羊肚菌菌种退化机理研究

发布时间：2021-03-18 18:25

　　对羊肚菌菌种退化机理进行初步研究。通过对正常羊肚菌菌种进行数次转接得到退化羊肚菌材料,将正常菌丝和退化菌丝分别用特定的染色试剂处理,观察菌丝清除活性氧的能力、线粒体膜电位高低变化和线粒体形态变化,从而探究菌种退化出现的原因。转接后的羊肚菌发生明显退化,正常菌丝经氯化硝基四氮唑蓝（nitro blue tetrazolium,NBT）染色后,在光学显微镜下呈现淡蓝紫色,退化菌丝在一段时间后形成蓝紫色物质;正常菌丝经荧光染料线粒体红色荧光探针（Mito-Tracker Red CMXRos）染色后,在荧光显微镜下呈现红色荧光,而退化菌丝仅有微弱的红色荧光;经过荧光染料线粒体绿色荧光探针（Mito-Tracker Green）染色后的正常菌丝里有明显的线粒体亮斑,退化菌丝的线粒体则没有。试验初步明确羊肚菌菌丝退化的机理,为羊肚菌菌丝退化研究提供理论依据。 

【文章来源】：食品研究与开发. 2020,41(10)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

羊肚菌第一代到第十五代部分菌丝生长状态

羊肚菌NBT染色结果见图2。为了检验菌丝清除活性氧的能力，参考Lara-Ortiz等[16]所描述的NBT法对羊肚菌Mor 10和Mor 7正常菌种及退化菌种菌丝内活性氧（reactive oxygen species,ROS）进行定性测定，在显微镜下，用40倍镜观察染色后的玻片；结果显示，正常菌丝经NBT还原后仅仅出现颜色较淡的蓝紫色，而退化菌丝经NBT还原后呈现出明显的蓝紫色物质，说明了退化菌种清除活性氧的能力降低，正常菌种清除活性氧的能力大于退化菌种。

为了比较Mor 10和Mor 7正常菌种及退化菌种细胞内线粒体膜电位的差异，根据Mito-Tracker Red CMXRos显现红色荧光的激发波长为579 nm，发射波长为599 nm，选择荧光滤光块转盘上的绿色荧光滤光块，比例尺代表100μm。经过线粒体膜电位依赖性荧光染料Mito-Tracker Red CMXRos对菌种Mor 10和Mor 7的菌丝染色后，将制作好的玻片放置在荧光倒置显微镜下观察，发现这两种菌种的正常菌丝均能显示出荧光，而退化菌丝内则观察不到明显的荧光，该试验结果表明，正常菌种线粒体膜电位高于退化菌种。图3 羊肚菌线粒体膜电位染色结果

【参考文献】：
期刊论文
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[3]城固县羊肚菌产业发展的优势及挑战[J]. 薛亚红,杨哲.  现代农业科技. 2018(19)
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博士论文
[1]双孢蘑菇基质降解能力退化分子机理的初步研究[D]. 陈美元.福建农林大学 2011

硕士论文
[1]细胞器响应比率荧光探针的生物成像研究及非天然唾液酸的合成[D]. 赵虎.厦门大学 2017
[2]线粒体分裂调控因子drp-1对于线虫寿命的调节功能研究[D]. 周永方.杭州师范大学 2016



本文编号：3088727