玫瑰花香相关基因RrDXR和RrAAT超表达载体构建及遗传转化研究
发布时间：2021-04-15 05:44
玫瑰（Rosa rugosa Thunb.）是传统的精油用花卉,玫瑰精油的主要成分为香茅醇、香叶醇等单萜醇及其乙酸酯类衍生物乙酸香茅酯、乙酸香叶酯等。我们前期研究发现,脱氧木酮糖5-磷酸还原异构酶（RrDXR）和Alcohol acyl transferase醇类乙酰基转移酶（RrAAT）基因是玫瑰单萜类花香成分生物合成途径中的关键基因。本研究构建了这两个基因的超表达载体、建立了矮牵牛再生体系和遗传转化体系,并尝试通过农杆菌介导法转入矮牵牛,以验证其功能,主要研究结果如下：1、以‘唐红’玫瑰盛开期花瓣为试材,利用CTAB法提取其总RNA,获取目的基因后成功构建了pCAMBIA1304-DXR和pCAMBIA1304-AAT超表达载体,并导入农杆菌EHA105保存备用,为目的基因转化矮牵牛进一步验证其功能奠定了基础。2、试验通过MS培养基直接播种无菌种子的方法繁殖矮牵牛’EAGLE’无菌材料。通过使用不同的灭菌方法添加不同浓度的激素组合,筛选出诱导矮牵牛愈伤组织产生分化以及生根的最佳灭菌方法和培养基,建立了矮牵牛的再生体系。实验表明,最佳灭菌方法为采用75%的酒精消毒,种子发芽率最高为9...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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【参考文献】：
期刊论文
[1]玫瑰叶片直接再生及其影响因素[J]. 邢文,包颖,丁萌,傅小鹏,包满珠,宁国贵. 华中农业大学学报. 2014(01)
[2]玫瑰自然香气成分及含量变化分析[J]. 虞伊林,王秋云,姚雷. 上海交通大学学报(农业科学版). 2012(02)
[3]花香代谢与调控研究进展[J]. 孔滢,孙明,潘会堂,张启翔. 北京林业大学学报. 2012(02)
[4]阳春砂DXR超表达提高转基因烟草DXR活性及光合色素含量[J]. 刘卉,杨锦芬,詹若挺,魏洁书,朱焕秋,陈蔚文. 广州中医药大学学报. 2012(01)
[5]花香的生物合成、调控及基因工程研究进展[J]. 樊荣辉,黄敏玲,钟淮钦,吴建设,叶秀仙. 中国细胞生物学学报. 2011(09)
[6]植物花香代谢调节与基因工程研究进展[J]. 赵印泉,周斯建,彭培好,潘会堂,张启翔. 热带亚热带植物学报. 2011(04)
[7]玫瑰精油的开发利用[J]. 滕祥金,郝再彬,孟滕. 北方园艺. 2011(07)
[8]不同基因型矮牵牛高频再生体系建立的研究[J]. 吕晋慧,王玄,王媛,杨明霞. 山西农业大学学报(自然科学版). 2011(02)
[9]植物萜类合成酶及其代谢调控的研究进展[J]. 岳跃冲,范燕萍. 园艺学报. 2011(02)
[10]几种玫瑰的园林特性及开发价值[J]. 李玉舒. 北京农业职业学院学报. 2010(06)
硕士论文
[1]百合苯甲酸甲酯代谢相关LiBSMT基因的克隆与分析[D]. 王欢.北京林业大学 2015
[2]夜来香生物钟及花香基因的克隆[D]. 吕恃衡.福建农林大学 2013
[3]玫瑰单萜代谢相关基因RrDXS和RrLIS的克隆与表达分析[D]. 李婷琳.扬州大学 2013
[4]玫瑰花香成分生物合成相关基因的克隆与表达分析[D]. 陈陈.扬州大学 2012
[5]玫瑰活体香气和花水成分及含量变化研究[D]. 虞伊林.上海交通大学 2012
[6]中国水仙（Narcissus tazetta L.var.chinensis Roem）花香相关基因DXPS、DXR和PAL的克隆[D]. 马传营.福建农林大学 2010
[7]玫瑰微体快繁技术体系的建立[D]. 卢绪娟.山东农业大学 2007
[8]玫瑰精油后产物的综合利用研究[D]. 杜鹃.新疆农业大学 2006
本文编号：3138755
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１?乂（左）和公桃（右）的ＰＣ民产物凝胶电泳检测??Ｍ：?Ｍａｒｋｅｒ?ＤＬ?２０００?Ａ：?的ＰＣ民产物?Ｄ：公尤欠的ＰＣ民产物??
２．２重组质粒的酶切验证及测序分析??对构建好的重组质粒进行（ｐＣＡＭＢＩＡ１３０４－Ｚｉ邱：化化ＩＩ／化／Ｉ?；?ＰＣＡＭＢＩＡ１３０４－乂??公Ｓ化ＩＩＷｃｏＩ）双酶切，同时双酶切ＰＣＡＭＢＩＡ１３０４作为阴性对照，电泳检测结果如图２－１、??２－２所示。图２－１结果显示Ａ１－Ａ６均切出一条约ＨＯＯｂｐ的条带，阴性对照Ｎ则显示一条长??约ｌＯＯＯＯｂｐ的条带；图２－２结果显示Ｄ１－Ｄ６均切出一条约１５００ｂｐ的条带，阴性对照Ｎ同??样显示一条长约ｌ〇〇（Ｋ）ｂｐ的条带，由此初步证明，心ｒ与。进？均己成功插入表达载体??ｐＣＡＭＢＩＡ１３０４。??Ｍｌ?Ｎ?ＡＩ?Ａ２?Ａ３?Ａ４?ＡＳ?Ａ６?Ｍ２??蠢帛皆??：？〇ｈｐ?一?禱尋??看、；．達麵??图２－１重组质粒ｐＣＡＭＢＩＡ１３０４－兑的双酶切结果??Ｍ１?：?Ｍａｒｋｅｒ?ＤＬ?２０００?Ｍ２：Ｍａｒｋｅｒ?ＤＬ?１５０００?Ｎ：?ｎｅｇａｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?Ａ１－Ａ６：双酶切结果??Ｆｉｇ．２－１?Ｔｈｅ?ｄｏｕｂｌｅ?ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ?ｏｆ?化ｅ?ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ?ｐｌａｓｍｉｄ?ｐＣＡＭ目ＩＡ１３０４－．心ｒ??Ｍｌ；?Ｍａｒｋｅｒ?ＤＬ?２０００?Ｍ２：Ｍａｒｋｅｒ?ＤＬ?１５０００?Ｎ：?ｎｅｇａｔｉｖｅ?ｃｏｎｔｒｏｌ?Ａ１－Ａ６：?Ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔ?ｏｆ?ｄｏｕｂｌｅ?ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ??雨?一??ｅ
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【参考文献】：
期刊论文
[1]玫瑰叶片直接再生及其影响因素[J]. 邢文,包颖,丁萌,傅小鹏,包满珠,宁国贵. 华中农业大学学报. 2014(01)
[2]玫瑰自然香气成分及含量变化分析[J]. 虞伊林,王秋云,姚雷. 上海交通大学学报(农业科学版). 2012(02)
[3]花香代谢与调控研究进展[J]. 孔滢,孙明,潘会堂,张启翔. 北京林业大学学报. 2012(02)
[4]阳春砂DXR超表达提高转基因烟草DXR活性及光合色素含量[J]. 刘卉,杨锦芬,詹若挺,魏洁书,朱焕秋,陈蔚文. 广州中医药大学学报. 2012(01)
[5]花香的生物合成、调控及基因工程研究进展[J]. 樊荣辉,黄敏玲,钟淮钦,吴建设,叶秀仙. 中国细胞生物学学报. 2011(09)
[6]植物花香代谢调节与基因工程研究进展[J]. 赵印泉,周斯建,彭培好,潘会堂,张启翔. 热带亚热带植物学报. 2011(04)
[7]玫瑰精油的开发利用[J]. 滕祥金,郝再彬,孟滕. 北方园艺. 2011(07)
[8]不同基因型矮牵牛高频再生体系建立的研究[J]. 吕晋慧,王玄,王媛,杨明霞. 山西农业大学学报(自然科学版). 2011(02)
[9]植物萜类合成酶及其代谢调控的研究进展[J]. 岳跃冲,范燕萍. 园艺学报. 2011(02)
[10]几种玫瑰的园林特性及开发价值[J]. 李玉舒. 北京农业职业学院学报. 2010(06)
硕士论文
[1]百合苯甲酸甲酯代谢相关LiBSMT基因的克隆与分析[D]. 王欢.北京林业大学 2015
[2]夜来香生物钟及花香基因的克隆[D]. 吕恃衡.福建农林大学 2013
[3]玫瑰单萜代谢相关基因RrDXS和RrLIS的克隆与表达分析[D]. 李婷琳.扬州大学 2013
[4]玫瑰花香成分生物合成相关基因的克隆与表达分析[D]. 陈陈.扬州大学 2012
[5]玫瑰活体香气和花水成分及含量变化研究[D]. 虞伊林.上海交通大学 2012
[6]中国水仙（Narcissus tazetta L.var.chinensis Roem）花香相关基因DXPS、DXR和PAL的克隆[D]. 马传营.福建农林大学 2010
[7]玫瑰微体快繁技术体系的建立[D]. 卢绪娟.山东农业大学 2007
[8]玫瑰精油后产物的综合利用研究[D]. 杜鹃.新疆农业大学 2006
本文编号：3138755
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