狭叶黄芩再生体系建立及茉莉酸甲酯对其抗旱影响的研究

发布时间：2020-10-23 19:34

　　 东北地区地理环境特殊,冬季漫长而寒冷,夏季温暖湿润却短暂,能够在东北露地越冬的植物种类较少,自然分布在东北地区的狭叶黄芩(Scutellaria regeliana Nakai)为多年生草本,花为紫色,是一种优良的野生观赏植物,可作为地被植物在园林中应用。本文以狭叶黄芩为研究对象,建立不定芽再生体系以及愈伤途径再生体系,并研究外源施加茉莉酸甲酯对干旱胁迫下狭叶黄芩生理生化的影响,为狭叶黄芩野生资源在妥善的保护基础上开发应用以及在干旱地区的园林应用提供一定的理论支持,主要研究结果如下:1.狭叶黄芩的茎段最佳消毒方式和最佳取材时期:最佳消毒方式为75%酒精15s+0.1%HgCl2消毒5min,污染率最低为8.25%;4月为狭叶黄芩外植体最佳取材时期,其分化率可达88.89%。2.狭叶黄芩带芽茎段再生体系的建立:适合狭叶黄芩诱导腋芽的基本培养基为MS培养基,外植体生长状态更佳;腋芽萌发的最佳培养基为:MS+1 mg/L6-BA+1 mg/LNAA,分化率可达73.66%;芽增殖的最佳培养基MS+1 mg/L6-BA+0.5 mg/LNAA,其芽增殖倍数为5.85;最佳生根培养基为:1/2MS+0.2 mg/LIBA,生根率可达到74.07%;试管苗移栽时发现蛭石:珍珠岩:园土比例按1:1:3的体积比搭配使用,移栽成活率最高达到79.24%,并且植株生长旺盛。3.狭叶黄芩愈伤再生体系的建立:叶片最佳消毒方式为75%酒精15s+1%NaClO消毒5min,其污染率最低为20%;诱导茎段愈伤的最佳培养基:MS+1 mg/L6BA+1 mg/L2-4D,诱导率为91.33%;以狭叶黄芩叶片作为外植体诱导愈伤组织时,发现所有的处理组均未诱导出愈伤组织。对于狭叶黄芩愈伤组织在增殖过程中的出现的褐化的现象,本研究发现添加0.5g/L碳粉的培养基,愈伤组织褐化率最低为24.44%,存活率最高为75.56%;适宜愈伤增殖的最佳培养基为MS+2 mg/L6-BA+0.5 mg/L2-4D+碳粉0.5g/L,其增殖倍数最高为3.29;在所有的处理组中,狭叶黄芩愈伤组织分化的最佳培养基为 MS+1 mg/L6-BA+0.5 mg/LNAA,分化率为 44.71%。4.茉莉酸甲酯对干旱胁迫下狭叶黄芩光合特性的影响:外源施加茉莉酸甲酯增强了狭叶黄芩的净光合速率、气孔导度和蒸腾速率;对三者主要起到促进作用。降低了胞间CO2浓度,其中9d的MJ4处理组对各项光合指标的影响最为显著。5.茉莉酸甲酯对干旱胁迫下狭叶黄芩的生理指标的影响:在外源施加不同浓度的茉莉酸甲酯后,整体看来,处理组的游离脯氨酸含量在1d和3d时与CK相近,而在以后的处理时间中低于CK,这说明外源施加茉莉酸甲酯能够有效抑制游离脯氨酸含量的上升,从而缓解干旱胁迫对狭叶黄芩产生的不良影响。可溶性蛋白含量在前6d的处理中与CK相近或低于CK,而在以后的处理中显著高于CK,说明茉莉酸甲酯需要较长的时间才能引起可溶性蛋白含量的增加。本研究中,外源施加茉莉酸甲酯从整体来看能够提高SOD、POD、CAT活性,但不同浓度的作用效果存在差异。PPO活性也均高于CK,外源施加茉莉酸甲酯对狭叶黄芩的PAL整体表现出促进作用。对狭叶黄芩的光合参数和生理指标的研究结果表明,经外源施加的茉莉酸甲酯处理能够有效减缓干旱胁迫对狭叶黄芩的不良影响,但对光合指标和生理指标影响最为显著的时间以及浓度并不一致。其中9d的MJ4处理组对狭叶黄芩的各项光合指标的影响最为显著,而对生理指标影响最为显著的处理时间为12d的各处理组。
【学位单位】：东北林业大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：S688.4
【部分图文】：

表３－６不同激素配比对狭叶黄芩愈伤组织分化影响??Ｔａｂｌｅ?３－６?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｖａｒｉｏｕｓ?ｈｏｒｍｏｎｅ?ｒａｔｉｏｎｓ?ｏｎ?ｃａｌｌｕｓ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ?ｆｏｒ?纪／／ａｒｋ?Ｎａｋａｉ??６＾ＢＡ?ＮＡＡ?分化率?平均不定芽??处理号?褐化率（％）??（ｍｇ／Ｌ）?（ｍｇ／Ｌ）?（％）?数（个）??１?０５?〇７ｌ?１５．２４±４．６５ｄｅ?１３．２９±４．０８ｄ?１．１３±１．０３ｄ??２?０．５?０．２?１０．７４±２．６１ｅｆ?１２．６４?士?２．３?Ｉｄ?１．０７±０．１２ｄ??３?０．５?０．５?２０．１７±５．４３ｃｄ?１９．５０?士?９．８１ａｂｃｄ?２．６７?士?２．５２ｂｃｄ??４?０．５?１?１２．５０±２．５０ｅｆ?２４．７２土?４．５９ａｂｃ?２．４０?土?０．５３ｂｃｄ??５?１?０．１?７．９８?士?４．４１ｆ?１１．６０?士?１．５３ｄ?１．４３±０．５１ｃｄ??６?１?０．２?１５．５１?士?１．５４ｄｅ?１２．２６?士?２．４４ｄ?１．５０?土?０．５０ｃｄ??７?１?０．５?４４．７１±１．６１ａ?１７．５３±１．１９ｂｃｄ?６．３３?士?０．５８ａ??８?１?１?２０．００土?５．００ｃｄ?２６．３９±５．５５ａｂ?３．６７±２．０８ｂｃ??９?２?０．１?１６．５８士?１．９４ｄｅ?１９．５８?士?０．７２ａｂｃｄ?２．２３?土?１．３１ｂｃｄ??１０?２?０．２?１０．８４士?３．６３ｅｆ?２８．５６土?８．６９ａ?１．４７?士?０．４５ｃｄ??１１?２?０．５?２３．７０士?５
【参考文献】

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本文编号：2853453