兜兰种质评价及肉饼兜兰无菌播种与组培技术研究

发布时间：2020-10-21 23:13

　　 兜兰属植物因其独特的花型和色彩成为花卉市场上流行的高档花卉,绿色和红色的肉饼类兜兰是国际上兜兰的主流商业品种。目前所记录在册的兜兰种类繁多,但对这些兜兰种所建立的评价体系尚不完善。且因兜兰种子无胚乳,自然状态下结实率与萌发率极低,因此有不少关于兜兰无菌萌发的研究,但有关肉饼兜兰的研究甚少。此外,生长调节剂对兜兰原球茎增殖效果的研究虽有很多,但都因所研究的兜兰种不同,研究结果也有很大的差异,而且对于外植体诱导不定芽的研究,在兜兰研究领域还未成熟。因此,本研究以12种野生兜兰种为试材,用层次分析法对其进行评价,其次以肉饼兜兰为试材,筛选出适合其无菌播种的最佳授粉时间、最佳培养基、适合肉饼兜兰原球茎增殖的最佳激素配比以及诱导可以产生不定芽的外植体,所得结果下:⑴12个兜兰种的综合评价结果表明,试材可分为三个等级,第一等级包括‘菲律宾兜兰’、‘虎斑兜兰’、‘带叶兜兰’、‘紫纹兜兰’、‘长瓣兜兰’、‘亨利兜兰’、‘麻栗坡兜兰’共七个种,观赏价值最高。第二个等级包括‘杏黄兜兰’、‘同色兜兰’共二个种,观赏价值一般。第三个等级有‘白花兜兰’和‘硬叶兜兰’二个种,观赏价值较低。因此在实际生产中,可将第一等级的兜兰种作为首选。⑵肉饼兜兰授粉时间对其种子无菌萌发率的影响很大,肉饼兜兰的种子从授粉到成熟一般需要300 d左右,采集150 d~315 d的肉饼兜兰杂交后的种子,在1/4MS+香蕉泥25 g/L+活性炭0.5 g/L+琼脂5.5 g/L+蔗糖10 g/L的培养基上培养,结果发现肉饼兜兰的种子萌发率从150 d起逐渐升高,在150 d时的种子萌发率为7.63%,255d时达到最高,此时,种子萌发率为90.29%,255 d之后,种子萌发率逐渐降低,315d萌发率仅为21.21%。⑶基础培养基的类型对肉饼兜兰种子的萌发率也有很大影响,将授粉后255 d的肉饼兜兰种子分别在MS、1/2MS、1/4MS及1/8MS培养基中进行无菌播种,发现1/4MS培养基中,肉饼兜兰的萌发率最高,为82.67%,1/8MS培养基次之,萌发率为67.78%,高浓度的MS培养基中最差,萌发率仅为7%⑷不同激素浓度及配比对肉饼兜兰原球茎的增殖有很大的影响,选取肉饼兜兰无菌萌发的的绿色原球茎在不同浓度的6-BA和NAA的1/4MS培养基中培养,结果表明肉饼兜兰原球茎在6-BA5.0 mg/L+NAA0.5 mg/L的激素配比下增殖效果最佳,且长势最好,增殖倍数达3.83,而在6-BA3.0 mg/L时,原球茎增殖效果最差,褐化严重。⑸对肉饼兜兰外植体不定芽诱导研究中,本研究将肉饼兜兰的花蕾、茎尖、叶片、根尖及无菌萌发的幼苗作为外植体,接种于1/4MS+6-BA5.0 mg/L+NAA0.5 mg/L的培养基中,结果发现兜兰无菌萌发出的幼苗根部易被诱导萌发芽体,而以兜兰叶片、茎尖、花蕾等为外植体尚未诱导成功,且均出现褐化,并未成功诱导出不定芽。本试验通过对12种野生兜兰进行评价以及对肉饼兜兰无菌播种与组织培养方面进行研究,系统的建立了兜兰的评价体系和肉饼兜兰的无菌萌发与组培快繁体系,为兜兰选育及组培生产提供了理论依据和科学指导。
【学位单位】：烟台大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：S682.31
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
1 引言
    1.1 兜兰属植物的概述
    1.2 兜兰种质评价
        1.2.1 兜兰种质资源
        1.2.2 兜兰盆花质量标准
        1.2.3 层次分析法在兜兰种筛选研究中的应用
    1.3 肉饼兜兰无菌播种技术研究
        1.3.1 种子成熟度对肉饼兜兰无菌萌发效果的影响研究
            1.3.1.1 未成熟种子的消毒
            1.3.1.2 成熟种子的预处理
        1.3.2 培养基类型对肉饼兜兰无菌萌发效果的影响研究
        1.3.3 植物生长调节剂类型对肉饼兜兰无菌萌发效果的影响研究
        1.3.4 有机添加物的种类对肉饼兜兰无菌萌发效果的影响研究
        1.3.5 光照条件对肉饼兜兰无菌萌发效果的影响研究
    1.4 肉饼兜兰组织培养研究进展
        1.4.1 原球茎的诱导增殖
        1.4.2 外植体的诱导增殖
    1.5 本研究的意义与技术路线
        1.5.1 研究意义
        1.5.2 研究技术路线
2 兜兰种质资源调查
3 层次分析法在兜兰综合评价中的应用
    3.1 评价材料
    3.2 评价方法
        3.2.1 层次结构的分析与建立
            3.2.1.1 目标层
            3.2.1.2 约束层
            3.2.1.3 标准层
            3.2.1.4 最低层
        3.2.2 计算方法与过程
            3.2.2.1 判断矩阵的建立及其一致性检验
    3.3 结果与分析
        3.3.1 指标赋分标准
        3.3.2 兜兰种综合评价体系层次总排序
        3.3.3 兜兰种的综合得分及排序
    3.4 小结与讨论
4 肉饼兜兰无菌播种技术研究
    4.1 种子成熟度对无菌萌发的影响
        4.1.1 试验材料
        4.1.2 试验方法
            4.1.2.1 种子采集
            4.1.2.2 种子预处理
            4.1.2.3 种子无菌播种
            4.1.2.4 数据统计与处理
        4.1.3 结果与分析
        4.1.4 小结与讨论
    4.2 培养基类型对肉饼兜兰种子无菌萌发的影响
        4.2.1 试验材料
        4.2.2 试验方法
            4.2.2.1 种子采集
            4.2.2.2 种子预处理
            4.2.2.3 种子无菌播种
            4.2.2.4 数据统计与处理
        4.2.3 结果与分析
        4.2.4 小结与讨论
5 肉饼兜兰组织培养研究
    5.1 激素配比对肉饼兜兰原球茎增殖的影响
        5.1.1 试验材料
        5.1.2 试验方法
            5.1.2.1 6-BA和NAA对原球茎增殖的影响
            5.1.2.2 数据统计与处理
        5.1.3 结果与分析
        5.1.4 小结与讨论
    5.2 不同外植体类型的组织培养
        5.2.1 试验材料
        5.2.2 试验方法
            5.2.2.1 外植体预处理
            5.2.2.2 组织培养
        5.2.3 结果与分析
        5.2.4 小结与讨论
6 结论与讨论
    6.1 结论
    6.2 讨论
7 兜兰属植物的展望
附录一
附录二
附录三
参考文献
个人简介
致谢

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本文编号：2850727