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银杏叶肉细胞壁成分及原生质体分离技术研究

发布时间:2022-04-17 17:07
  银杏(Ginkgo biloba L.)起源于中国,是现存裸子植物中最古老的孑遗物种,因其在医学、食品、装饰、观赏等方面的特殊价值,被广泛引种到全球多个国家和地区。植物原生质体作为快速分析和检测细胞结构、成分和功能的理想材料,为树木健康和衰老进程的研究及诊断提供了新方法,具有极大的应用空间。但由于乔木叶肉细胞特殊的细胞壁结构和组成,导致其原生质体分离困难,且目前尚未有关于银杏叶肉细胞原生质体相关方面的报道。因此,开展银杏叶肉细胞原生质体分离研究具有重要的理论意义和应用价值。本研究在对银杏叶肉细胞壁化学组成成分含量研究的基础上,采用酶解的方法分离银杏叶肉细胞原生质体,并通过单一控制变量法,分别研究不同的酶解液浓度和酶解时间、渗透压大小、酶解液p H值、过滤网孔径大小和离心转速对原生质体分离效果的影响,建立了银杏幼嫩叶片原生质体分离技术体系;在人工模拟干旱诱导衰老的条件下,研究了衰老对银杏叶肉原生质体分离效果及细胞壁化学组成成分含量的影响。主要研究结果如下:1. 树龄为1年、5年、10年、15年、20年的银杏其不同叶龄叶片中叶肉细胞壁成分含量的测定结果表明:在展叶期,树龄为1年的银杏其叶肉... 

【文章页数】:61 页

【学位级别】:硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 植物原生质体研究概述
        1.1.1 原生质体分离的起始材料
        1.1.2 酶的种类及用量
        1.1.3 酶水解时间
        1.1.4 酶液的渗透势
        1.1.5 酶液的酸碱度
    1.2 植物细胞壁结构
        1.2.1 纤维素
        1.2.2 半纤维素
        1.2.3 木质素
        1.2.4 细胞壁化学组成成分的测定方法
    1.3 研究目的和意义
第二章 银杏叶肉细胞壁化学组成成分含量变化
    2.1 引言
    2.2 供试材料
    2.3 仪器及试剂
        2.3.1 主要仪器
        2.3.2 主要试剂
        2.3.3 溶液配置
    2.4 试验方法
        2.4.1 叶肉细胞壁酸水解
        2.4.2 叶肉纤维素和木聚糖含量的测定
        2.4.3 叶肉酸不溶木质素含量的测定
        2.4.4 叶肉酸溶木质素含量的测定
        2.4.5 各组分相对含量的计算
        2.4.6 单糖的线性回归结果
        2.4.7 数据统计分析
    2.5 结果与讨论
        2.5.1 不同树龄银杏叶片在不同采样日期抽提物含量的变化
        2.5.2 不同树龄银杏展叶期叶肉细胞壁化学组成成分含量变化
        2.5.3 不同树龄银杏叶肉细胞壁化学组成成分含量的变化
    2.6 小结
第三章 银杏叶肉原生质体分离技术研究
    3.1 引言
    3.2 供试材料
    3.3 仪器及试剂
        3.3.1 主要仪器
        3.3.2 主要试剂
    3.4 试验方法
        3.4.1 原生质体分离方法
        3.4.2 原生质体活力测定
        3.4.3 数据统计分析
    3.5 结果与讨论
        3.5.1 不同酶液组合及酶解时间对树龄为1年的银杏叶肉原生质体分离的影响
        3.5.2 不同渗透压对树龄为1年的银杏叶肉原生质体分离的影响
        3.5.3 不同酶解液pH对树龄为1年的银杏叶肉原生质体分离的影响
        3.5.4 过滤网孔径大小和离心转速对树龄为1年的银杏叶肉原生质体纯化的影响
        3.5.5 银杏叶肉细胞原生质体分离和纯化技术重现性验证
        3.5.6 不同树龄银杏展叶期叶肉细胞原生质体分离效果差异
    3.6 小结
第四章 干旱胁迫诱导衰老对银杏幼叶原生质体分离和细胞壁成分含量的影响
    4.1 引言
    4.2 供试材料
    4.3 仪器及试剂
        4.3.1 主要仪器
        4.3.2 主要试剂
    4.4 试验方法
        4.4.1 叶肉细胞壁化学成分分析试验方法
        4.4.2 原生质体分离方法
        4.4.3 数据统计分析
    4.5 结果与讨论
        4.5.1 对银杏叶片表型的影响
        4.5.2 对酶解银杏叶片原生质体的影响
        4.5.3 对银杏叶片抽提物含量的影响
        4.5.4 对银杏叶肉细胞壁化学组成成分的影响
    4.6 小结
第五章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
参考文献
附录
致谢
个人简历


【参考文献】:
期刊论文
[1]桑枝纤维素提取及应用前景[J]. 吕金凤,宋昱庆,王介平,周婵.  畜禽业. 2019(12)
[2]不同产地黄花菜营养价值的比较[J]. 高志慧.  黑龙江农业科学. 2019(12)
[3]蓝桉树皮化学成分及其液化工艺分析[J]. 刘勇军,史洪洲,汪扬媚,文静.  四川林业科技. 2019(05)
[4]芝麻秸秆主要化学组成的研究[J]. 高树广,张春花,孙玉霞,李伟峰,王瑞霞,杨光宇,秦速滑,刘红彦.  陕西农业科学. 2019(07)
[5]杜仲叶多糖、杜仲精粉、杜仲胶的提取分离及其性能分析[J]. 全熙宇,彭湃,文沛瑶,魏锦锦,张军华.  林产化学与工业. 2019(02)
[6]花椒原生质体分离与培养研究[J]. 李南,杨秀平,周正君,邓鹏.  西北林学院学报. 2018(06)
[7]大豆愈伤原生质体的制备和培养方式探究[J]. 苏彤,姚陆铭,张鑫,王彪,武天龙.  大豆科学. 2018(05)
[8]扁桃内果皮木质化过程中相关酶活性的变化[J]. 朱秋萍,郭春苗,木巴热克·阿尤普,龚鹏,苏热娅,杨波,廖康.  果树学报. 2018(09)
[9]桑黄原生质体的制备与再生研究[J]. 白静莹,王立山,张媛,范桂枝.  食用菌. 2018(04)
[10]玉米叶片原生质体的制备及瞬时转化体系的建立[J]. 雷海英,白凤麟,冯宇,郭亚冲,乔楠茜.  长治学院学报. 2018(02)

博士论文
[1]赤霉素对细胞壁组分以及拟南芥主根伸长的影响[D]. 李桂俊.南京农业大学 2015
[2]甘蓝型油菜品种细胞壁特性与硼效率关系研究[D]. 杨玉华.华中农业大学 2000

硕士论文
[1]国槐叶肉细胞原生质体分离研究[D]. 张天.西北农林科技大学 2019
[2]镉胁迫影响芒草细胞壁结构、生物质酶解和乙醇产率的研究[D]. 程绍哲.华中农业大学 2017
[3]甘蔗原生质体的分离与培养体系的建立和优化[D]. 史晓朋.广西大学 2017
[4]低纤维素植物原料化学成分定量分析方法研究[D]. 陈霜.东华大学 2017
[5]柑橘体细胞融合创制三倍体无核新种质及融合再生植株的遗传鉴定[D]. 张亚莎.华中农业大学 2016
[6]小麦细胞壁结构特性与生物质降解产糖机理的研究[D]. 伍峙亮.华中农业大学 2014
[7]杨梅颗粒劣变机制及保鲜研究[D]. 杨琴.浙江师范大学 2014
[8]桑树原生质体分离及融合的研究[D]. 羿德磊.山东农业大学 2012
[9]人工林赤桉木材抽提物特性与胶合微扰机理研究[D]. 戚红晨.中南林业科技大学 2011



本文编号:3645980

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