为了探明君迁子是否具备无融合生殖这一特性,了解其无融合生殖类型。本试验以河南科技学院新东区君迁子苗圃的45棵雌株为试材,通过田间调查、石蜡切片和分子标记技术,筛查了具备无融合生殖的单株,调查了不同授粉条件下君迁子结果和结种情况及果实种子特性,并探索了无融合生殖过程中胚珠、胚囊的发育进程,了解了君迁子子房内部的发育进程与雌花外部形态的关系,此外还对无融合生殖后代在基因水平上的整齐度进行了研究。主要研究结果如下:(1)经过调查发现45株供试君迁子仅有14株具有无融合生殖能力,占群体的31.1%。对于14株具备无融合生殖的单株中,无融合生殖能力高低差异较大,xc-4无融合生殖果实占比和100个套袋果获得种子数分别为50.0%、175粒,其无融合生殖能力高。xc-13、xc-17无融合生殖果实占比分别为13.5%、15.7%,100个套袋果获得种子数分别为69粒、57粒,其无融合生殖能力为中等水平。其余的11个单株的100个套袋果获得种子数均低于50粒,无融合生殖能力均较低。(2)为了了解远缘花粉和失活花粉对君迁子无融合生殖能力的影响,利用不同的花粉刺激柱头。失活君迁子花粉和柿子花粉蒙导的无融合生殖果实占比分别为6.7%、18.9%,100个套袋果获得种子数分别为31粒、70粒,而套袋不授粉的无融合生殖果实占比和100个套袋果获得种子数分别为31.5%、126粒。可见远缘花粉和失活花粉蒙导并不能提高君迁子的无融合生殖能力。(3)无融合生殖的单果重偏低,且与自然授粉差异显著。但无融合生殖的果形指数高于自然授粉。通过统计不同授粉条件的种子特征可知,无融合生殖与自然授粉在单种重指标上差异不显著,但无融合生殖的种形指数偏高。套袋不授粉与自然授粉在果实色泽的三个指标方面差异均不显著。(4)花期套袋不授粉、授柿子花粉、授失活君迁子花粉、授xx-24君迁子花粉、授xx-21君迁子花粉、自然授粉处理后代种子发芽率分别为93.8%、72.4%、100%、84.6%、80.0%、96.0%。虽然种子发芽率均较高,但发芽整齐度相差较大。套袋不授粉处理、授柿子花粉和授xx-21君迁子花粉后代发芽相对较早且整齐,发芽势分别为95.3%、61.3%、75.6%;授xx-24君迁子花粉和自然授粉种子发芽势分别为17.9%、32%。由此可知,无融合生殖种子发芽较早且发芽相对集中,而自然授粉和杂交后代发芽整齐度差。(5)6种处理方式后代群体一年生长量分别为株高17.90-20.69 cm、地径3.03-3.73mm、1/2处茎粗2.35-2.80 mm、冠幅20.00-22.65 cm、叶片数16-19片。套袋处理和失活君迁子花粉处理在株高、冠幅、叶片数三个数量性状中的标准差和变异系数均较低,表明后代群体各个单株间的外观形态较其他处理相似度高,生长一致性高。各处理单株的在地径和1/2处茎粗的标准差和变异系数则没有明显的差别。(6)利用筛选出的7对引物扩增32个群体,其中1个为母本,其余31个样本均来自于该母本通过套袋不授粉处理得到的幼苗。利用SSR分子标记技术共获得78个等位基因位点。并通过扩增谱带发现,扩增片段多分布在100-700 bp。各样本间谱带整齐度都比较高,据统计在DS1、DS3、DS22、DS23、DS31、DS32、DS49引物下各样本间的谱带整齐度分别为94.2%、92.3%、81.6%、82.7%、90.6%、91.3%、91.4%。被测单株间的遗传相似系数在0.7215-0.9695之间,而遗传距离在0.0310-0.3264。可见在DNA水平上,君迁子的无融合生殖具有较高的遗传一致性。(7)君迁子无融合生殖胚囊发育类型为蓼形胚囊。其发育时期分为:孢原细胞、大孢子母细胞、二分体、四分体、单核期、四核期、成熟胚囊。推测君迁子无融合生殖类型可能是孤雌生殖或无配子生殖。
【学位单位】：河南科技学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S665.3
【部分图文】：
图 2-5 不同处理方式下君迁子果皮颜色的比较Fig. 2-5 Comparison of date plum peel color in different treatment method
图 3-1 部分基因组 DNA 琼脂糖凝胶检测结果Fig. 3-1 Electrophoresis analyses of genomic DNAin agarose ge无融合生殖的引物筛选丽[19]发表的特异引物及其 PCR 扩增体系扩增所有的 DNA
图 3-2 DS3 引物对 PCR 产物的扩增图谱Fig. 3-2 Figerprints of SSR products from primer DS3M:marker DL1000，♀ 母本，1-31 分别为株号 4-1 到 4-31♀ mathernal plant, 1-31 are plant number 4-1 to 4-31 respctively
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