一种新的莴苣叶斑病病原鉴定及弱毒相关真菌病毒对其生防潜力的研究
发布时间：2021-02-18 21:27
莴苣（Lactuca sativa L.）是世界上重要的蔬菜作物。2013-2015年冬季,在湖南省的莴苣上发现一种危害严重的叶斑病。田间症状为叶片大量黄褐色坏死斑点,圆形至椭圆形,病斑直径2-10mm不等。通过组织分离法,分离纯化该莴苣叶斑病的病原,形态学结合分子生物学将其鉴定为囊状匍柄霉（Stemphylium vesicarium）,编号Sv HN-02。将Sv HN-02与实验室前期获得的含有真菌病毒的匍柄霉属弱毒菌株WS-01（Stemphylium solani）对峙培养后,发现该真菌病毒可水平转移至菌株Sv HN-02,并对寄主真菌产生影响,结果如下:1、莴苣叶斑病叶上分离纯化得到的菌株Sv HN-02经柯赫氏法则验证确定为莴苣叶斑病的病原。形态学结合分子生物学将菌株Sv HN-02鉴定为S.vesicarium。这是首次发现S.vesicarium引起莴苣叶斑病。研究了Sv HN-02的部分生物学特性,发现其在p H7的培养基上生长最快,最适生长温度为25℃。2、Sv HN-02与前期本实验室分离的带真菌病毒的弱毒菌株WS-01对峙培养后,通过试验确定了该病毒可以水平转...
【文章来源】：湖南农业大学湖南省
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
莴苣叶斑病田间发病症状Figure2-1Symptomsoflettuceleafspot分离纯化的病原菌在PDA、PCA和V8三种培养基上生长速度差别很小
图 2-2 从左至右依次为菌株（SvHN-02）在 A1:PDA、A2:PCA 和 A3:V8 培养基上培养 8 d 后的菌落形态图：B1：菌株（SvHN-02）分生孢子；B2: 菌株（SvHN-02）分生孢子梗；和 B3：菌株（SvHN-02）分生孢子萌发Figure 2-2 From left to right strains （SvHN-02） medium for 8 d after the colony morphologydiagram in A1:PDA: B1: A2:PCA, andA3:V8 strains （SvHN-02） conidia; strain B2: （SvHN-02）sterigmata; and B3 Strain （SvHN-02） conidia germination2.3.2 形态鉴定通过观察、测量分离纯化后获得的病原菌 SvHN-02 的形态特征包括分生孢子的大小及长宽比，参照 Simmons E G（1969; 1985）和张天宇（2009）《中国真菌志》进行微观形态学的鉴定。观察结果与 Koike, S T（2013）年报道的孢子形态相似，从形态学初步鉴定为 Stemphylium vesicarium.。
苣叶斑病病菌进行鉴定，采用分子生物学方，使用 ITS4/ITS5，微管蛋白β（BT）和延伸扩增后，取 5 μL PCR 产物采用 1%琼脂糖凝胶右的 3 条带（见图 2-3），并送 PCR 产物到铂 NCBI BLAST 比对。结果显示：rDNA-.1）一致性为 99%，与 Stemphylium solani（Aα（TEF1 -α）与 Stemphylium vesicarium（JF3 lycopersici（KU599924.1）一致性为 94%；β-icarium（JQ671944.1）一致性为 97%，与为 94%。运用 MEGA6.0 采用邻接法分别对三图 2-3，图 2-3C）。综合系统发育树可知， 归为一类，据此，将 SvHN-02 鉴定为 Stemp
【参考文献】：
期刊论文
[1]莴苣叶斑病菌的分离鉴定及弱毒菌株致病力的衰退[J]. 潘显婷,陆训,庞茜丹,高必达,周倩. 湖南农业大学学报(自然科学版). 2016(05)
[2]木霉菌株分离筛选及对茄子黄萎病防治作用的研究[J]. 赵丹,曲红云,温玲,潘凤娟,林密. 黑龙江农业科学. 2015(01)
[3]衡阳地区莴笋叶斑病病原菌的鉴定及其室内药剂筛选[J]. 李玉中,杨芳,刘春,滕涛,何丽芳. 江苏农业科学. 2014(02)
[4]海南省冬季北运蔬菜匍柄霉叶斑病病原的鉴定[J]. 杜公福,周艳芳,石延霞,谢学文,李宝聚. 植物保护. 2013(02)
[5]叶用莴苣种质资源的主要农艺性状鉴定与耐热性评价[J]. 陈青君,韩莹琰,谷建田,范双喜. 中国蔬菜. 2011(20)
[6]纤维素刚果红培养基筛选产纤维素酶菌株的影响因素研究[J]. 刘起丽,张建新,徐瑞富,孔凡彬,黄伟东. 西北农业学报. 2007(05)
[7]大蒜病害调查病原鉴定及其防治[J]. 盛红梅,贾迎春,陈秀蓉. 甘肃农业大学学报. 2003(02)
[8]中国匍柄霉研究I. （英文）[J]. 张修国,张天宇. 菌物系统. 2002(03)
[9]第二十讲 莴苣[J]. 钱丽珠. 上海蔬菜. 1999(01)
[10]苜蓿匍柄霉叶斑病[J]. 南志标. 国外畜牧学.草原与牧草. 1984(04)
博士论文
[1]稻曲病菌真菌病毒的多样性研究[D]. 江银辉.华中农业大学 2014
[2]大蒜白斑病病原学、防治技术及其毒素致病机理研究[D]. 郑露.华中农业大学 2010
[3]单一田块核盘菌多样性分析及携带真菌病毒的菌株的遗传特性研究[D]. 张丽艳.华中农业大学 2010
硕士论文
[1]核盘菌菌株SNZ1-3-5中携带病毒的初步研究[D]. 李艳.华中农业大学 2012
[2]番茄灰叶斑病病原鉴定及其生物学特性研究[D]. 韩长志.河北农业大学 2007
[3]大蒜叶枯病病原生物学及病菌毒素培养条件研究[D]. 张志强.西北农林科技大学 2007
[4]中国细基格孢属（Ulocladium）和匍柄霉属（Stemphylium）的分类研究[D]. 王勇.山东农业大学 2007
本文编号：3040108
【文章来源】：湖南农业大学湖南省
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
莴苣叶斑病田间发病症状Figure2-1Symptomsoflettuceleafspot分离纯化的病原菌在PDA、PCA和V8三种培养基上生长速度差别很小
图 2-2 从左至右依次为菌株（SvHN-02）在 A1:PDA、A2:PCA 和 A3:V8 培养基上培养 8 d 后的菌落形态图：B1：菌株（SvHN-02）分生孢子；B2: 菌株（SvHN-02）分生孢子梗；和 B3：菌株（SvHN-02）分生孢子萌发Figure 2-2 From left to right strains （SvHN-02） medium for 8 d after the colony morphologydiagram in A1:PDA: B1: A2:PCA, andA3:V8 strains （SvHN-02） conidia; strain B2: （SvHN-02）sterigmata; and B3 Strain （SvHN-02） conidia germination2.3.2 形态鉴定通过观察、测量分离纯化后获得的病原菌 SvHN-02 的形态特征包括分生孢子的大小及长宽比，参照 Simmons E G（1969; 1985）和张天宇（2009）《中国真菌志》进行微观形态学的鉴定。观察结果与 Koike, S T（2013）年报道的孢子形态相似，从形态学初步鉴定为 Stemphylium vesicarium.。
苣叶斑病病菌进行鉴定，采用分子生物学方，使用 ITS4/ITS5，微管蛋白β（BT）和延伸扩增后，取 5 μL PCR 产物采用 1%琼脂糖凝胶右的 3 条带（见图 2-3），并送 PCR 产物到铂 NCBI BLAST 比对。结果显示：rDNA-.1）一致性为 99%，与 Stemphylium solani（Aα（TEF1 -α）与 Stemphylium vesicarium（JF3 lycopersici（KU599924.1）一致性为 94%；β-icarium（JQ671944.1）一致性为 97%，与为 94%。运用 MEGA6.0 采用邻接法分别对三图 2-3，图 2-3C）。综合系统发育树可知， 归为一类，据此，将 SvHN-02 鉴定为 Stemp
【参考文献】：
期刊论文
[1]莴苣叶斑病菌的分离鉴定及弱毒菌株致病力的衰退[J]. 潘显婷,陆训,庞茜丹,高必达,周倩. 湖南农业大学学报(自然科学版). 2016(05)
[2]木霉菌株分离筛选及对茄子黄萎病防治作用的研究[J]. 赵丹,曲红云,温玲,潘凤娟,林密. 黑龙江农业科学. 2015(01)
[3]衡阳地区莴笋叶斑病病原菌的鉴定及其室内药剂筛选[J]. 李玉中,杨芳,刘春,滕涛,何丽芳. 江苏农业科学. 2014(02)
[4]海南省冬季北运蔬菜匍柄霉叶斑病病原的鉴定[J]. 杜公福,周艳芳,石延霞,谢学文,李宝聚. 植物保护. 2013(02)
[5]叶用莴苣种质资源的主要农艺性状鉴定与耐热性评价[J]. 陈青君,韩莹琰,谷建田,范双喜. 中国蔬菜. 2011(20)
[6]纤维素刚果红培养基筛选产纤维素酶菌株的影响因素研究[J]. 刘起丽,张建新,徐瑞富,孔凡彬,黄伟东. 西北农业学报. 2007(05)
[7]大蒜病害调查病原鉴定及其防治[J]. 盛红梅,贾迎春,陈秀蓉. 甘肃农业大学学报. 2003(02)
[8]中国匍柄霉研究I. （英文）[J]. 张修国,张天宇. 菌物系统. 2002(03)
[9]第二十讲 莴苣[J]. 钱丽珠. 上海蔬菜. 1999(01)
[10]苜蓿匍柄霉叶斑病[J]. 南志标. 国外畜牧学.草原与牧草. 1984(04)
博士论文
[1]稻曲病菌真菌病毒的多样性研究[D]. 江银辉.华中农业大学 2014
[2]大蒜白斑病病原学、防治技术及其毒素致病机理研究[D]. 郑露.华中农业大学 2010
[3]单一田块核盘菌多样性分析及携带真菌病毒的菌株的遗传特性研究[D]. 张丽艳.华中农业大学 2010
硕士论文
[1]核盘菌菌株SNZ1-3-5中携带病毒的初步研究[D]. 李艳.华中农业大学 2012
[2]番茄灰叶斑病病原鉴定及其生物学特性研究[D]. 韩长志.河北农业大学 2007
[3]大蒜叶枯病病原生物学及病菌毒素培养条件研究[D]. 张志强.西北农林科技大学 2007
[4]中国细基格孢属（Ulocladium）和匍柄霉属（Stemphylium）的分类研究[D]. 王勇.山东农业大学 2007
本文编号：3040108
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/yylw/3040108.html
