苹果MdCER6的克

发布时间：2021-03-03 05:10

　　表皮蜡质是植物与外界接触的第一道屏障,在植物生长发育和抵御外界不良环境等方面起着重要的作用。蜡质的合成决定了蜡质的组成、结构和功能。拟南芥中研究发现,β-酮脂酰-Co A合酶（KCS）是蜡质合成过程中限速酶,CER6是控制KCS合成的关键基因。本论文通过克隆红星苹果表皮MdCER6,分析其生物学功能,并在苹果不同发育阶段和采后贮藏期间,研究了乙烯和1-MCP对MdCER6表达和对表皮蜡质含量的影响,以期初步阐明乙烯通过MdCER6调控苹果表皮蜡质合成的分子机制,为从基因水平研究乙烯调控苹果表皮蜡质合成机制提供参考。主要结果如下:1、从红星苹果果皮中克隆得到MdCER6基因片段,获得其全长,经生物信息学分析表明,该基因编码苹果表皮KCS,控制苹果表皮蜡质中超长链脂肪酸（VLCFAs）的合成。2、在苹果果实生长发育期和采后贮藏期,MdCER6均有表达:在采前7 d和贮藏30 d、60 d相对表达量较高,其余阶段表达量均较低。红星苹果表皮蜡质质量分布密度及二十八烷酸含量的变化均与MdCER6相对表达量的变化表现一致。3、在苹果采前阶段,乙烯对氨基环丙烷羧酸合酶（ACS）活性以及MdACS1和... 

【文章来源】：山东理工大学山东省

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 引言
    1.1 植物蜡质结构、功能及合成研究进展
        1.1.1 植物蜡质的结构、组成与作用
        1.1.2 植物蜡质的合成途径和运输
        1.1.3 蜡质合成关键基因研究进展
    1.2 乙烯在果实发育和贮藏应用中的研究进展
        1.2.1 乙烯和 1-MCP应用进展
        1.2.2 控制乙烯合成相关基因研究进展
    1.3 乙烯对蜡质及其合成的影响研究进展
    1.4 问题的提出
第二章 苹果MdCER6的克隆
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料处理
        2.1.2 试剂
        2.1.3 仪器设备
        2.1.4 实验方法
            2.1.4.1 苹果RNA的提取
            2.1.4.2 反转录
            2.1.4.3 设计特异性引物和目的基因序列的获得
            2.1.4.4 苹果MdCER6的RT-PCR技术
            2.1.4.5 MdCER6基因序列分析
    2.2 结果与分析
        2.2.1 苹果RNA提取物的鉴定
        2.2.2 MdCER6的克隆
        2.2.3 MdCER6基因序列比对
        2.2.4 MdCER6基因序列分析
    2.3 讨论
    2.4 小结
第三章 苹果发育和贮藏期MdCER6的表达
    3.1 材料与方法
        3.1.1 材料处理
        3.1.2 试剂
        3.1.3 仪器设备
        3.1.4 实验方法
            3.1.4.1 苹果RNA的提取
            3.1.4.2 反转录
            3.1.4.3 引物的设计与合成
            3.1.4.4 实时荧光定量PCR
            3.1.4.5 苹果表皮蜡质提取和测定
    3.2 结果与分析
        3.2.1 苹果发育和贮藏期MdCER6表达
        3.2.2 苹果发育和贮藏期表皮蜡质质量分布密度变化
        3.2.3 苹果发育和贮藏期表皮蜡质组成及其变化
    3.3 讨论
    3.4 小结
第四章 乙烯对苹果采前乙烯合成相关基因及MdCER6表达的共调控研究
    4.1 材料与方法
        4.1.1 材料处理
        4.1.2 试剂
        4.1.3 仪器设备
        4.1.4 实验方法
            4.1.4.1 苹果RNA的提取
            4.1.4.2 反转录
            4.1.4.3 引物的设计与合成
            4.1.4.4 实时荧光定量PCR
            4.1.4.5 ACS活性测定
            4.1.4.6 ACO活性测定
            4.1.4.7 ACC含量测定
            4.1.4.8 苹果其他生理指标
    4.2 结果与分析
        4.2.1 采前乙烯对乙烯合成相关基因及MdCER6的共调控
        4.2.2 乙烯对采前苹果ACS、ACO活性和ACC含量的影响
        4.2.3 采收前乙烯对苹果其他生理指标的影响
    4.3 讨论
    4.4 小结
第五章 乙烯对采后苹果MdCER6表达的调控
    5.1 材料与方法
        5.1.1 材料处理
        5.1.2 试剂
        5.1.3 仪器设备
        5.1.4 实验方法
            5.1.4.1 苹果RNA的提取
            5.1.4.2 反转录
            5.1.4.3 引物的设计与合成
            5.1.4.4 实时荧光定量PCR
            5.1.4.5 ACS活性测定
            5.1.4.6 ACO活性测定
            5.1.4.7 ACC含量测定
            5.1.4.8 苹果其他生理指标
    5.2 结果与分析
        5.2.1 乙烯对采后苹果MdCER6表达的调控
        5.2.2 乙烯对采后苹果果实ACS、ACO活性及ACC含量的影响
        5.2.3 乙烯对采后苹果其他理化指标的影响
    5.3 讨论
    5.4 小结
第六章 结论
参考文献
附录
致谢
在读期间公开发表的论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]PCR引物设计方法综述[J]. 尤超,赵大球,梁乘榜,周春华.  现代农业科技. 2011(17)
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[3]植物角质层对非生物逆境胁迫响应研究进展[J]. 许发喜,刘翠芳,邹杰,王育华,李尉,陈信波.  中国生物工程杂志. 2010(08)
[4]1-甲基环丙烯处理对冷藏红星苹果蜡质中酚类含量及其抗氧化活性的影响[J]. 邵建萍,张元湖,梁雅芹,张士刚.  园艺学报. 2008(08)
[5]杨梅核脂肪酸及蜡质成分分析[J]. 唐玉敏,洪枫,郭建平,邵志宇.  热带亚热带植物学报. 2008(04)
[6]小麦叶片表面蜡质及其与品种抗蚜性的关系[J]. 王美芳,陈巨莲,程登发,原国辉.  应用与环境生物学报. 2008(03)
[7]植物表皮蜡质的研究进展及WIN1对植物表皮蜡质的影响[J]. 李法莲,张淼,朱彩霞,邵群.  现代农业科技. 2008(11)
[8]苎麻性别分化与乙烯的关系研究[J]. 邢虎成,佘玮,罗中钦,秦占军,揭雨成.  中国农业科学. 2008(05)
[9]1-甲基环丙烯（1-MCP）在果蔬贮藏保鲜上的应用研究进展[J]. 陈金印,刘康.  江西农业大学学报. 2008(02)
[10]苹果角质层的组分特征及其对甲萘酚的吸附作用[J]. 李云桂,陈宝梁.  环境科学学报. 2007(11)

博士论文
[1]1-MCP对几种果实衰老的效应及调控机制研究[D]. 李富军.山东农业大学 2004

硕士论文
[1]苹果发育和贮藏期间表皮蜡质的组成及其变化研究[D]. 宋百成.山东理工大学 2013
[2]采前1-甲基环丙烯处理对青花菜贮藏品质的影响[D]. 李秀杰.山东农业大学 2010
[3]1-甲基环丙烯延缓采后甜瓜果实衰老的研究[D]. 孙爱萍.新疆农业大学 2009



本文编号：3060673