不同处理对鲜食枣采后裂果的影响

发布时间：2020-04-14 01:25

【摘要】：枣是我国特有经济果树及重要木本粮食树种,具有丰富的营养价值和药用价。裂果是鲜枣常见的生理性病害。鲜枣在储藏期间易产生果实开裂,严重影响枣果品质,造成巨大经济损失。本研究以湖南省祁东县新丰果业有限公司紫冲种植基地为试验地,以'中秋酥脆枣'为试验材料,用H2O2、Ca(NO3)2、NaCl和ABA对枣果进行浸泡处理,统计分析裂果方式、裂果率、裂果指数、转红指数、吸水率、果实硬度、丙二醛等指标的相关性;采用考马斯亮蓝法、试剂盒的方法,测定枣果中可溶性蛋白含量及水通道蛋白酶活性,荧光定量PCR测定水通道蛋白基因mRNA的表达量,并分析它们与裂果率之间的关系。通过研究得出以下结论:1.枣裂果方式主要以纵裂和环裂为主,不规则列占有比例较小。黑暗环境下能够显著降低裂果率、裂果指数和转红指数。综合光照和黑暗环境,l%NaCl处理的裂果率和裂果指数最低,是最佳防裂果的处理。光照环境下,仅1%NaCl处理和0.25mg/L ABA处理的转红指数高于对照。黑暗环境下转红指数波动较大,且普遍低于光照环境的转红指数。光照环境下,吸水率最低的是0.01%NaCl处理;而黑暗条件下,吸水率最低的是1%NaCl处理;黑暗环境下吸水率普遍高于光照环境的吸水率。光照条件下,90mg/LCa(NO3)2处理的果实硬度最大,且Ca(NO3)2处理的平均果实硬度最大;黑暗条件下,仅120mg/LCa(NO3)2处理的果实硬度大于对照处理;黑暗条件下果实硬度普遍高于光照环境条件下果实硬度。2.不同裂果方式之间的相关性多为负值,其中纵裂和环裂的相关性达到显著水平。光照条件下,纵裂+环裂与裂果率显著相关,与裂果指数和转红指数相关性达到极显著水平;黑暗环境下,纵裂+环裂仅与裂果指数达到极显著水平。光照条件下,裂果率与裂果指数、吸水率、转红指数呈正相关,且与裂果指数的相关性达到极显著水平,与转红指数的相关性达到显著水平;但与果实硬度呈负相关。黑暗条件下,裂果率与裂果指数达到极显著水平,相关性系数为0.85,呈正相关;裂果率与果实硬度、吸水率、转红指数均呈正相关,但相关性不显著。3.所有处理组丙二醛含量均高于对照组。光照条件下,H2O2处理组的平均丙二醛含量最低,且丙二醛含量与裂果率呈负相关,相关性不显著。在黑暗环境条件下,Ca(NO3)2处理组的平均丙二醛含量低于其他处理组,但0.005%H2O2处理的丙二醛含量最低,且丙二醛含量与裂果率呈正相关,相关性不显著。4.光照条件下果皮和果肉相对电导率具有较好的协调性,但黑暗环境条件下,果肉与果皮的相对电导率随处理溶液浓度的变化而不同。所有处理组的果皮电导率均高于对照组,其中ABA处理组的果皮和果肉相对电导率平均值低于其他处理组,0.4mg/LABA处理的果皮相对电导率最低,但与对照组差异不显著,0.01%H2O2处理的果肉相对电导率最低,与对照组差异显著;黑暗环境下,所有处理组的相对电导率均高于对照组,其中NaCl处理的果皮的相对电导平均值低于其他处理组,0.1%NaCl处理的果皮相对电导率最低,与对照组差异显著,Ca(NO3)2处理的果肉的相对电导率平均值低于其他处理组,0.01%NaCl和0.4mg/LABA处理的果肉相对电导率最低,与对照相比均达到显著水平。5.ABA处理的角质层厚度平均值大于其他处理。光照条件下,裂果率与角质层厚度、皮下层厚度和表皮厚度呈正相关,与表皮层厚度呈负相关,但均达不到显著水平。表皮层厚度与皮下层厚度呈正相关,达到极显著水平,相关系数为0.96。黑暗条件下,裂果率与角质层厚度、皮下层厚度和表皮厚度的均呈正相关,与表皮层厚度呈负相关,但均未达到显著水平。皮下层厚度与表皮厚度相关系数为0.95,达到显著水平。6.ABA处理的可溶性蛋白含量平均值大于其他处理组,其中0.1mg/LABA处理可溶性蛋白含量最高。光照环境下水通道蛋白酶活性普遍低于黑暗环境下水通道蛋白酶活性。在光照条件下,Ca(NO3)2处理的水通道蛋白酶活性普遍弱于其他处理组;在黑暗环境下,H202处理的水通道蛋白酶活性普遍低于其他处理,0.005%H202处理的水通道蛋白酶的活性最低,与对照相比达到显著水平,降低了46.2%。综合光照和黑暗环境,裂果率与水通道蛋白酶活性呈负相关,相关系数为-0.12;与可溶性蛋白呈正相关,相关系数为0.08,但均达不到显著水平。7.光照环境下水通道蛋白基因mRNA相对表达量普遍低于黑暗环境下水通道蛋白基因mRNA相对表达量,光照会抑制水通道蛋白基因mRNA的表达。光照环境下,ABA处理的的水通道蛋白基因mRNA相对表达量普遍低于其他处理。水通道蛋白酶基因mRNA表达量与裂果率成负相关,但相关性不显著。在黑暗环境下,NaCl处理的水通道蛋白基因mRNA相对表达量普遍低于其他处理,水通道蛋白基因mRNA表达量与裂果率成正相关,但相关性不显著。
【图文】：

标准曲线,反应条件,内参,基因

将逆转录后得到的模板ｃＤＮＡ进行稀释，稀释浓度梯度为１、１０、１０２、１０３、逡逑１０４、１０５倍，各取５ｕｌ作为反应模板分别以目的基因ＺｊＰＩＰ２和内参基因ＺｊＨ３作逡逑为引物进行荧光定量ＰＣＲ，反应参数条件见图２－１。反应结束后通过ＣＦＸＭａｎａｇｅｒ逡逑软件建立标准曲线，当目的基因及内参基因扩增效率在８０％至１２０之间，同时逡逑Ｒ２接近１，说明结果可信度较高，符合荧光定量ＰＣＲ要求。可进一步进行待检逡逑样品检测。逡逑（２）荧光定量ＰＣＲ逡逑应用ＣＦＸ９６邋Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ邋ＰＣＲ邋Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ邋Ｓｙｓｔｅｍ操作方法，以获得的枣果果皮逡逑的ｃＤＮＡ作为模板，进行实时荧光定量ＰＣＲ反应。每个样品均作３个复孔以减逡逑少操作误差，每个样品均有内参基因ＺｊＨ３作为对照。目的基因和内参基因分别逡逑以们／１１１、？２／１１２作为引物进行扩增。实时荧光定量？０１反应通过R%0１＾（１逡逑ＣＦＸ９６ＴＭ邋Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ邋Ｓｙｓｔｅｍ邋和邋Ｂｉｏ邋Ｒａｄ邋ＣＦＸ邋Ｍａｎａｇｅｒ邋Ｓｏｆｔｗａｒｅ邋得以运行。ＰＣＲ逡逑反应液按表２－６组份进行配制（反应液配制均在冰上进行），预混液体积至少多逡逑于所有反应用总体积的１０％，以减少吸取误差，荧光信号的收集设置在延伸阶段。逡逑扩增完毕后

裂果率,处理溶液,黑暗环境

图３－１光照环境下不同处理裂果率的统计逡逑Ｆｉｇ．邋３－１邋Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ邋ｏｆ邋ｆｒｕｉｔ邋ｃｒａｃｋｉｎｇ邋ｒａｔｅ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｔｒｅａｔｍｅｎｔ邋ｕｎｄｅｒ邋ｌｉｇｈｔｉｎｇ邋ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ逡逑由图３－２可以看出，在黑暗环境下，不同外源物质处理对裂果率的影响表现逡逑不同。Ｈ２０２处理的裂果率随着处理溶液浓度的增加呈先增加后降低趋势，逡逑Ｃａ（Ｎ0３）２处理的裂果率随着处理溶液浓度的增加呈增加趋势，ＮａＣｌ处理的裂果逡逑率随着处理溶液浓度的增加呈降低趋势，ＡＢＡ处理的裂果率随着处理溶液浓度逡逑的增加呈先降低后增加趋势。与清水浸泡的对照处理相比，各处理的裂果率均氋逡逑于对照处理，其中以Ｈ２处理的裂果率最高为９６％，比对照增加６４．３％；邋Ｃ１和逡逑Ｎ３处理的裂果率最低为６０％，，比对照增加７．１４％。逡逑黑暗环境逡逑１００１逡逑ＨＩ邋Ｈ２邋Ｈ３邋Ｃｌ邋Ｃ２邋Ｃ３邋Ｎ１邋Ｎ２邋Ｎ３邋Ａ１邋Ａ２邋Ａ３邋ＣＫ逡逑不同处理逡逑ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｔｒｅａｔｍｅｎｔ逡逑图３－２黑暗环境下不同处理裂果率的统计逡逑Ｆｉｇ．邋３－２邋Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ邋ｏｆ邋ｆｒｕｉｔ邋ｃｒａｃ
【学位授予单位】：中南林业科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S665.1

【参考文献】