猕猴桃（Actinidia L.）荧光原位杂交技术体系的建立与优化
发布时间：2021-02-28 19:24
猕猴桃（Kiwifruit）属猕猴桃科（Actinidiaceae）猕猴桃属（Actinidia Lindl.）,雌雄异株,为多年生攀缘性落叶藤本果树,是20世纪人工驯化栽培野生果树最为成功的四大果树种之一。猕猴桃属植物种类繁多,分布范围广泛,生态习性各异,含有大量的野生资源及近缘物种,具有较为复杂的遗传多样性,且由于自然杂交、实生选种和杂交育种等因素,使种间和种内的基因渐渗频繁,从而形成了极为丰富的种间变型和种内变型,因此猕猴桃属植物遗传多样性以及种间与种内亲缘关系的深入研究具有明显的重要性与必要性。当前,国内外学者运用形态学、孢粉学、细胞学、生物化学和分子生物学技术等从不同层次、不同方面、不同角度对猕猴桃属及其近缘野生种植物进行了大量的遗传多样性与亲缘关系研究分析,取得了重要进展。荧光原位杂交技术（Fluorescence in situ hybridization,FISH）作为分子细胞遗传学一项重要的研究手段,在动植物遗传图谱构建、遗传多样性与亲缘关系分析、基因定位、杂种鉴定等方面具有广泛的应用,但由于猕猴桃属植物染色体小（0.61.5μm）且数目多（2n...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 文献综述
1.1 荧光原位杂交概述
1.1.1 荧光原位杂交技术（Fluorescence in situ hybridization,FISH）
1.1.2 荧光原位杂交技术的原理及特点
1.1.3 荧光原位杂交技术体系关键因素
1.1.4 荧光原位杂交技术在植物研究方面的应用
1.2 基因组原位杂交（Genome in situ hybridization,GISH）概述
1.2.1 基因组原位杂交技术的原理及特点
1.2.2 基因组原位杂交技术要点
1.2.3 基因组原位杂交技术的应用
1.3 DNA纤维荧光原位杂交（DNA fiber-FISH）概述
1.3.1 DNA纤维荧光原位杂交技术的原理及特点
1.3.2 DNA纤维荧光原位杂交技术要点
1.3.3 DNA纤维荧光原位杂交技术的应用
1.4 猕猴桃属植物染色体研究
1.4.1 猕猴桃属植物概述
1.4.2 猕猴桃属植物染色体研究
第2章 引言
2.1 目的与意义
2.2 研究内容
2.2.1 猕猴桃GISH技术体系建立与优化
2.2.2 猕猴桃FISH技术体系建立与优化
2.2.3 猕猴桃DNA fiber-FISH技术体系建立与优化
第3章 材料与方法
3.1 试验材料
3.1.1 GISH试验材料
3.1.2 FISH试验材料
3.1.3 DNA fiber-FISH试验材料
3.2 试验方法
3.2.1 探针的制备与标记
3.2.2 染色体制备
3.2.3 DNA纤维制备
3.2.4 GISH与 FISH技术流程
3.2.5 Fiber-FISH技术流程
第4章 结果与分析
4.1 探针制备与标记
4.2 GISH技术体系的建立与优化
4.2.1 试验材料的选择
4.2.2 中期染色体变性温度与时间
4.2.3 封阻DNA比例筛选
4.3 45SrDNA-FISH技术体系的建立与优化
4.4 DNA纤维荧光原位杂交技术体系的建立与优化
4.4.1 细胞核提取
4.4.2 DNA纤维制备
4.4.3 猕猴桃DNA fiber-FISH技术体系优化
第5章 讨论
5.1 基因组原位杂交关键影响因素
5.2 杂交后洗脱温度对45S r DNA-FISH的影响
5.3 DNA纤维原位杂交的关键技术因素
5.4 关于Fiber-FISH杂交信号的特点与真实性
5.5 关于猕猴桃GISH、FISH与 Fiber-FISH技术体系建立的意义与应用前景
第6章 结论
第7章 论文创新点及下一步研究计划
7.1 论文创新点
7.2 下一步研究计划
参考文献
附录
在读期间发表论文及参研课题
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]新中国果树科学研究70年——猕猴桃[J]. 方金豹,钟彩虹. 果树学报. 2019(10)
[2]六倍体小黑麦染色体的荧光原位杂交分析[J]. 杨婷,陈星灼,隋建枢,王伟,杨春苗,彭泽,耿广东,张庆勤,张素勤. 西南大学学报(自然科学版). 2019(04)
[3]毛竹和厚壁毛竹的核型分析及45S和5S rDNA的FISH分析[J]. 韩言利,郭起荣,韩永华,于钊妍,米月颖. 南京林业大学学报(自然科学版). 2019(02)
[4]荧光原位杂交技术的发展及其在植物基因组研究中的应用[J]. 刘玉玲,刘林杰,彭仁海. 分子植物育种. 2018(17)
[5]88个猕猴桃品种（系）及近缘野生种的倍性变异分析[J]. 廖光联,陈璐,钟敏,黄春辉,陶俊杰,曲雪艳,徐小彪. 江西农业大学学报. 2018(04)
[6]长白山地区野生软枣猕猴桃遗传多样性研究[J]. 赵成日. 北方园艺. 2018(08)
[7]基因组原位杂交技术及其在园艺植物基因组研究中的应用[J]. 王燕,陈清,陈涛,张静,汤浩茹,王小蓉. 西北植物学报. 2017(10)
[8]基于cpDNA序列的猕猴桃种质资源多态性分析[J]. 高丽杨,夏惠,谢玥,沈妍秋,王秀,梁东. 分子植物育种. 2017(09)
[9]猕猴桃属十个种的染色体倍性鉴定[J]. 王发明,李洁维,胡亚康,莫权辉,蒋桥生,龚弘娟,叶开玉,刘平平. 广西植物. 2018(02)
[10]双色原位杂交显示海带配子体5SrDNA与45SrDNA的非连锁关系[J]. 刘宇,董无善,刘丽,周志刚. 基因组学与应用生物学. 2018(07)
博士论文
[1]猕猴桃种间高密度遗传图谱的构建及果实性状QTLs定位[D]. 刘春燕.中国科学院研究生院(武汉植物园) 2016
[2]基于45S rDNA-FISH与GISH分析的草莓属（Fragaria）野生种亲缘关系与系统分类研究[D]. 翁天均.西南大学 2011
[3]棉花单染色体分离和DNA纤维FISH及其应用研究[D]. 彭仁海.中国农业科学院 2009
[4]利用荧光原位杂交技术（FISH）对中国明对虾和栉孔扇贝若干重要基因定位的研究[D]. 郇聘.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2009
[5]天然与人工合成三倍体枇杷基因组变异及其DNA甲基化分析[D]. 汪卫星.西南大学 2008
[6]猕猴桃属植物分类学研究[D]. 李新伟.中国科学院研究生院（武汉植物园） 2007
[7]荧光原位杂交技术在大白菜染色体基因定位中的应用研究[D]. 轩淑欣.河北农业大学 2006
[8]猕猴桃属植物的遗传多样性及种质超低温保存研究[D]. 徐小彪.湖南农业大学 2004
[9]柑橘体细胞杂种细胞遗传学及抗CTV等基因对枳的FISH分析[D]. 陈春丽.华中农业大学 2005
[10]荧光原位杂交和分子标记在水稻和小麦种质资源研究中的应用[D]. 余舜武.华中农业大学 2002
硕士论文
[1]抗寒性多年生麦草的选育及分子细胞学研究[D]. 刘晓强.哈尔滨师范大学 2019
[2]基于基因组原位杂交技术（GISH）对部分苹果属种类亲缘关系的研究[D]. 华利源.聊城大学 2019
[3]猕猴桃抗溃疡病资源的离体筛选及主要类型的分子细胞遗传学分析[D]. 王鹏.西南大学 2019
[4]基于荧光原位杂交的沙地云杉及近缘种亲缘关系研究[D]. 王菊.内蒙古农业大学 2018
[5]广东猕猴桃种质资源遗传多样性研究及其核心种质构建[D]. 叶婵娟.仲恺农业工程学院 2016
[6]草棉1号染色体物理图谱的构建及CCICR转座子家族的发现与分析[D]. 崔兴雷.中国农业科学院 2015
[7]柑橘及其近缘属植物5SrDNA的FISH位点研究[D]. 陈志.西南大学 2015
[8]桑属植物染色体倍性研究及FISH分析[D]. 李杨.西南大学 2015
[9]枣基因组原位杂交技术体系建立及赞皇大枣起源的研究[D]. 刘京京.河北农业大学 2014
[10]用三倍体作母本实现百合种质渗入育种[D]. 袁国良.浙江大学 2014
本文编号：3056331
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 文献综述
1.1 荧光原位杂交概述
1.1.1 荧光原位杂交技术（Fluorescence in situ hybridization,FISH）
1.1.2 荧光原位杂交技术的原理及特点
1.1.3 荧光原位杂交技术体系关键因素
1.1.4 荧光原位杂交技术在植物研究方面的应用
1.2 基因组原位杂交（Genome in situ hybridization,GISH）概述
1.2.1 基因组原位杂交技术的原理及特点
1.2.2 基因组原位杂交技术要点
1.2.3 基因组原位杂交技术的应用
1.3 DNA纤维荧光原位杂交（DNA fiber-FISH）概述
1.3.1 DNA纤维荧光原位杂交技术的原理及特点
1.3.2 DNA纤维荧光原位杂交技术要点
1.3.3 DNA纤维荧光原位杂交技术的应用
1.4 猕猴桃属植物染色体研究
1.4.1 猕猴桃属植物概述
1.4.2 猕猴桃属植物染色体研究
第2章 引言
2.1 目的与意义
2.2 研究内容
2.2.1 猕猴桃GISH技术体系建立与优化
2.2.2 猕猴桃FISH技术体系建立与优化
2.2.3 猕猴桃DNA fiber-FISH技术体系建立与优化
第3章 材料与方法
3.1 试验材料
3.1.1 GISH试验材料
3.1.2 FISH试验材料
3.1.3 DNA fiber-FISH试验材料
3.2 试验方法
3.2.1 探针的制备与标记
3.2.2 染色体制备
3.2.3 DNA纤维制备
3.2.4 GISH与 FISH技术流程
3.2.5 Fiber-FISH技术流程
第4章 结果与分析
4.1 探针制备与标记
4.2 GISH技术体系的建立与优化
4.2.1 试验材料的选择
4.2.2 中期染色体变性温度与时间
4.2.3 封阻DNA比例筛选
4.3 45SrDNA-FISH技术体系的建立与优化
4.4 DNA纤维荧光原位杂交技术体系的建立与优化
4.4.1 细胞核提取
4.4.2 DNA纤维制备
4.4.3 猕猴桃DNA fiber-FISH技术体系优化
第5章 讨论
5.1 基因组原位杂交关键影响因素
5.2 杂交后洗脱温度对45S r DNA-FISH的影响
5.3 DNA纤维原位杂交的关键技术因素
5.4 关于Fiber-FISH杂交信号的特点与真实性
5.5 关于猕猴桃GISH、FISH与 Fiber-FISH技术体系建立的意义与应用前景
第6章 结论
第7章 论文创新点及下一步研究计划
7.1 论文创新点
7.2 下一步研究计划
参考文献
附录
在读期间发表论文及参研课题
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]新中国果树科学研究70年——猕猴桃[J]. 方金豹,钟彩虹. 果树学报. 2019(10)
[2]六倍体小黑麦染色体的荧光原位杂交分析[J]. 杨婷,陈星灼,隋建枢,王伟,杨春苗,彭泽,耿广东,张庆勤,张素勤. 西南大学学报(自然科学版). 2019(04)
[3]毛竹和厚壁毛竹的核型分析及45S和5S rDNA的FISH分析[J]. 韩言利,郭起荣,韩永华,于钊妍,米月颖. 南京林业大学学报(自然科学版). 2019(02)
[4]荧光原位杂交技术的发展及其在植物基因组研究中的应用[J]. 刘玉玲,刘林杰,彭仁海. 分子植物育种. 2018(17)
[5]88个猕猴桃品种（系）及近缘野生种的倍性变异分析[J]. 廖光联,陈璐,钟敏,黄春辉,陶俊杰,曲雪艳,徐小彪. 江西农业大学学报. 2018(04)
[6]长白山地区野生软枣猕猴桃遗传多样性研究[J]. 赵成日. 北方园艺. 2018(08)
[7]基因组原位杂交技术及其在园艺植物基因组研究中的应用[J]. 王燕,陈清,陈涛,张静,汤浩茹,王小蓉. 西北植物学报. 2017(10)
[8]基于cpDNA序列的猕猴桃种质资源多态性分析[J]. 高丽杨,夏惠,谢玥,沈妍秋,王秀,梁东. 分子植物育种. 2017(09)
[9]猕猴桃属十个种的染色体倍性鉴定[J]. 王发明,李洁维,胡亚康,莫权辉,蒋桥生,龚弘娟,叶开玉,刘平平. 广西植物. 2018(02)
[10]双色原位杂交显示海带配子体5SrDNA与45SrDNA的非连锁关系[J]. 刘宇,董无善,刘丽,周志刚. 基因组学与应用生物学. 2018(07)
博士论文
[1]猕猴桃种间高密度遗传图谱的构建及果实性状QTLs定位[D]. 刘春燕.中国科学院研究生院(武汉植物园) 2016
[2]基于45S rDNA-FISH与GISH分析的草莓属（Fragaria）野生种亲缘关系与系统分类研究[D]. 翁天均.西南大学 2011
[3]棉花单染色体分离和DNA纤维FISH及其应用研究[D]. 彭仁海.中国农业科学院 2009
[4]利用荧光原位杂交技术（FISH）对中国明对虾和栉孔扇贝若干重要基因定位的研究[D]. 郇聘.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2009
[5]天然与人工合成三倍体枇杷基因组变异及其DNA甲基化分析[D]. 汪卫星.西南大学 2008
[6]猕猴桃属植物分类学研究[D]. 李新伟.中国科学院研究生院（武汉植物园） 2007
[7]荧光原位杂交技术在大白菜染色体基因定位中的应用研究[D]. 轩淑欣.河北农业大学 2006
[8]猕猴桃属植物的遗传多样性及种质超低温保存研究[D]. 徐小彪.湖南农业大学 2004
[9]柑橘体细胞杂种细胞遗传学及抗CTV等基因对枳的FISH分析[D]. 陈春丽.华中农业大学 2005
[10]荧光原位杂交和分子标记在水稻和小麦种质资源研究中的应用[D]. 余舜武.华中农业大学 2002
硕士论文
[1]抗寒性多年生麦草的选育及分子细胞学研究[D]. 刘晓强.哈尔滨师范大学 2019
[2]基于基因组原位杂交技术（GISH）对部分苹果属种类亲缘关系的研究[D]. 华利源.聊城大学 2019
[3]猕猴桃抗溃疡病资源的离体筛选及主要类型的分子细胞遗传学分析[D]. 王鹏.西南大学 2019
[4]基于荧光原位杂交的沙地云杉及近缘种亲缘关系研究[D]. 王菊.内蒙古农业大学 2018
[5]广东猕猴桃种质资源遗传多样性研究及其核心种质构建[D]. 叶婵娟.仲恺农业工程学院 2016
[6]草棉1号染色体物理图谱的构建及CCICR转座子家族的发现与分析[D]. 崔兴雷.中国农业科学院 2015
[7]柑橘及其近缘属植物5SrDNA的FISH位点研究[D]. 陈志.西南大学 2015
[8]桑属植物染色体倍性研究及FISH分析[D]. 李杨.西南大学 2015
[9]枣基因组原位杂交技术体系建立及赞皇大枣起源的研究[D]. 刘京京.河北农业大学 2014
[10]用三倍体作母本实现百合种质渗入育种[D]. 袁国良.浙江大学 2014
本文编号：3056331
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