低磷饲料中添加α-酮戊二酸（AKG）对松浦镜鲤幼鱼生长、磷代谢及骨骼发育的影响

发布时间：2020-10-01 19:42

　　试验研究低磷饲料中添加α-酮戊二酸(α-ketoglutarate,AKG)对松浦镜鲤(Cyprinus carp)幼鱼生长、磷代谢和骨骼发育的影响。试验用鱼购自黑龙江水产研究所呼兰试验站,养殖于黑龙江水产研究所养殖车间的可控温水循环系统中。试验开始前驯养两周。驯养结束后选取平均体重为(6.67±0.08)g的松浦镜鲤630尾,随机分成7组,每组3个重复,每个重复30尾鱼。分别投喂有效磷0.65%的正常磷饲料和有效磷0.51%的低磷饲料,低磷饲料中分别添加0、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%(干物质含量)的AKG,配制成等氮等能饲料。试验期间,水温控制在22±1℃,溶氧大于5mg/L,保持自然光照。每天人工饱食投喂4次,分别在每天的8:00、11:00、14:00和17:00时,并记录投喂量,定期检测水质,换水、消毒,确保水质良好。试验养殖周期为8周。试验结果如下:(1)与正常磷组相比,低磷组增重率(WGR)、特定生长率(SGR)显著降低(P0.05),饲料系数(FCR)显著提高(P0.05);蛋白质效率(PER)、肝体指数(HI)、脏体指数(VSI)及肥满度(CF)无显著影响(P0.05)。与低磷组相比,添加0.6%AKG,WGR、SGR、PER、VSI、HI及CF均显著提高(P0.05),FCR显著降低(P0.05)。(2)与正常磷组相比,低磷组鱼体粗脂肪(EE)含量显著增加(P0.05),鱼体Ca、P含量显著降低(P0.05);与低磷组相比,添加AKG对水分、CP、EE、ASH、Ca、P均无显著影响(P0.05),添加0.6%AKG组蛋白沉积率(PRV)、脂肪沉积率(LRV)和灰分沉积率(ARV)显著提高(P0.05)。(3)与正常磷组相比,低磷组前肠绒毛宽度、肌层厚度及中肠绒毛宽度显著降低(P0.05),添加0.6%AKG前肠绒毛高度、绒毛宽度及基层厚度均显著增加(P0.05)。与正常磷组相比,低磷组对幼鲤肠长指数、肠体指数无显著影响(P0.05),添加0.2%、0.4%、0.6%AKG试验组幼鲤肠长指数显著增加(P0.05),肠体指数无显著影响(P0.05)。低磷对幼鲤肠道消化酶活性无显著影响(P0.05),添加0.6%AKG幼鲤前肠蛋白酶和中肠蛋白酶、前肠脂肪酶活性显著提高(P0.05),对淀粉酶活性无显著影响(P0.05)。与正常磷组相比,低磷组Na~+,K~+-ATPase活性无显著变化(P0.05),添加1%AKG组幼鲤前肠、后肠Na~+,K~+-ATPase活性显著高于低磷组(P0.05)。(4)低磷添加α-酮戊二酸对幼鲤血清Ca、P含量均无显著影响(P0.05),血清碱性磷酸酶活性显著降低(P0.05)。半定量检测法测定骨源性碱性磷酸酶(Bone Alkaline Phosphatase,BALP)均低于半定量值,表明机体钙盐分泌充足。与低磷组相比,添加不同水平AKG碱性磷酸酶活性显著升高(P0.05)。低磷肝脏生长激素含量显著降低(P0.05),血清生长激素含量无显著影响(P0.05),添加0.4%和0.6%α-酮戊二酸幼鲤血清及肝脏生长激素含量均显著提高(P0.05)。(5)低磷降低总磷表观消化率,添加不同浓度α-酮戊二酸饲料总磷表观消化率显著提高(P0.05)。与正常磷组相比,低磷组肠道及肾脏NaPi-Ⅱb mRNA表达量无显著影响(P0.05),低磷饲料中添加α-酮戊二酸显著降低镜鲤前肠及后肠NaPi-Ⅱb mRNA表达量(P0.05),对中肠、肾脏及脊骨NaPi-Ⅱb mRNA表达量无显著影响(P0.05)。(6)与正常磷组相比,低磷组脊椎骨钙磷含量及钙磷沉积率显著降低(P0.05)。与低磷组相比,添加AKG对骨钙含量无显著影响(P0.05);添加0.6%AKG骨鳞含量和钙磷沉积率均显著提高(P0.05)。低磷对幼鲤骨胶原蛋白含量无显著影响(P0.05),添加α-酮戊二酸幼鲤骨胶原蛋白含量随AKG添加量的增加而显著提高(P0.05)。(7)与正常磷组相比,低磷组对氨基酸含量无显著影响(P0.05),添加0.4%AKG组精氨酸含量及必需氨基酸含量显著升高(P0.05);添加0.4%和0.6%AKG组全鱼总氨基酸含量显著升高(P0.05)。低磷添加α-酮戊二酸对幼鲤肝脏GH基因表达无显著影响(P0.05),IGF-I基因表达显著提高(P0.05)。综合以上结果:低磷饲料中添加0.6%AKG可以促进幼鲤生长,降低饲料系数,提高营养物质沉积;增强肠道消化酶活性,促进肠道发育;降低肠道NaPi-Ⅱb mRNA表达量;提高总磷表观消化率,脊骨磷含量,骨骼矿物质沉积以及骨胶原蛋白含量,调节血清、肝脏生长激素的释放,提高肝脏精氨酸含量,促进骨骼发育。
【学位单位】：上海海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S965.116
【部分图文】：

谷氨酰胺代谢,途径

沉默调节蛋白 4（Sirtuin 4，SIRT4），以及正调节因素，即亮氨酸和腺苷二磷酸ADP）[51-53]。这种复杂的调节允许 GDH 活性被可用性氨基酸和能量状态的变化行调节。因此，这是通过线粒体的能量势（GTP 为 ADP 的比）、柠檬酸中间体氨基酸的供应的调节，谷氨酸参与三羧酸（TCA）循环产生能量。在高能量的件下，氨基酸氧化被抑制而且 GDH 降低。与此相反，低能量的条件下，通过氨酸氧化激活 GDH 维持能源产生。此外，在饲喂富含蛋白质后，亮氨酸含量提高以激活 GDH，从而处理剩余氨基酸，无需合成蛋白质[54]。亮氨酸直接结合 GDH激活，以诱导谷氨酸脱氨产生 AKG。这亮氨酸依赖性活化的 GDH 在胰腺 β 细中至关重要，其中产生的 AKG 足以提高胰岛素分泌[55-56]。此外，mTORC1 通过H 促进谷氨酰胺进入三羧酸循环（ Tricarboxylic acid ，TCA）（图 1-1）。此节要求 SIRT4 及线粒体沉默调节蛋白通过 ADP-核糖基化抑制 GDH 的转录。ORC1 通过促进 cAMP 反应元件结合 2（cAMP-responsive element binding 2，EB2）不稳定蛋白酶体调节抑制 SIRT4[57]。

幼鲤,增重率,低磷,海洋大学

上海海洋大学硕士学位论文同列肩标不同英文字母表示各组间有显著差异(P<0.05)。下表同。In the same column, different superscript letters indicate significant differences between groups(P<0.05). The same as below.

幼鲤,特定生长率,低磷

22图 3-2 低磷饲料中 AKG 水平与幼鲤特定生长率之间的关系Fig. 3-2 Relationship between the specific growth rate and dietary AKG levels of juvenilemirror carp

【参考文献】