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丝瓜种质资源性状调查及遗传多样性分析

发布时间:2021-03-05 14:01
  我国丝瓜地方品种在市场中占主导地位,杂交品种较少。近几年,我国开始重视对杂交品种的选育。通过利用形态学标记和分子标记对丝瓜亲缘关系进行分析是一种有效的辅助育种手段。本试验以高度纯化、性状稳定的60份丝瓜自交系为试验材料,调查16个田间农艺性状,分析其遗传多样性;在优化丝瓜SRAP、ISSR分子标记反应体系的基础上,对60份丝瓜种质资源进行SRAP、ISSR分子标记,对遗传多样性和亲缘关系进行分析,构建遗传聚类图,鉴定丝瓜种质资源间的亲缘远近,为丝瓜种质资源鉴定、分类和丝瓜的杂交育种提供参考依据。主要研究结果如下:1.60份丝瓜材料田间农艺性状调查分析对60份丝瓜材料的16个农艺性状进行田间观察分析:60份丝瓜种质资源变异系数范围在0%-111%;多样性信息指数在0-2.037。在16个性状中,有10个质量性状,6个数量性状。在10个质量性状中,多样性指数最大的是瓜形,为1.371,最小的是叶形,为0。在6个数量性状中,瓜把长多样性指数最大,为2.037。第一雌花节位多样性指数最小,为1.824。结果表明:各个材料之间的变异系数和多样性指数各不相同,但总体上60份丝瓜的变异程度和多样性较... 

【文章来源】:福建农林大学福建省

【文章页数】:83 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

丝瓜种质资源性状调查及遗传多样性分析


图3-1.60份DNA模板??Fig3-1.60DNA?Template??注:l-60为试验材料,见表2-1??

浓度,亮度,清晰度,反应体


为].75?U、1.5?U、1.25?U、].0U、0.75?U、0.5?U、0.25?U。由图?3-2?可知,在??25?pL的反应体系中,Taq酶浓度在0.25?U、0.5?U、0.75?U、1.0?U时,扩增条带??清晰度差,亮度不高。当浓度达到1.25U时,亮度增加,条带清晰。本着扩增??数量适当、清晰度强、经济性的原则,当Taq酶浓度达到].25?U时反应体系达??到最佳水平。??M?1?2?3?4?5?6?7??::霸??75〇bp??s〇〇bp??:SBBBm??图3-2.不同Taq酶浓度的SRAP-PCR结果??Fig3-2.effect?of?various?Taq?polymerase?concentrations?in?the?SRAP-PCR??注:1-7?为?1.75、1.5、1.25、丨?0、0.75、0.5、0.25(U)?IVI:?DL2000Marker??2.2.2模板DNA浓度对PCR结果的影响??模板DNA浓度对PCR结果有着一定的影响,当模板DNA浓度过高时,比??较容易出现非特异性扩增反应,有的还会导致拖尾,没有PCR条带的现象。模??板DNA浓度过低同样也是不行的,浓度过低则目的产物会过少[6?]。图3-3中能??够发现,当浓度在5?ng、12.5?ng时条带亮度极低,清晰度弱。从图3-3可以看出,??DNA浓度在75?ng时,模板DNA条带亮度强,条带清晰,考虑到试验准确性和??不浪费实验药剂的情况下,浓度为75?ng的DNA最适宜丝瓜25?fxL?SRAP扩增。??22??

浓度,亮度,专业学位


?福建农林大学硕士专业学位论文???M?1?2?3?4?5?6??yi??444??图3-3.不同浓度DMA的SRAP-PCR结果??Fig3-3.effect?of?various?template?DNA?concentrations?in?the?SRAP-PCR??注:1-6?为?5、12.5、25、50、75、100(ng)?M:?DL2000Marker??2.2.3?dN丁P对SRAP-PCR扩増的影响??dNTP影响PCR的扩增结果和效率。在PCR反应过程中,PCR产物的量受到??dNTP浓度影响,dNTP浓度过低会使得PCR产物的量减少,高浓度dNTP就容易引??起错误渗入,不利于实验分析161]。由图3-4可知,dNTP浓度对PCR影响与其他因??素相比相对而言较小,当浓度在0.08mmol/L、0.12mmol/L、0.16mmol/L时,条??带亮度呈上升趋势,当浓度达到0.2?mmol/L时,亮度最为明显且条带清晰,但随??着浓度超过〇.2mmol/L时,由于与Taq酶反应的Mg>转而与dNTP相结合,使得Taq??酶活性有所降低,因而影响PCR反应的结果,甚至会导致条带亮度减弱直到消失。??因此,从各个方面综合考虑,选择浓度为0.2?mmol/L的dNTP作为丝瓜25?|_iL?SRAP??扩增。??M?1?2?3?4?5?6??nip??图3-4.不同dNTP浓度的SRAP-PCR结果??Fig3-4.?effect?of?\?arious?dNTP?concentrations?in?the?SRAP-PCR??注:1-6?为?0.08、0.12、0.16、0.20、0.24、

【参考文献】:
期刊论文
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[4]SCoT分子标记技术在丝瓜上的应用[J]. 蒋雅琴,黎炎,李文嘉,吴永官,王益奎,康德贤.  南方农业学报. 2014(12)
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博士论文
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硕士论文
[1]茄子单性结实基因连锁的SRAP分子标记[D]. 张念.西南大学 2014
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[3]福建22份烤烟种质资源的遗传多样性分析[D]. 朱慧丽.福建农林大学 2009
[4]瓠瓜EST-SSR、SRAP、ISSR和RAPD反应体系的建立及其纯度鉴定应用的研究[D]. 刘成平.华中农业大学 2008
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[6]中国南瓜种质资源遗传多样性研究[D]. 褚盼盼.华中农业大学 2007
[7]黄瓜品质性状的AFLP和SCAR标记研究[D]. 张凤青.西南大学 2007
[8]黄瓜单性结实和种质资源遗传多样性的ISSR分析[D]. 王佳.扬州大学 2007



本文编号:3065324

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