蜡梅的杂交F1代真实性鉴定及遗传多样性分析
发布时间：2021-03-21 14:09
蜡梅（Chimonanthus praecox L.）是中国古老而特有的植物物种蜡梅科的成员。它花开冬季,是含有药用化合物的观赏花木。在长期的栽培过程中,不同蜡梅品种之间形态差异分化较大,如花色、花型、花香等方面。构建杂交群体有利于今后解析这些观赏性状的形成机制。本实验选取了蜡梅株系H29和H64互为父母本做杂交。以H29为母本,得到了72个后代。以H64为母本的杂交组合没有得到后代,说明蜡梅不同品种之间的结实率存在着显著差异。其后代的真实性尚未鉴定。筛选并利用SSR标记对72个后代进行真实性鉴定,发现引物Cp-33在亲本中产生的条带类型为aa×bb型,其真子代的条带类型为ab型,依据这一标准,发现在72个子代中仅有30个是真杂种,真杂种率仅为41.67%,其它可能都是自交种。这一结果与蜡梅的传粉方式有关。遗传群体构建中,子代鉴定非常重要,决定着基因定位的准确性和真实性,因此在蜡梅的遗传学分析中,子代鉴定应是必不可少的一个步骤。在多样性分析中,48对SSR引物中的10对引物（Cp-9,Cp-18,Cp-23,Cp-26,Cp-30,Cp-33,Cp-38,Cp-41和Cp-44）在父母...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
LIST OF ABBREVIATIONS
INTRODUCTION
1.1 Identification of Crossing Progenies
1.2 Genetic Diversity
1.3 Importance of Molecular Marker
1.4 Different Molecular Markers
1.4.1 Inter-simple sequences repeat （ISSR）
1.4.2 Single nucleotide polymorphism （SNP）
1.4.3 RFLP （Restriction fragment length polymorphism）
1.4.4 RAPD （random amplified polymorphic DNA）
1.4.5 AFLP （Amplified fragment length polymorphism）
1.4.6 Simple sequence repeats （SSR）
1.4.6.1 Uses of SSR Molecular Markers
1.4.6.2 Preference of SSR Molecular Markers
1.4.7 SSR Markers in Identification of Crossing Progenies
1.5 Application of Molecular Marker Techniques in the Study of Wintersweet
1.6 Objectives of the Study
MATERIAL AND METHODS
2.1 Experimental Material
2.2 Parental （H64 and H29） Crossing
2.2.1 Planning for Pollination
2.2.2 Making the Cross
2.2.3 Seeds Harvesting
2.2.4 Seedling Production
2.3 DNA Extraction
2.4 Amount of Extracted Genetic Materials
2.5 Primers Selection
2.6 Protocol for Polymerase Chain Reaction （PCR）
2.7 Poly-Acrylamide Gel Electrophoresis （PAGE） and Silver Staining
2.8 Polymorphism Information Content （PIC） and Genetic Diversity
RESULTS
3.1 The outcome of out-crossing
3.2 Polymorphism of SSR Molecular markers
3.3 Gel Analyzer 2010
3.3.1 Primer Cp-23
3.3.2 Primer Cp-30
3.3.3 Primer Cp-33
3.3.4 Primer Cp-38
3.3.5 Primer Cp-41
3.4 Identification of the Potential hybrids
3.5 Polymorphism Information Content （PIC） and Genetic Diversity Analysis
DISCUSSION
4.1 The cross combination
4.2 Identification of hybrids
4.3 SSRs Primers Polymorphism
4.4 Polymorphism information Content （PIC）
4.5 Genetic Diversity indices Nie’s （H） and Shannon information index （i）
CONCLUSION
REFERENCES
ACKNOWLEDGEMENT
【参考文献】：
期刊论文
[1]‘荸荠’ב东魁’杨梅杂交群体构建与SSR杂种鉴定[J]. 汪国云,沈禹彤,贾慧敏,焦云,柴春燕,包劲松,孙德利,贾惠娟,高中山. 果树学报. 2015(04)
[2]蜡梅天然群体遗传多样性的SRAP标记分析[J]. 左丹丹,赵海涛,刘春,穆鼎,王晓武,明军. 园艺学报. 2009(08)
[3]素心蜡梅和红心蜡梅鲜花挥发油成分分析[J]. 李正国,刘明春,邓伟,王心宇,王国民,杨迎伍. 精细化工. 2008(10)
[4]苹果属观赏海棠品种花粉形态及分类研究[J]. 李晓磊,沈向,孙凡雅,束怀瑞,郭翎,曹颖. 园艺学报. 2008(08)
[5]新西兰花卉产业——特别关注蜡梅的引进和商品化（英文）[J]. 冯锦泉. 北京林业大学学报. 2007(S1)
[6]蜡梅栽培现状及资源保护和利用[J]. 程红梅,周耘峰,詹双侯. 北京林业大学学报. 2007(S1)
[7]蜡梅传粉生物学研究[J]. 周莉花,郝日明,吴建忠. 园艺学报. 2006(02)
[8]蜡梅品种的数量分类和主成分分析[J]. 赵凯歌,虞江晋芳,陈龙清. 北京林业大学学报. 2004(S1)
[9]蜡梅品种分类体系探讨[J]. 陈龙清,赵凯歌,周明芹. 北京林业大学学报. 2004(S1)
[10]利用RAPD分析蜡梅自然居群的遗传变异[J]. 陈龙清,陈俊愉,郑用琏,鲁涤非. 北京林业大学学报. 1999(02)
本文编号：3092999
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
LIST OF ABBREVIATIONS
INTRODUCTION
1.1 Identification of Crossing Progenies
1.2 Genetic Diversity
1.3 Importance of Molecular Marker
1.4 Different Molecular Markers
1.4.1 Inter-simple sequences repeat （ISSR）
1.4.2 Single nucleotide polymorphism （SNP）
1.4.3 RFLP （Restriction fragment length polymorphism）
1.4.4 RAPD （random amplified polymorphic DNA）
1.4.5 AFLP （Amplified fragment length polymorphism）
1.4.6 Simple sequence repeats （SSR）
1.4.6.1 Uses of SSR Molecular Markers
1.4.6.2 Preference of SSR Molecular Markers
1.4.7 SSR Markers in Identification of Crossing Progenies
1.5 Application of Molecular Marker Techniques in the Study of Wintersweet
1.6 Objectives of the Study
MATERIAL AND METHODS
2.1 Experimental Material
2.2 Parental （H64 and H29） Crossing
2.2.1 Planning for Pollination
2.2.2 Making the Cross
2.2.3 Seeds Harvesting
2.2.4 Seedling Production
2.3 DNA Extraction
2.4 Amount of Extracted Genetic Materials
2.5 Primers Selection
2.6 Protocol for Polymerase Chain Reaction （PCR）
2.7 Poly-Acrylamide Gel Electrophoresis （PAGE） and Silver Staining
2.8 Polymorphism Information Content （PIC） and Genetic Diversity
RESULTS
3.1 The outcome of out-crossing
3.2 Polymorphism of SSR Molecular markers
3.3 Gel Analyzer 2010
3.3.1 Primer Cp-23
3.3.2 Primer Cp-30
3.3.3 Primer Cp-33
3.3.4 Primer Cp-38
3.3.5 Primer Cp-41
3.4 Identification of the Potential hybrids
3.5 Polymorphism Information Content （PIC） and Genetic Diversity Analysis
DISCUSSION
4.1 The cross combination
4.2 Identification of hybrids
4.3 SSRs Primers Polymorphism
4.4 Polymorphism information Content （PIC）
4.5 Genetic Diversity indices Nie’s （H） and Shannon information index （i）
CONCLUSION
REFERENCES
ACKNOWLEDGEMENT
【参考文献】：
期刊论文
[1]‘荸荠’ב东魁’杨梅杂交群体构建与SSR杂种鉴定[J]. 汪国云,沈禹彤,贾慧敏,焦云,柴春燕,包劲松,孙德利,贾惠娟,高中山. 果树学报. 2015(04)
[2]蜡梅天然群体遗传多样性的SRAP标记分析[J]. 左丹丹,赵海涛,刘春,穆鼎,王晓武,明军. 园艺学报. 2009(08)
[3]素心蜡梅和红心蜡梅鲜花挥发油成分分析[J]. 李正国,刘明春,邓伟,王心宇,王国民,杨迎伍. 精细化工. 2008(10)
[4]苹果属观赏海棠品种花粉形态及分类研究[J]. 李晓磊,沈向,孙凡雅,束怀瑞,郭翎,曹颖. 园艺学报. 2008(08)
[5]新西兰花卉产业——特别关注蜡梅的引进和商品化（英文）[J]. 冯锦泉. 北京林业大学学报. 2007(S1)
[6]蜡梅栽培现状及资源保护和利用[J]. 程红梅,周耘峰,詹双侯. 北京林业大学学报. 2007(S1)
[7]蜡梅传粉生物学研究[J]. 周莉花,郝日明,吴建忠. 园艺学报. 2006(02)
[8]蜡梅品种的数量分类和主成分分析[J]. 赵凯歌,虞江晋芳,陈龙清. 北京林业大学学报. 2004(S1)
[9]蜡梅品种分类体系探讨[J]. 陈龙清,赵凯歌,周明芹. 北京林业大学学报. 2004(S1)
[10]利用RAPD分析蜡梅自然居群的遗传变异[J]. 陈龙清,陈俊愉,郑用琏,鲁涤非. 北京林业大学学报. 1999(02)
本文编号：3092999
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