琯溪蜜柚黑斑病菌的生理特性及绿色荧光蛋白标记
发布时间：2021-02-27 04:45
本文从珀溪蜜柚黑斑病菌Phyllosticta citriasiana的生长特性、寄主范围、代谢活性组分、遗传转化及绿色荧光蛋白标记等内容进行研究,取得结果如下：P. citriasiana菌丝生长对温度敏感,人工培养条件下,培养温度≥40℃或≤10℃时,菌丝生长完全受抑制。培养温度在15℃-35℃之间,菌丝生长速率呈现先增长后骤降的趋势,在培养温度为25℃时菌丝生长速率最快,7d的菌落直径达3.41cm,30℃次之（3.25cm）,它们与15℃（1.29cm）、20℃（1.49cm）和35℃（0.68cm）的生长速率存在显著差异,表明25-30℃较适宜该菌菌丝生长。菌丝在SOA培养基生长速率最快（9d）,与在OA培养基上的生长速率存在显著差异,OA培养基上添加2%的山梨醇可以促进菌丝的生长。菌丝生长对光照强度敏感,光照强度为0 Lux（黑暗条件）时生长速率最快,而光照强度为1980 Lux条件下的生长速率显著降低。P. citriasiana分生孢子在1%葡萄糖溶液、10%葡萄糖溶液和水中的萌发率随着萌发时间的延长（0-72h）,萌发率先升高后降低,在萌发48h时,萌发率最高,分别为...
【文章来源】：福建农林大学福建省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
1.1 寄生在柑橘属植物上的叶点霉种类及分布
1.2 叶点霉对柑橘属植物的危害及其生活史
1.3 琯溪蜜柚黑斑病菌P. citriasiana的研究进展
1.4 叶点霉属真菌的遗传转化及绿色荧光蛋白标记
1.5 本研究的目的和意义
第二章 Phyllosticta citriasiana的生长特性及寄主范围测定
2.1 材料、试剂和仪器
2.1.1 材料
2.1.2 试剂
2.1.3 仪器
2.2 试验方法
2.2.1 不同培养基对P. citriasiana菌丝生长的影响
2.2.2 不同温度对P. citriasiana菌丝生长的影响
2.2.3 不同光照条件对P. citriasiana菌丝生长的影响
2.2.4 不同培养液对分生孢子萌发的影响
2.2.5 P. citriasiana菌丝和分生孢子致死温度测定
2.2.5.1 P. citriasiana菌丝致死温度的测定
2.2.5.2 P. citriasiana分生孢子致死温度测定
2.2.6 P.citriasiana寄主范围测定
2.3 结果与分析
2.3.1 不同培养基对P. citriasiana菌丝生长的影响
2.3.2 不同温度对P. citriasiana菌丝生长的影响
2.3.3 不同光照强度对P. citriasiana菌丝生长的影响
2.3.4 不同培养液对分生孢子萌发的影响
2.3.5 P. citriasiana菌丝和分生孢子致死温度测定
2.3.6 P. citriasiana寄主范围测定
2.4 讨论
第三章 P. citriasiana培养滤液生物活性组分研究
3.1 材料、试剂和仪器
3.1.1 材料
3.1.2 试剂
3.1.3 仪器
3.2 试验方法
3.2.1 P. citriasiana培养滤液的制备及生物活性测定
3.2.1.1 P.citriasiana在不同液体培养基上培养滤液活性组分的差异
3.2.1.2 不同温度水浴处理对P.citriasiana培养滤液活性组分的影响
3.2.1.3 不同培养时间对P.citriasiana培养滤液活性物质的影响
3.2.2 P. citriasiana培养滤液活性粗提物的紫外吸收光谱特性及生物测定
3.2.2.1 P. citriasiana培养滤液活性组分的提取及紫外吸收光谱特征
3.2.2.2 不同浓度培养滤液粗提物对琯溪蜜柚叶片的活性测定
3.2.2.3 P. citriasiana培养滤液粗提物对两种田间杂草的活性测定
3.3 结果与分析
3.3.1 P. citriasiana在不同液体培养基上生长差异及活性组分差异
3.3.2 不同温度处理P. citriasiana培养滤液对生物活性的影响
3.3.3 不同培养时间对P. citriasiana培养滤液生物活性的影响
3.3.4 不同浓度P. citriasiana培养滤液粗提物对琯溪蜜柚叶片的生物活性测定
3.3.5 不同方法提取的P. citriasiana活性组分紫外吸收光谱的差异
3.3.6 P. citriasiana培养滤液粗提物对两种杂草的生物活性测定
3.4 讨论
第四章 P. citriasiana原生质体的制备和再生
4.1 材料、试剂和仪器
4.1.1 材料
4.1.2 试剂
4.1.3 仪器
4.2 试验方法
4.2.1 适合P.citriasiana产生鲜嫩菌丝的液体培养基筛选
4.2.2 不同浓度裂解酶对P. citriasiana原生质体形成的影响
4.2.3 不同裂解时间对P. citriasiana原生质体形成的影响
4.2.4 不同浓度的酶对P. citriasiana原生质体再生的影响
4.3 结果与分析
4.3.1 适合P. citriasiana产生鲜嫩菌丝的液体培养基筛选
4.3.2 不同浓度的酶对P. citriasiana原生质体形成的影响
4.3.3 不同裂解时间对P. citriasiana原生质体形成的影响
4.3.4 P. citriasiana原生质体再生的影响因子分析
4.4 讨论
第五章 P. citriasiana的绿色荧光蛋白标记
5.1 材料、试剂和仪器
5.1.1 材料
5.1.2 试剂
5.1.3 仪器
5.2 试验方法
5.2.1 不同潮霉素浓度对P. citriasiana菌丝生长的影响
5.2.2 pCT74质粒DNA的抽提
2）介导的原生质体转化"> 5.2.3 聚乙二醇-氯化钙（PEG-CaCl2）介导的原生质体转化
5.2.4 不同因子对P. citriasiana原生质体转化率的影响
5.2.5 转化子的筛选和验证
5.2.5.1 转化子的PCR验证
5.2.5.2 转化子的荧光显微观察验证
5.3 结果与分析
5.3.1 不同潮霉素浓度对P. citriasiana菌丝生长的影响
5.3.2 P. citriasiana原生质体转化效率分析
5.3.3 P. citriasiana转化子的验证
5.4 讨论
第六章 全文结论
参考文献
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]柑橘黑斑病新病原亚洲柑橘叶点霉生物学特性[J]. 罗金水,卢松茂,余智城,林秀香,赖跃先,黄天瑞. 福建农业学报. 2016(02)
[2]琯溪蜜柚黑斑病拮抗细菌分离及鉴定[J]. 郑域茹,林秀香,武英,王美盛,林晓兰,罗金水. 中国农学通报. 2015(34)
[3]叶点霉属真菌寄主(宿主)和地理分布的多样性[J]. 吴石平,陈文,刘作易. 贵州农业科学. 2015(06)
[4]南非:停止向欧盟出口甜橙,柑桔出口遇困境[J]. 梁容. 中国果业信息. 2014(10)
[5]玉米纹枯病菌细胞核纯化与原生质体转化的探讨[J]. 张眉,周善跃,陈旭君,李宝笃,郭泽建. 植物病理学报. 2014(03)
[6]欧盟:因发现黑斑病暂停进口南非柑桔[J]. 童彤. 中国果业信息. 2013(12)
[7]琯溪蜜柚黑斑病菌防治药剂室内筛选试验[J]. 林秀香,余智城,卢松茂,罗金水,张汉荣,林智明. 中国南方果树. 2013(02)
[8]丝状真菌启动子研究进展[J]. 林涛,黄建忠. 安徽农业科学. 2013(07)
[9]巢式PCR检测琯溪蜜柚黑斑病病原菌[J]. 郑域茹,罗金水,张汉荣,卢松茂,林智明,王宏毅,李美桂. 热带作物学报. 2013(02)
[10]琯溪蜜柚黑斑病菌分离鉴定及其致病性测定[J]. 罗金水,张汉荣,卢松茂,赖跃先,林秀香,余智城,林智明,郑域茹. 福建热作科技. 2011(04)
博士论文
[1]中国西南地区叶点霉属真菌分子系统学研究[D]. 吴石平.贵州大学 2015
[2]中国柑橘黑斑病相关的叶点霉属真菌种类、遗传多样性和快速诊断技术研究[D]. 王兴红.浙江大学 2012
硕士论文
[1]琯溪蜜柚黑斑病诊断与发生规律研究[D]. 张晓彬.福建农林大学 2014
本文编号：3053707
【文章来源】：福建农林大学福建省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 绪论
1.1 寄生在柑橘属植物上的叶点霉种类及分布
1.2 叶点霉对柑橘属植物的危害及其生活史
1.3 琯溪蜜柚黑斑病菌P. citriasiana的研究进展
1.4 叶点霉属真菌的遗传转化及绿色荧光蛋白标记
1.5 本研究的目的和意义
第二章 Phyllosticta citriasiana的生长特性及寄主范围测定
2.1 材料、试剂和仪器
2.1.1 材料
2.1.2 试剂
2.1.3 仪器
2.2 试验方法
2.2.1 不同培养基对P. citriasiana菌丝生长的影响
2.2.2 不同温度对P. citriasiana菌丝生长的影响
2.2.3 不同光照条件对P. citriasiana菌丝生长的影响
2.2.4 不同培养液对分生孢子萌发的影响
2.2.5 P. citriasiana菌丝和分生孢子致死温度测定
2.2.5.1 P. citriasiana菌丝致死温度的测定
2.2.5.2 P. citriasiana分生孢子致死温度测定
2.2.6 P.citriasiana寄主范围测定
2.3 结果与分析
2.3.1 不同培养基对P. citriasiana菌丝生长的影响
2.3.2 不同温度对P. citriasiana菌丝生长的影响
2.3.3 不同光照强度对P. citriasiana菌丝生长的影响
2.3.4 不同培养液对分生孢子萌发的影响
2.3.5 P. citriasiana菌丝和分生孢子致死温度测定
2.3.6 P. citriasiana寄主范围测定
2.4 讨论
第三章 P. citriasiana培养滤液生物活性组分研究
3.1 材料、试剂和仪器
3.1.1 材料
3.1.2 试剂
3.1.3 仪器
3.2 试验方法
3.2.1 P. citriasiana培养滤液的制备及生物活性测定
3.2.1.1 P.citriasiana在不同液体培养基上培养滤液活性组分的差异
3.2.1.2 不同温度水浴处理对P.citriasiana培养滤液活性组分的影响
3.2.1.3 不同培养时间对P.citriasiana培养滤液活性物质的影响
3.2.2 P. citriasiana培养滤液活性粗提物的紫外吸收光谱特性及生物测定
3.2.2.1 P. citriasiana培养滤液活性组分的提取及紫外吸收光谱特征
3.2.2.2 不同浓度培养滤液粗提物对琯溪蜜柚叶片的活性测定
3.2.2.3 P. citriasiana培养滤液粗提物对两种田间杂草的活性测定
3.3 结果与分析
3.3.1 P. citriasiana在不同液体培养基上生长差异及活性组分差异
3.3.2 不同温度处理P. citriasiana培养滤液对生物活性的影响
3.3.3 不同培养时间对P. citriasiana培养滤液生物活性的影响
3.3.4 不同浓度P. citriasiana培养滤液粗提物对琯溪蜜柚叶片的生物活性测定
3.3.5 不同方法提取的P. citriasiana活性组分紫外吸收光谱的差异
3.3.6 P. citriasiana培养滤液粗提物对两种杂草的生物活性测定
3.4 讨论
第四章 P. citriasiana原生质体的制备和再生
4.1 材料、试剂和仪器
4.1.1 材料
4.1.2 试剂
4.1.3 仪器
4.2 试验方法
4.2.1 适合P.citriasiana产生鲜嫩菌丝的液体培养基筛选
4.2.2 不同浓度裂解酶对P. citriasiana原生质体形成的影响
4.2.3 不同裂解时间对P. citriasiana原生质体形成的影响
4.2.4 不同浓度的酶对P. citriasiana原生质体再生的影响
4.3 结果与分析
4.3.1 适合P. citriasiana产生鲜嫩菌丝的液体培养基筛选
4.3.2 不同浓度的酶对P. citriasiana原生质体形成的影响
4.3.3 不同裂解时间对P. citriasiana原生质体形成的影响
4.3.4 P. citriasiana原生质体再生的影响因子分析
4.4 讨论
第五章 P. citriasiana的绿色荧光蛋白标记
5.1 材料、试剂和仪器
5.1.1 材料
5.1.2 试剂
5.1.3 仪器
5.2 试验方法
5.2.1 不同潮霉素浓度对P. citriasiana菌丝生长的影响
5.2.2 pCT74质粒DNA的抽提
2）介导的原生质体转化"> 5.2.3 聚乙二醇-氯化钙（PEG-CaCl2）介导的原生质体转化
5.2.4 不同因子对P. citriasiana原生质体转化率的影响
5.2.5 转化子的筛选和验证
5.2.5.1 转化子的PCR验证
5.2.5.2 转化子的荧光显微观察验证
5.3 结果与分析
5.3.1 不同潮霉素浓度对P. citriasiana菌丝生长的影响
5.3.2 P. citriasiana原生质体转化效率分析
5.3.3 P. citriasiana转化子的验证
5.4 讨论
第六章 全文结论
参考文献
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]柑橘黑斑病新病原亚洲柑橘叶点霉生物学特性[J]. 罗金水,卢松茂,余智城,林秀香,赖跃先,黄天瑞. 福建农业学报. 2016(02)
[2]琯溪蜜柚黑斑病拮抗细菌分离及鉴定[J]. 郑域茹,林秀香,武英,王美盛,林晓兰,罗金水. 中国农学通报. 2015(34)
[3]叶点霉属真菌寄主(宿主)和地理分布的多样性[J]. 吴石平,陈文,刘作易. 贵州农业科学. 2015(06)
[4]南非:停止向欧盟出口甜橙,柑桔出口遇困境[J]. 梁容. 中国果业信息. 2014(10)
[5]玉米纹枯病菌细胞核纯化与原生质体转化的探讨[J]. 张眉,周善跃,陈旭君,李宝笃,郭泽建. 植物病理学报. 2014(03)
[6]欧盟:因发现黑斑病暂停进口南非柑桔[J]. 童彤. 中国果业信息. 2013(12)
[7]琯溪蜜柚黑斑病菌防治药剂室内筛选试验[J]. 林秀香,余智城,卢松茂,罗金水,张汉荣,林智明. 中国南方果树. 2013(02)
[8]丝状真菌启动子研究进展[J]. 林涛,黄建忠. 安徽农业科学. 2013(07)
[9]巢式PCR检测琯溪蜜柚黑斑病病原菌[J]. 郑域茹,罗金水,张汉荣,卢松茂,林智明,王宏毅,李美桂. 热带作物学报. 2013(02)
[10]琯溪蜜柚黑斑病菌分离鉴定及其致病性测定[J]. 罗金水,张汉荣,卢松茂,赖跃先,林秀香,余智城,林智明,郑域茹. 福建热作科技. 2011(04)
博士论文
[1]中国西南地区叶点霉属真菌分子系统学研究[D]. 吴石平.贵州大学 2015
[2]中国柑橘黑斑病相关的叶点霉属真菌种类、遗传多样性和快速诊断技术研究[D]. 王兴红.浙江大学 2012
硕士论文
[1]琯溪蜜柚黑斑病诊断与发生规律研究[D]. 张晓彬.福建农林大学 2014
本文编号：3053707
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