鸡枞菌培养基优化及人工栽培技术研究

发布时间：2020-05-27 02:44

【摘要】：鸡枞菌[Termitomyces albuminosus(Berk.)Heim]健康美味、营养丰富,是一种非常珍贵的食药用真菌。陕西秦岭地区地势高低悬殊较大,气候多样,物种资源丰富,其独特的环境及气候条件适宜多种食用菌的生长。随着市场需求的增加,野生鸡枞菌数量有限,难以满足市场需要,人工栽培势在必行。至今有关秦岭地区野生鸡枞菌分布及利用食用菌废弃料等农作物秸秆进行鸡枞菌人工栽培的研究尚未见报道。本研究以采自秦岭地区一株野生鸡枞菌子实体为供试材料,分离纯化获得营养菌丝,对生物学特性、遗传性状和生长条件进行了研究;利用响应面优化方法研究了液体发酵条件影响,确定液体种生产最佳发酵条件;利用分离菌株进行了人工栽培初步研究。研究结果如下:1.鸡枞菌分离及生长条件研究采用组织分离法对鸡枞菌子实体进行分离纯化,通过平皿培养法和分子生物学方法研究生物学特性和遗传性状,结合形态特征和遗传特征对菌丝体进行分类鉴定,以日生长速率为指针,探究鸡枞菌生长营养条件即碳源、氮源和无机盐,环境生长条件即温度、湿度、CO_2及酸碱度。研究结果是形态特征及ITS序列分析鉴定菌丝体为鸡枞菌,该菌营养菌丝生长最适碳源是玉米粉,最适氮源是硝酸铵,无机盐是KH_2PO_4和MgSO_4·7H_2O,浓度在0.10%~0.20%,最适浓度是0.15%;浓度在0.025%~0.075%,最适浓度是0.05%;菌丝生长温度范围26~28℃,最适温度26℃;菌丝生长pH5~6,最适pH5;光照对菌丝生长有影响,以暗培养为宜;适宜的二氧化碳浓度有利于菌丝生长;菌丝生长湿度范围是60%~70%,最适湿度65%。2.鸡枞菌液体发酵条件研究采用单因素试验和Box-Behnken响应面设计对鸡枞菌菌丝液体培养条件进行优化研究。研究结果是鸡枞菌菌丝培养生长最佳碳源是葡萄糖、最佳氮源是酵母?出膏、最佳生长因子是维生素B_1;鸡枞菌菌丝液体培养最佳营养条件是葡萄糖2.15%、酵母?出膏0.22%、马铃薯20%、KH_2PO_40.27%、MgSO_4·7H_2O0.05%、维生素B_10.015%,鸡枞菌菌丝液体培养环境条件是pH6、装液量300mL(500 mL三角瓶)、温度26℃、转速140 r·min~(-1)。3.鸡枞菌人工栽培研究以食用菌废弃料为主料,附加其它原料的培养基配方,进行鸡枞菌大田仿野生栽培技术研究。研究结果是通过ICP-OES试验,得到废弃菌料中元素Ca含量为10.4 g·kg~(-1),K含量为5.9 g·kg~(-1),P含量为4.8 g·kg~(-1),Mg含量为2.7 g·kg~(-1),Na含量为6.9 g·kg~(-1),其它元素含量均低于2.7 g·kg~(-1)。通过凯氏定氮试验、重铬酸钾加外热试验和碱解扩散试验,得到废弃菌料中铵态氮含量为1.58 g·kg~(-1)、碳含量为231.4g·kg~(-1)、硝态氮含量为0.24 g·kg~(-1)。通过单因素试验,得到鸡枞菌菌丝生长的最佳原种培养基为B(20%马铃薯,2.0%玉米粉,0.1%KH_2PO_4,0.05%MgSO_4·7H_2O,0.02%NaCl,0.02%MnSO_4,0.015%维生素B_6,0.21%蛋白胨,pH自然),得到鸡枞菌菌丝生长的最佳栽培种培养基配方为废弃袋料65%,木屑15%,麸皮10%,石膏1.0%,石灰1.0%,蔗糖2.0%,玉米粉5.0%,豆粕2.0%。通过栽培试验,得到4~6月初为发菌期间,湿度掌握在60%~65%,温度掌握在26~28℃;6月中旬~7月下旬为出菇期间,湿度掌握在60%~80%,温度掌握在25~30℃,昼夜温差控制在10~12℃。
【图文】：

2-1 菌株菌落形态及菌丝形态特ology and mycelial morphologica－PCR 扩增后，利用琼脂糖条带，序列片段长度大小为录号：MF995630）与鸡枞菌树，如图 2-3 所示。结合该菌uminosus）。

析因组 DNA 经 ITS－PCR 扩增后，利用琼脂糖凝胶电泳进行PCR 产物获得单一条带，序列片段长度大小为 500~750 bp。果显示该菌株（登录号：MF995630）与鸡枞菌属（Termitom，建立系统发育树，如图 2-3 所示。结合该菌株形态学特征Termitomyces albuminosus）。图 2-2 ITS－PCR 扩增产物电泳结果Fig.2-2 Ectrophoresis of ITS－PCR amplification products枞菌ITS－PCR扩增产物；M为DNAMarker。
【学位授予单位】：陕西理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S646

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