番茄灰霉侵染后番茄根内放线菌的差异研究及Dactylosporangium solaniradic的鉴定

发布时间：2021-04-27 09:08

　　植物在整个生长过程中常常会将许多营养物质分配至根部,因此吸引了大量微生物的聚集。这些微生物对植物的健康存在着很大影响,与宿主植物协同进化,并且建立了具有选择性互生的复杂和谐的微生态关系,其菌落结构与丰度的变化是植物是否健康的明显征兆。内生放线菌作为植物微生态系统中的天然组成部分,可通过自身的一些代谢产物或者借助相关的信号转导作用对植物生长产生影响。所以,研究番茄的不同生理状态与其内生放线菌的多样性和丰度的关系以及用内生放线菌防治番茄灰霉病具有重要的现实意义。本研究样品选用相同番茄品种的灰霉菌侵染株和与其相邻的健康株的根部,采用植物表面消毒法、研磨法、稀释涂布平板法和分离纯化培养法,通过形态学和分子生物学分类初步分析它们根内可培养放线菌的多样性;采用平板对峙培养法分离、筛选对番茄灰霉病菌有抑制活性的内生放线菌,通过平板生长抑制法研究包括番茄灰霉病菌在内的11种病原真菌拮抗内生放线菌的广谱活性;对分离自病株番茄根部的菌株NEAU-FJL2进行多相分类学鉴定。主要结论如下:（1）本研究通过对相同番茄品种的灰霉菌侵染株和与其相邻的健康株的根内放线菌的研究得到结论为:健康株根内的放线菌群落单一而... 

【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

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摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 番茄灰霉病的危害
    1.2 番茄灰霉病的综合防治
        1.2.1 农业防治
        1.2.2 化学防治
        1.2.3 生物防治
    1.3 植物内生放线菌在农业上的应用
        1.3.1 在植物病害防治中的应用
        1.3.2 在虫害防治中的应用
        1.3.3 在其它有害生物中的防治应用
        1.3.4 其它生物活性
    1.4 病虫害侵袭植物与植物根招募微生物
        1.4.1 病原菌侵染植物与根招募微生物
        1.4.2 虫害侵袭植物与根招募微生物
    1.5 研究的目的意义及内容
        1.5.1 目的和意义
        1.5.2 研究的内容
    1.6 课题来源
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 番茄样品
        2.1.2 供试靶标菌
        2.1.3 PCR引物
    2.2 主要试剂与仪器
        2.2.1 试剂
        2.2.2 仪器
    2.3 主要培养基和配制方法
        2.3.1 分离培养基
        2.3.2 纯化培养基
        2.3.3 液体培养基
        2.3.4 发酵培养基
        2.3.5 生测培养基
        2.3.6 生理生化测试培养基
        2.3.7 形态观察培养基
    2.4 方法
        2.4.1 采样及处理
        2.4.2 番茄根部内生放线菌的分离与纯化
        2.4.3 菌种保藏及命名
    2.5 番茄内生放线菌多样性初探
        2.5.1 形态学分类
        2.5.2 分子生物学分类
    2.6 放线菌的抑菌活性测试
        2.6.1 拮抗菌皿内初筛
        2.6.2 灰霉菌侵染的病株与健康株活性菌数量比较
        2.6.3 发酵产物抑菌作用
    2.7 菌株NEAU-FJL2多相分类鉴定
        2.7.1 形态和培养特征观察
        2.7.2 生理生化特性测试
        2.7.3 化学分类鉴定
        2.7.4 分子水平鉴定
3 结果与分析
    3.1 番茄内生放线菌多样性的初探结果
        3.1.1 放线菌在不同样品上的分布情况
        3.1.2 放线菌相对丰度分析
    3.2 抑菌活性检测
        3.2.1 拮抗菌皿内初筛结果
        3.2.2 灰霉菌侵染的病株与健康株活性菌数量比较
        3.2.3 发酵产物活性
    3.3 菌株NEAU-FJL2的鉴定结果
        3.3.1 16S rRNA序列分析及比对结果
        3.3.2 系统发育树构建分析
        3.3.3 形态观察
        3.3.4 培养特征
        3.3.5 生理生化特性
        3.3.6 化学分类特征
        3.3.7 （G+C） mol%结果
        3.3.8 DNA同源性分析结果
4 讨论
5 结论
    5.1 本研究主要结论
    5.2 本研究的主要创新点
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]6种杀菌剂对设施番茄灰霉病的防治效果[J]. 贾利元,田伟,刘新社.  河南农业科学. 2012(09)
[2]青藏高原土壤放线菌的分离及其对番茄灰霉病菌的抑制活性[J]. 张国强,张宁,韩立荣,王永宏,冯俊涛,张兴.  西北农业学报. 2012(06)
[3]1000亿活芽孢/克枯草芽孢杆菌可湿性粉剂防治番茄灰霉病药效试验[J]. 刘晓刚,闫东林,苏聪莉,陆小成.  上海蔬菜. 2012(03)
[4]番茄灰霉病菌拮抗放线菌的筛选、鉴定及其活性评价[J]. 徐大勇,李志栋,李峰,徐顶泉,吴旺丽.  中国生物防治学报. 2012(02)
[5]微生物菌种保藏方法概述[J]. 梁宁利.  农产品加工(学刊). 2012(04)
[6]5种木霉对番茄灰霉病拮抗作用的测定[J]. 胡启国.  吉林农业. 2012(04)
[7]保护地番茄主要病害综合防治技术初探[J]. 董金荣,王玉楼,吉同銮,孔兵.  安徽农学通报(下半月刊). 2011(16)
[8]防治灰霉病药剂的开发进展[J]. 韩君,范怀峰,王海娜,刘峰.  农药研究与应用. 2011(03)
[9]啶酰菌胺和咯菌腈对番茄灰霉病菌不同菌株的毒力(初报)[J]. 赵建江,韩秀英,张小风,马志强,王文桥,陈治芳,李赛飞.  河北农业科学. 2010(08)
[10]啶菌噁唑对番茄灰霉病菌的抑菌作用研究[J]. 陈凤平,韩平,张真真,刘君丽,刘西莉.  农药学学报. 2010(01)

博士论文
[1]大豆根部内生放线菌的筛选、鉴定及其活性代谢产物研究[D]. 刘重喜.东北农业大学 2013

硕士论文
[1]几种农作物内生放线菌的分离及新种鉴定[D]. 赵军伟.东北农业大学 2013
[2]农作物内生放线菌的筛选及新属鉴定[D]. 贾飞宇.东北农业大学 2013
[3]红树植物内生放线菌的分离与小单孢菌科新种鉴定[D]. 李蕾.海南大学 2013
[4]番茄灰霉病拮抗菌株的选育、基因改造及其发酵液大棚试验研究[D]. 韩文霞.西北大学 2010



本文编号：3163190