月季组织培养及遗传转化体系的初步研究

发布时间：2020-04-29 14:24

【摘要】：月季(Rose hybrida)原产于中国,是世界四大鲜切花之一。随着月季产业的不断发展,月季消费者的要求也日趋多样化,但月季传统的杂交育种方式由于其技术本身局限性和原始品种遗传背景较为狭窄的限制使得其在对月季品种内在品质的改良已很难取得突破。现代分子育种技术可以有针对性把优良的目的基因快速的转入受体植物,从而达到改良其内在品质的目的。正因为其技术的针对性和高效性,分子育种技术在月季的育种领域将发挥着不可取代的重要作用。本实验以‘蜜桃雪山月季’(Rose.‘Peach Avalanche’)、‘雪山月季’(Rosa.‘Avalanche’)和‘粉佳人月季’(Rosa.‘Nirvana’)的带芽茎段和叶片作为外植体,通过研究多组植物生长调节剂组合处理对月季腋芽萌发和叶片愈伤组织诱导的影响,研究了不同侵染时间与共培养时间对月季愈伤组织遗传转化效率的影响,并对转化完成后的抗性愈伤组织进行了选择扩繁的初步探索。本研究结果如下:1.通过不同激素配比培养基诱发‘蜜桃雪山’、‘雪山’和‘粉佳人’的带芽茎段的腋芽萌发实验得出‘蜜桃雪山’腋芽萌发最适培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L;‘雪山’腋芽萌发最适培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L;‘粉佳人’腋芽萌发最适培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L。2.以‘蜜桃雪山’、‘雪山’和‘粉佳人’的无菌叶片和离体叶片作为外植体进行愈伤组织诱导,在培养基为MS+2,4-D 4.0 mg/L时,其愈伤组织诱导率均最高。其中无菌小叶的愈伤组织诱导率明显高于离体叶片的愈伤组织诱导率,‘蜜桃雪山’、‘雪山’和‘粉佳人’无菌小叶的愈伤组织诱导率最高分别达到94.64%、97.78%和89.58%。3.研究了不同侵染时间和共培养时间对根癌农杆菌介导的月季愈伤组织遗传转化效率的影响。结果显示,‘蜜桃雪山’、‘雪山’和‘粉佳人’的愈伤组织均在侵染时间为25 min时,共培养时间为3 d,GUS瞬时表达效率最高,分别为79.26%、69.33%和65.27%。4.通过降低选择培养基中Hyg和Cef的浓度获取了具有生理活性的抗性愈伤组织。‘蜜桃雪山’和‘雪山’获取的具有HygB抗性的阳性愈伤组织在MS+2,4-D2.0 mg/L+Hyg 10 mg/L+Cef 250 mg/L的培养基中正常生长,且恢复了生理活性。
【图文】：

月季组织培养及遗传转化体系的初步研究

技术路线图

月季组织培养及遗传转化体系的初步研究

图3-1月季腋芽萌发Fig.3-1Roseaxillarybudgermination注：A.部分叶片未展开就发黄枯萎；B,C.正常生长的叶片；D.茎段中部出现少量愈伤组织；
【学位授予单位】：云南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S685.12

【参考文献】