不同耐性番茄在低磷胁迫下的生理应答及相关miRNA的表达分析

发布时间：2021-05-11 01:38

　　作为植物生长发育所必需的大量营养元素,土壤中磷主要是以植物不能吸收利用的固定态和有机态存在,因此低磷胁迫是植物常见的一种逆境胁迫。番茄（Lycopersicon esculentum Mill.）的品种繁多且产量高,是我国主要蔬菜之一还具有营养丰富和市场性好的特点。缺少磷元素会使其植株矮小,发育不良,严重影响番茄产量及品质。microRNA （miRNA）作为新型的调控靶基因表达的小分子RNA，在低磷的信号转导和磷平衡中发挥重要作用。已有研究发现植物在低磷胁迫反应中有多种miRNA参与。同时磷饥饿下植株可溶性糖含量变化也是植物响应低磷胁迫的重要代谢途径。为明确具有不同磷耐性的番茄是否因为碳水化合物活动的代谢以及相关miRNA表达的一些改变而启动根系对磷饥饿的响应机制,本研究利用两个番茄品系9号（耐低磷型）和30号（磷敏感型）进行低磷胁迫处理,比较不同部位碳水化合物含量及其关键酶活性的变化,并利用实时定量RT-PCR技术分析蔗糖转运蛋白SUT及miRNA在番茄不同部位中的表达,通过探讨番茄中应对低磷胁迫反应所相关的SUT和miRNA的作用和分子机制,对培养土壤磷高效作物新品系奠定理论基础... 

【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 土壤及植物中磷元素的重要性
        1.1.1 土壤中的磷
        1.1.2 植物中磷的吸收
    1.2 植物碳水化合物代谢
        1.2.1 碳水化合物及代谢关键的酶类
        1.2.2 低磷胁迫下糖的信号作用
    1.3 miRNA概况
    1.4 植物对低磷胁迫的响应机制
        1.4.1 形态学机制
        1.4.2 低磷胁迫下miRNA所参与的调控
        1.4.3 miRNA与其靶基因的调控
    1.5 本研究目的意义
2 材料与方法
    2.1 实验材料
    2.2 材料培养与处理
    2.3 干鲜重、株高、根长测定
    2.4 磷含量测定
    2.5 碳水化合物的测定
    2.6 酶活性测定
    2.7 RNA提取、cDNA合成及实时定量PCR
        2.7.1 总RNA提取
        2.7.2 cDNA合成(正常反转录)
        2.7.3 miRNA的反转录
        2.7.4 miRNA的qPCR检测
        2.7.5 SUT的实时定量PCR技术检测
    2.8 数据处理
3 结果与分析
    3.1 植株生长及磷含量
    3.2 碳水化合物含量
    3.3 蔗糖代谢关键酶
    3.4 蔗糖转运蛋白的表达
    3.5 低磷胁迫下番茄中相关miRNA的表达分析
        3.5.1 番茄中与低磷胁迫相关的miRNA
        3.5.2 番茄中低磷响应miRNA靶基因的验证
        3.5.3 番茄中低磷响应miRNA与其靶基因间的相关性
4 讨论
    4.1 低磷胁迫对番茄生长发育的影响
    4.2 碳水化合物代谢在番茄响应低磷胁迫的变化
    4.3 低磷胁迫对番茄中糖代谢相关酶的影响
    4.4 低磷胁迫对番茄中蔗糖转运蛋白的影响
    4.5 低磷胁迫对番茄中miRNA的影响
    4.6 低磷胁迫下根形态、糖转运与miRNA之间的关系
5 结论与展望
    5.1 主要结论
    5.2 展望
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表的文章



本文编号：3180463