虾虎鱼和黄颡鱼CPT Ⅰ的克
发布时间：2023-10-17 19:52
肉碱棕榈酰转移酶I (CPT I)是线粒体脂肪酸β-氧化的一种“限速酶”,它在脊椎动物中控制长链脂肪酸的β氧化,在降解脂肪过程中发挥着重要作用。近年来,哺乳动物中对于CPT I基因的结构和功能的研究取得了一定程度的进展。但是却很少有对鱼类CPT I基因研究和酶学性质的相关报道,也没有任何研究涉及外源营养素对鱼类CPT I基因表达和动力学性质的影响。锌是鱼类一种必需的微量元素,它的存在维系着鱼类生理发育的不同功能。迄今大量的学者研究了锌对鱼类生长、金属富集、氧化应激和组织病变等方面的影响,但是很少有学者关注锌对鱼类脂代谢的影响。本论文克隆了矛尾复虾虎鱼(Javelin goby, Synechogobius hasta)和黄颡鱼(yellow catfish, Pelteobagrus fulvidraco) CPT I的全长cDNA序列,并对其结构、进化、表达和动力学性质进行了研究。同时从CPT I的基因表达和动力学的角度探讨了水体和饲料锌水平对CPT I的影响机制。 论文的主要研究结果和结论如下： 1矛尾复虾虎鱼CPT I的克隆与动力学性质的研究 在脊椎动物中,CPT I的调节在控制...
【文章页数】：126 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
目录
摘要
Abstract
縮略词表
第一章 文献综述
1 CPT I的研究进展
1.1 CPT I基因的分子特征
1.1.1 多重的CPT I构型
1.1.2 多重CPT I构型产生的原因
1.2 CPT I基因的蛋白特征
1.2.1 CPT I蛋白的膜拓扑结构
1.2.2 CPT I的功能域和功能氨基酸
1.3 CPT I的酶促反应动力学
1.3.1 动力学参数的求取
1.3.2 酶动力学的影响因素
1.3.3 CPT I的酶动力学性质
1.4 CPT I的调节
1.4.1 依赖M-CoA的调节
1.4.2 不依赖M-CoA的调节
1.4.3 脂肪对CPT I的调节
2 锌对脂代谢调节的研究进展
2.1 饲料锌对脂代谢的调节
2.2 水体锌暴露对鱼类脂代谢的影响
3 本研究的目的和意义
第二章 虾虎鱼CPT I cDNA的分子克隆及动力学性质分析
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 实验鱼
2.1.2 实验试剂
2.2 CPT I全长cDNA的克隆
2.2.1 引物设计和扩增策略
2.2.2 总RNA的提取、cDNA的合成和PCR
2.2.3 序列分析
2.3 CPTI的动力学性质
2.3.1 CoASH的标准曲线
2.3.2 线粒体的分离及其完整性评价
2.3.3 反应条件对CPTI酶活的影响
2.3.4 动力学参数的求取
2.4 数据统计分析
3 结果与分析
3.1 CPTI的序列和结构
3.2 CPTI的进化和一致性分析
3.3 CPTI的动力学性质
4 讨论
第三章 黄颡鱼CPT I cDNA的分子克隆及表达
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.2 CPTI全长cDNA的克隆
2.2.1 引物设计和扩增策略
2.2.2 总RNA的提取、cDNA的合成和PCR
2.2.3 全长cDNA的扩增
2.2.4 序列分析
2.3 组织和发育表达
2.4 数据统计分析
3 结果与分析
3.1 CPTI的序列和结构
3.2 CPTI的进化分析
3.3 CPTI的组织和发育表达
4 讨论
第四章 黄颡鱼CPTI的动力学性质研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 实验动物
2.1.2 实验试剂及配制
2.2 CoASH的标准曲线的制作
2.3 线粒体的分离及其完整性评价
2.4 反应条件对CPTI酶活性的影响
2.5 动力学参数的求取
2.6 数据统计分析
3 结果与分析
4 讨论
第五章 水体慢性和急性锌暴露对黄颡鱼脂肪沉积、肉碱组成、CPT I的表达及其动力学性质的影响
1 前言
2 材料与方法
2.1 慢性锌暴露
2.2 急性锌暴露
2.3 取样
2.4 脂肪和锌含量的测定
2.5 组织肉碱含量的测定
2.6 组织CPT I酶活的测定
2.7 组织CPT I动力学性质的测定
2.8 组织CPT I mRNA的表达水平
2.9 数据统计分析
3 结果与分析
3.1 水体锌暴露对生长、脂肪含量和锌的富集的影响
3.2 水体锌暴露对CPT I动力学性质的影响
3.3 水体锌暴露对肉碱组成的影响
3.4 锌暴露对CPT I表达的影响
3.5 相关性分析
4 讨论
第六章 饲料锌缺乏和过量对黄颡鱼脂肪沉积、肉碱组成、CPT I的表达及其动力学性质的影响
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验饲料
2.2 实验设计
2.3 取样
2.4 脂肪和锌含量的测定
2.5 组织肉碱含量的测定
2.6 组织CPT I的酶活测定
2.7 组织CPT I动力学性质的测定
2.8 组织CPT I mRNA的表达水平
2.9 数据统计分析
3 结果与分析
3.1 饲料锌对生长、脂肪含量和锌的富集的影响
3.2 饲料锌对CPT I动力学性质的影响
3.3 饲料锌对肉碱组成的影响
3.4 饲料锌对CPT I表达的影响
3.5 相关性分析
4 讨论
全文总结
参考文献
附录
致谢
本文编号：3854906
【文章页数】：126 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
目录
摘要
Abstract
縮略词表
第一章 文献综述
1 CPT I的研究进展
1.1 CPT I基因的分子特征
1.1.1 多重的CPT I构型
1.1.2 多重CPT I构型产生的原因
1.2 CPT I基因的蛋白特征
1.2.1 CPT I蛋白的膜拓扑结构
1.2.2 CPT I的功能域和功能氨基酸
1.3 CPT I的酶促反应动力学
1.3.1 动力学参数的求取
1.3.2 酶动力学的影响因素
1.3.3 CPT I的酶动力学性质
1.4 CPT I的调节
1.4.1 依赖M-CoA的调节
1.4.2 不依赖M-CoA的调节
1.4.3 脂肪对CPT I的调节
2 锌对脂代谢调节的研究进展
2.1 饲料锌对脂代谢的调节
2.2 水体锌暴露对鱼类脂代谢的影响
3 本研究的目的和意义
第二章 虾虎鱼CPT I cDNA的分子克隆及动力学性质分析
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 实验鱼
2.1.2 实验试剂
2.2 CPT I全长cDNA的克隆
2.2.1 引物设计和扩增策略
2.2.2 总RNA的提取、cDNA的合成和PCR
2.2.3 序列分析
2.3 CPTI的动力学性质
2.3.1 CoASH的标准曲线
2.3.2 线粒体的分离及其完整性评价
2.3.3 反应条件对CPTI酶活的影响
2.3.4 动力学参数的求取
2.4 数据统计分析
3 结果与分析
3.1 CPTI的序列和结构
3.2 CPTI的进化和一致性分析
3.3 CPTI的动力学性质
4 讨论
第三章 黄颡鱼CPT I cDNA的分子克隆及表达
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.2 CPTI全长cDNA的克隆
2.2.1 引物设计和扩增策略
2.2.2 总RNA的提取、cDNA的合成和PCR
2.2.3 全长cDNA的扩增
2.2.4 序列分析
2.3 组织和发育表达
2.4 数据统计分析
3 结果与分析
3.1 CPTI的序列和结构
3.2 CPTI的进化分析
3.3 CPTI的组织和发育表达
4 讨论
第四章 黄颡鱼CPTI的动力学性质研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 实验动物
2.1.2 实验试剂及配制
2.2 CoASH的标准曲线的制作
2.3 线粒体的分离及其完整性评价
2.4 反应条件对CPTI酶活性的影响
2.5 动力学参数的求取
2.6 数据统计分析
3 结果与分析
4 讨论
第五章 水体慢性和急性锌暴露对黄颡鱼脂肪沉积、肉碱组成、CPT I的表达及其动力学性质的影响
1 前言
2 材料与方法
2.1 慢性锌暴露
2.2 急性锌暴露
2.3 取样
2.4 脂肪和锌含量的测定
2.5 组织肉碱含量的测定
2.6 组织CPT I酶活的测定
2.7 组织CPT I动力学性质的测定
2.8 组织CPT I mRNA的表达水平
2.9 数据统计分析
3 结果与分析
3.1 水体锌暴露对生长、脂肪含量和锌的富集的影响
3.2 水体锌暴露对CPT I动力学性质的影响
3.3 水体锌暴露对肉碱组成的影响
3.4 锌暴露对CPT I表达的影响
3.5 相关性分析
4 讨论
第六章 饲料锌缺乏和过量对黄颡鱼脂肪沉积、肉碱组成、CPT I的表达及其动力学性质的影响
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验饲料
2.2 实验设计
2.3 取样
2.4 脂肪和锌含量的测定
2.5 组织肉碱含量的测定
2.6 组织CPT I的酶活测定
2.7 组织CPT I动力学性质的测定
2.8 组织CPT I mRNA的表达水平
2.9 数据统计分析
3 结果与分析
3.1 饲料锌对生长、脂肪含量和锌的富集的影响
3.2 饲料锌对CPT I动力学性质的影响
3.3 饲料锌对肉碱组成的影响
3.4 饲料锌对CPT I表达的影响
3.5 相关性分析
4 讨论
全文总结
参考文献
附录
致谢
本文编号：3854906
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