文
[1]桃叶卫矛超低温保存及其效果分析[D]. 李万义.东北林业大学 2017
[2]珙桐种子在萌发过程中的蛋白质组学分析[D]. 雷蕾.湖北民族学院 2016
[3]沙芥种子脱水耐性的研究[D]. 孔德娟.内蒙古农业大学 2014
[4]三个针叶树种种子玻璃与超低温保存研究[D]. 杨学军.南京林业大学 2008
本文编号：3619725
【文章来源】：湖北民族大学湖北省
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
活性氧清除的酶和非酶机制(修改自Coweyetal.,1985;Gillespie,2010)
2 材料与方法2.8 差异表达蛋白分析差异表达蛋白鉴定及分析是交由具有专业鉴定及分析能力的华大基因进行分析体实验方法及步骤如下。2.8.1 转录组学分析考虑到珙桐目前没有可用的全基因组测序信息，为了增加蛋白质组学分析时蛋定率，特设置了转录组学分析实验。转录组组装步骤如下（图 2-1）：
体胚轴在脱水过程中含水量的变化。ges of moisture content in excised embryonic axes from Davidia invration. 可知，新采收的成熟珙桐离体胚轴通过组培的成苗率高达 81%培成苗率下降，脱水 3 h 后的组培成苗率为 55%，脱水 4 h 后水 3 h 后超低温保存的组培成苗率为 35%，且皆为正常幼苗 (图
【参考文献】：
期刊论文
[1]四川小凉山珙桐更新及种群稳定性研究[J]. 雷妮娅,陈勇,李俊清,唐晓军. 北京林业大学学报. 2007(01)
[2]珍稀濒危植物珙桐不同采收期的种子特性研究[J]. 王伟伟,苏智先,胡进耀,雷泞菲,朱利君,张亚爽. 广西植物. 2006(02)
[3]珙桐外中果皮对贮藏种子生活力的影响[J]. 范川,李贤伟,鲜俊仁,陈小红. 四川农业大学学报. 2005(04)
[4]菠菜种子超干贮藏后抗老化作用的生理特性[J]. 李玉红,陈鹏,王绮,关志华,程智慧. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2005(08)
[5]湖北七姊妹山珙桐种群结构研究[J]. 马宇飞,李俊清. 北京林业大学学报. 2005(03)
[6]天然珙桐群体的RAPD标记遗传多样性研究[J]. 宋丛文,包满珠. 林业科学. 2004(04)
[7]珙桐（Davidia involucrata Baill）木材导管壁的细微结构特征[J]. 戴大临,文艺. 电子显微学报. 2003(06)
[8]珙桐叶中的黄酮甙成分[J]. 欧阳明安,周剑宁. 广西植物. 2003(06)
[9]宣恩七姊妹山珙桐群落种间联结分析[J]. 胡理乐,李新,江明喜,黄汉东,满金山,苏长江. 武汉植物学研究. 2003(03)
[10]光叶珙桐的等位酶分析及其生物地理学意义[J]. 彭玉兰,胡运乾,孙航. 云南植物研究. 2003(01)
博士论文
[1]敖汉苜蓿小花与种子响应硼胁迫的蛋白质组学与代谢组学分析[D]. 陈玲玲.中国农业大学 2017
硕士论文
[1]桃叶卫矛超低温保存及其效果分析[D]. 李万义.东北林业大学 2017
[2]珙桐种子在萌发过程中的蛋白质组学分析[D]. 雷蕾.湖北民族学院 2016
[3]沙芥种子脱水耐性的研究[D]. 孔德娟.内蒙古农业大学 2014
[4]三个针叶树种种子玻璃与超低温保存研究[D]. 杨学军.南京林业大学 2008
本文编号：3619725
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