miR166和miR319在黄瓜响应盐胁迫中的功能分析
发布时间：2021-02-15 09:36
黄瓜（Cucumis sativus L.）是重要的设施栽培作物,设施土壤盐渍化严重制约了黄瓜的生产。microRNA（miRNA）通过作用于靶基因参与调控植物对非生物逆境的抗性。课题组前期通过对高通量测序结果分析,得到了一些在盐胁迫下差异表达的黄瓜miRNAs。本研究在此基础之上,进一步挖掘响应盐胁迫的关键miRNAs的功能。主要结合转基因技术和耐盐性鉴定,筛选出一种或多种在盐胁迫中发挥作用的miRNAs,并且对其响应盐胁迫的机理做初步的探究,为黄瓜耐盐性研究提供参考。本研究主要结果如下:1.结合高通量测序结果和qRT-PCR验证,筛选出miR166和miR319可能响应黄瓜盐胁迫。根据课题组前期测序得到的10种在盐胁迫下差异表达的miRNAs,挑选出和盐逆境相关靶基因作为这些miRNAs预测靶基因。通过qRT-PCR分析miRNA和预测靶基因之间的关系,结果发现在黄瓜的叶片和根尖中,miR166负调控其预测靶基因;在黄瓜根尖中,miR319负调控其预测靶基因。2.获得miR166和miR319的纯合过表达转基因拟南芥。以黄瓜“津春2号”的DNA作为模板,克隆miR166和miR31...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
miRNA与其预侧靶垂因表达盆之间的关系
注：Ｌ表示叶片，Ｒ表示根系??Ｆｉｇ．３－１１?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌｓ?ｏｆ?ｋｅｙ?ｓａｌｔ－ｔｏｌｅｒａｎｔ?ｇｅｎｅｓ?ｉｎ?ｍｉＲ１６６?Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ??ｔｈａｌｉａｎａ??Ｎｏｔｅ：?Ｌ?ｍｅａｎｓ?ｔｈｅ?ｌｅａｆ，?Ｒ?ｍｅａｎｓ?ｔｈｅ?ｒｏｏｔ??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]植物microRNA靶基因的预测与验证技术研究进展[J]. 崔俊霞,魏康宁,谢伊源,王丽,李用芳. 河南农业科学. 2018(07)
[2]TCP转录因子在植物发育和生物胁迫响应中的作用[J]. 冯雅岚,熊瑛,张均,陈鲜妮,郭静茹,马超. 植物生理学报. 2018(05)
[3]盐胁迫下外源激素对黄瓜幼苗生理特性的影响[J]. 张环宇. 黑龙江农业科学. 2018(03)
[4]不同水稻种质在不同生育期耐盐鉴定的差异[J]. 吴家富,杨博文,向珣朝,许亮,颜李梅. 植物学报. 2017(01)
[5]Dynamic Expression of mi RNAs and Their Targets in the Response to Drought Stress of Grafted Cucumber Seedlings[J]. LI Chaohan,LI Yansu,BAI Longqiang,HE Chaoxing,YU Xianchang. Horticultural Plant Journal. 2016(01)
[6]miR319a及其靶基因在木薯中的低温响应分析[J]. 曾长英,周玉飞,彭明. 生物技术通报. 2015(11)
[7]植物中miRNA及其靶基因的检测与鉴定方法[J]. 位明明,李维国. 热带农业科学. 2015(08)
[8]蔬菜盐害生理及其缓解措施的研究进展[J]. 刘志雄,戴照义,王运强,郭凤领. 长江蔬菜. 2014(18)
[9]植物microRNA功能瞬时验证体系的建立[J]. 赵文婷,高志晖,孟冬,刘晓东,魏建和. 生物技术通讯. 2014(01)
[10]HD-Zip Ⅲ转录因子家族与植物细胞分化[J]. 朱莹莹,于亮亮,汪杏芬,李来庚. 植物学报. 2013(02)
博士论文
[1]柑橘珠心胚起始相关miRNA挖掘与csi-miR156a调控体细胞胚发生作用机理[D]. 龙健梅.华中农业大学 2017
[2]参与柑橘果实发育的miRNA和靶基因的挖掘与分析[D]. 刘元龙.华中农业大学 2015
本文编号：3034598
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
miRNA与其预侧靶垂因表达盆之间的关系
注：Ｌ表示叶片，Ｒ表示根系??Ｆｉｇ．３－１１?Ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌｓ?ｏｆ?ｋｅｙ?ｓａｌｔ－ｔｏｌｅｒａｎｔ?ｇｅｎｅｓ?ｉｎ?ｍｉＲ１６６?Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ??ｔｈａｌｉａｎａ??Ｎｏｔｅ：?Ｌ?ｍｅａｎｓ?ｔｈｅ?ｌｅａｆ，?Ｒ?ｍｅａｎｓ?ｔｈｅ?ｒｏｏｔ??
?位点，突变靶基因位点（阴性对照），与ｍｉＲＮＡ序列完全互补的靶基因位点（阳??性对照）。如图３－１４，根据ｍｉＲ１６６的预测靶基因结果，分别设计与预测靶位点相??对应阴性对照和阳性对照序列。??Ｅｖ：?????ｍｉＲＮＡ?：?????Ｔａｒ：?？??Ｔａｒｇｅｔ??Ｍ－ｔａｒ?：??Ｍｕｔａｎｔ?ｔａｒｇｅｔ?）??ＧＦＰ????Ｐ－ｔａｒ?：?Ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｔａｒｇｅｔ?ｊ?ＧＦＰ?????图３－１３农杆菌介导的烟草瞬时转化载体构建图??Ｆｉｇ．３－１３?Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ－ｍｅｄｉａｔｅｄ?ｔｒａｎｓｉｅｎｔ?ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ?ｖｅｃｔｏｒ?ｉｎ?Ｔｏｂａｃｃｏ．??注：ＥＶ：空载，ｍｉＲＮＡ：?ｍｉＲＮＡ的前体序列，Ｔａｒ：?ｍｉＲＮＡ的靶基因位点，Ｍ－ｔａｒ：?ｍｉＲＮＡ??靶基因的突变位点，Ｐ－ｔａｒ：?ｍｉＲＮＡ靶基因的完全互补位点。??Ｎｏｔｅ：?ＥＶ：?ｅｍｐｔｙ?ｖｅｃｔｏｒ，?ｍｉＲＮＡ：?ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ?ｏｆ?ｍｉＲＮＡ，?Ｔａｒ：?ｔａｒｇｅｔ?ｇｅｎｅ?ｓｉｔｅｓ?ｏｆ?ｍｉＲＮＡ，?Ｍ－ｔａｒ：??ｍｕｔａｔｉｏｎ?ｓｉｔｅｓ?ｏｆ?ｍｉＲＮＡ?ｔａｒｇｅｔ，?Ｐ－ｔａｒ：?ｃｏｍｐｌｅｔｅ?ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｙ?ｓｉｔｅｓ?ｏｆ?ｔａｒｇｅｔ?ｇｅｎｅｓ?ｏｆ?ｍｉＲＮＡ．??▲?Ｂ??＾?ｍｉＲＮＡ?２１?ＣＣＣＣＵＵＡＣＵＵＣＧＧＡＣＣＡＧＧＣＵ?１????Ｃｓａ７Ｇ４５２９４０：?＃?ＳＳＩ?ｃｏｇｇａａｕｇａａｇｃｃｕｇｇｕ＾ｃｇｇ?５７１?Ｃｓａ７Ｇ４５２９４０：５
【参考文献】：
期刊论文
[1]植物microRNA靶基因的预测与验证技术研究进展[J]. 崔俊霞,魏康宁,谢伊源,王丽,李用芳. 河南农业科学. 2018(07)
[2]TCP转录因子在植物发育和生物胁迫响应中的作用[J]. 冯雅岚,熊瑛,张均,陈鲜妮,郭静茹,马超. 植物生理学报. 2018(05)
[3]盐胁迫下外源激素对黄瓜幼苗生理特性的影响[J]. 张环宇. 黑龙江农业科学. 2018(03)
[4]不同水稻种质在不同生育期耐盐鉴定的差异[J]. 吴家富,杨博文,向珣朝,许亮,颜李梅. 植物学报. 2017(01)
[5]Dynamic Expression of mi RNAs and Their Targets in the Response to Drought Stress of Grafted Cucumber Seedlings[J]. LI Chaohan,LI Yansu,BAI Longqiang,HE Chaoxing,YU Xianchang. Horticultural Plant Journal. 2016(01)
[6]miR319a及其靶基因在木薯中的低温响应分析[J]. 曾长英,周玉飞,彭明. 生物技术通报. 2015(11)
[7]植物中miRNA及其靶基因的检测与鉴定方法[J]. 位明明,李维国. 热带农业科学. 2015(08)
[8]蔬菜盐害生理及其缓解措施的研究进展[J]. 刘志雄,戴照义,王运强,郭凤领. 长江蔬菜. 2014(18)
[9]植物microRNA功能瞬时验证体系的建立[J]. 赵文婷,高志晖,孟冬,刘晓东,魏建和. 生物技术通讯. 2014(01)
[10]HD-Zip Ⅲ转录因子家族与植物细胞分化[J]. 朱莹莹,于亮亮,汪杏芬,李来庚. 植物学报. 2013(02)
博士论文
[1]柑橘珠心胚起始相关miRNA挖掘与csi-miR156a调控体细胞胚发生作用机理[D]. 龙健梅.华中农业大学 2017
[2]参与柑橘果实发育的miRNA和靶基因的挖掘与分析[D]. 刘元龙.华中农业大学 2015
本文编号：3034598
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