建兰花叶病毒广东分离物分子特征与侵染性克隆构建

发布时间：2021-04-16 15:53

　　兰花（Cymbidium spp.）清幽脱俗极具观赏价值和收藏价值,近年来,随着社会的进步,兰花越来越受到人们的重视,同时,兰花也是是广东顺德等地的高效创汇产业。但是,病毒病严重危害着兰花产业的发展。兰花病毒病可造成兰花花叶、坏死以及花朵变色和畸形,严重影响其品质,其中建兰花叶病毒（Cymbidium mosaic virus,CymMV）是造成兰花经济损失的主要病毒之一。本研究获得了三个建兰花叶病毒分离物,分别标记为Cym MV-GDFS1、Cym MV-GDFS2、Cym MV-GDFS3。三个分离物基因组全长序列分别由6227、6222、6224个碱基组成,各包含5个开放阅读框,分别为4254bp的RdRp、702bp的TGB1、339bp的TGB2、276bp的TGB3、以及672bp的CP基因。对这三个分离物的的全基因组核苷酸序列相似性进行分析,结果表明CymMV-GDFS1与Cym MV-GDFS2相似性最低为98.1%,Cym MV-GDFS2与CymMV-GDFS3相似性为98.5%,CymMV-GDFS1与Cym MV-GDFS3相似性最高为99.3%。与已报导的其它... 

【文章来源】：华南农业大学广东省

【文章页数】：86 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

质粒pCAMBIA-CymMV的构建示意图

样品有目的条带并且都是采集自佛山的样品，后续实验就以这三个样品为实别标为 CymMV-GDFS1、CymMV-GDFS2、CymMV-GDFS3。分别用引物 CYⅠ-R，CYⅡ-F/CYⅡ-R 对这 3 份提取的总 RNA 进行 RT-PCR 扩增。扩增产物在脂糖凝胶上电泳后，可以分别观察到 2381 bp 和 4039 bp 的目的条带如图 2 所

大肠杆菌 JM109。重组质粒分别进行 RCR 及双酶切鉴定。内切酶 KpnⅠ和 BamHⅠ分别酶切 pMD19T -Ⅰ，内切酶 SacⅠ和 BamHⅠ分别酶切 pMD19T -Ⅱ，双酶切电泳后可以分别观察到目的条带如图3所示，3A中分别得到了2300 bp的目的条带与2700 bp

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3141725