口虾蛄染色体核型及细胞核DNA含量研究

发布时间：2020-06-25 01:39

【摘要】：为讨论野生口虾蛄细胞遗传学相关内容,本研究以自然野生口虾蛄为研究对象,利用口虾蛄血液、肌肉、肝胰腺、卵巢及精巢5个组织为材料,对口虾蛄的染色体数目及核型进行了分析,利用流式细胞术对口虾蛄不同组织的细胞核DNA含量及其细胞周期进行了系统研究。1.口虾蛄的染色体数目及核型进行了分析为了解口虾蛄Oratosquilla oratoria染色体核型组成,以期丰富这一物种细胞遗传学研究内涵,以野生口虾蛄为材料,采用秋水仙素内注射法,取精巢、卵巢及肝胰腺组织经低渗和固定后,获得染色体标本,对其染色体核型进行了分析。结果表明,口虾蛄二倍体染色体数目为88,即2n=88,核型组成公式2n=62m+12sm+14t,染色体总臂数(NF)为162。最大染色体相对长度为3.999,最小染色体的相对长度为1.623,未发现与性别相关的异型染色体。2.口虾蛄不同组织DNA含量测定以鸡血细胞DNA含量为对照标准,采用流式细胞仪测定了口虾蛄不同组织的细胞核DNA含量,精巢组织的DNA含量直方图有两个明显的峰,一个是单倍体的n峰,另外一个是二倍体细胞的2n峰,这可能由于精巢中存在大量精子和精细胞及少量次级精母细胞和精原细胞。结果显示:口虾蛄不同组织细胞核DNA含量存在显著差异(P0.05),几种组织DNA含量从大到小依次为肌肉精巢卵巢肝胰腺血液,肌肉组织细胞核DNA含量最高,达到10.43 pg/2c,血液含量最低,仅为8.70 pg/2c,各组织平均为9.61 pg/2c。此外,以1pg=978 Mbp计算,首次成功估算了口虾蛄基因组大小约为9400.19 Mbp。本研究结果为口虾蛄种质资源保护及未来人工养殖研究奠定了重要基础。3.口虾蛄不同组织细胞周期采用流式细胞仪对口虾蛄的血液、肌肉、肝胰腺、卵巢、精巢这5种不同组织的细胞周期进行了检测。检测结果表明,口虾蛄血细胞与肌肉组织细胞、肝胰腺组织细胞以及卵巢组织细胞这三个组织细胞一样表现出了一定的细胞周期现象,但是精巢组织细胞的有丝分裂细胞周期表现并不明显,而减数分裂细胞周期表现非常明显。本研究仅针对口虾蛄细胞有丝分裂的细胞周期进行分析。肝胰腺组织细胞和卵巢组织细胞的G0/G1期时相的比例较低,细胞增殖指数比较高,分别为17.69%和12.14%,肌肉组织细胞增殖指数最低仅为5.88%,而血细胞增殖指数为7.29%。本研究采用Giemsa染色法对口虾蛄精巢、卵巢和肝胰腺组织进行了核型分析并采用流式细胞术对口虾蛄血液、肌肉、肝胰腺、卵巢、精巢5种不同组织进行DNA含量测定,同时评估其基因组大小,以期为丰富口虾蛄细胞遗传学研究内涵提供理论依据。
【学位授予单位】：大连海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S917.4
【图文】：

秋水仙素,核型分析,着丝粒,染色体

第二章口虾蛄染色体制备方法及核型分析9图2-1 秋水仙素注射位置图Fig.2-1 The position of O. oratoriainjectedcolchicine2.1.6 核型分析选取图像清晰、染色体分散较好的中期分裂相计数，用以确定染色体数目，根据 Levan[55]的标准进行染色体配对及核型分析，染色体相对长度根据公式:相对长度=(实测长度/全部染色体长度总和)×100 计算获得。其中，中部着丝粒染色体（metacentrics，M），臂比 1.0-1.7；亚中部着丝粒（submetacentrics，SM），臂比 1.7-3.0；亚端部着丝粒染色体（subtelocentrics

口虾蛄,中期分裂,核型分析

第二章口虾蛄染色体制备方法及核型分析11图2-3 口虾蛄染色体的中期分裂相Fig.2-3Metaphase chromosomes ofO. oratoria

【参考文献】