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柿果实木葡聚糖内糖基转移/水解酶基因表达特性及功能分析

发布时间:2020-12-05 06:52
  柿果实采后极易软化,不利于鲜柿的贮藏和运输,影响其商品价值。木葡聚糖是高等植物细胞壁半纤维素的主要成分,半纤维素与纤维素微纤丝构成网状结构,对细胞壁的膨胀松软起限制作用,也是细胞壁的主要机械支撑物来源。木葡聚糖内糖基转移/水解酶(XTH)具有催化木葡聚糖分子水解和糖基转移的双重作用,它在植物生长发育、果实成熟软化及逆境胁迫抗性形成等过程中都发挥重要功能。目前XTH发挥功能的机制尚不明确,柿果实XTH基因的发掘和功能研究也鲜有报道。本文首先对柿果实中分离得到的XTH基因家族成员进行表达分析,筛选出参与果实生长发育和成熟软化的关键基因。其次利用体外诱导蛋白和亚细胞定位,在蛋白层面上分析关键基因发挥功能的作用机制。在此基础上,利用转基因手段系统研究柿DkXTH1和DkXTH8基因的功能,揭示XTH在果实生长发育、成熟衰老及逆境胁迫中的重要作用。主要研究结果如下:1.利用RACE技术从‘富平尖柿’中分离得到4条新的柿XTH基因,命名为DkXTH5-8。与DkXTH1-4类似,新基因均具有其他物种XTH的共同特征。聚类分析表明,柿DkXTH1-8基因被聚在Ⅰ/Ⅰ类中。XTH三维结构中Loop2的... 

【文章来源】:西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:104 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

柿果实木葡聚糖内糖基转移/水解酶基因表达特性及功能分析


XET的整合转糖基作用示意图

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种转糖基方式是重组的转移酶作用,它是在两个已有细胞(图 1-2)。首先 XTH 与其中一条已有木葡聚糖分子结成酶-底物共价复合体。之后酶-底物复合体中的还原性接,此时细胞壁结构松弛,以便于重组。最后酶脱离复pson and Fry 2001)。关 XTH 活性与蛋白结构的关系也被广泛研究。对比只的旱金莲TmNXGl和只具有转移酶活性的杂交杨树PttX存在环 1 和环 2 上明显差异的氨基酸序列和空间构象。氨基酸,而 PttXET16-34 的环 2 只有 5 个氨基酸。将 Tm酶 Tm-NXG1-△YNIIG 表现明显的 XET 活性,同时其 可能是调控 XET 和 XEH 活性的关键(Baumann et al. 20

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【参考文献】:
期刊论文
[1]柿采后丙烯和1–甲基环丙烯处理对两个扩展蛋白基因表达的影响[J]. 孙振营,韩叶,李秀芳,马秋诗,饶景萍.  园艺学报. 2014(06)
[2]采后嘎拉苹果果实细胞壁代谢及关键酶基因表达特性研究[J]. 齐秀东,李海山,魏建梅,贾艳茹.  华北农学报. 2012(02)
[3]柿果实内切-1,4-β-葡聚糖酶基因克隆与定量表达分析[J]. 宋康华,饶景萍,常晓晓,祝庆刚.  园艺学报. 2011(10)
[4]果胶降解相关酶与果实成熟软化[J]. 佟兆国,王飞,高志红,周军,徐秋红,章镇.  果树学报. 2011(02)
[5]硬溶质型桃果实成熟过程中细胞壁多糖降解特性及其相关酶研究[J]. 阚娟,刘涛,金昌海,谢海艳.  食品科学. 2011(04)
[6]细胞壁重构关键酶木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶(XTH)的研究进展[J]. 杜丽萍,沈昕,陈少良,胡赞民.  农业生物技术学报. 2010(03)
[7]赤霉素和萘乙酸对柿果实采后成熟软化生理指标的影响[J]. 付润山,姜妮娜,饶景萍,索江涛.  西北植物学报. 2010(06)
[8]京白梨果实后熟软化过程中细胞壁代谢及其调控[J]. 魏建梅,马锋旺,关军锋,袁军伟,朱向秋.  中国农业科学. 2009(08)
[9]丙烯和1-MCP处理对采后柿果实ACS和ACO基因表达的影响[J]. 刘乐,饶景萍,常晓晓,弋顺超.  中国农业科学. 2009(06)
[10]柿果实多聚半乳糖醛酸酶基因克隆与序列分析[J]. 刘乐,饶景萍,常晓晓.  西北植物学报. 2009(04)

硕士论文
[1]柿霜与柿多糖功能特性的初步研究[D]. 李春梅.山东农业大学 2010



本文编号:2899067

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