大白菜与根肿菌互作相关蛋白的挖掘
发布时间：2021-05-21 15:18
植物与病原物互作能够引起以水杨酸（salicylic acid, SA）、茉莉酸（jasmonic acid,JA）和乙烯（ethylene, ET）介导的防卫反应。本研究利用双向电泳（two-dimensional gel electrophoresis,2-DE）技术对根肿菌侵染的大白菜根系进行了差异表达蛋白分析。试图找到与防卫反应有关的信号途径中相关蛋白,为揭示大白菜抗根肿病作用机制提供线索,主要研究结果如下：1.用新鲜的根肿菌侵染大白菜根系,通过显微压片观察技术,在侵染第5天时观察到绝大多数孢子进入根毛侵染期,所以将根肿菌接种第5天定为侵染初期。2.通过对蛋白上样量及根系用量优化试验,进行大白菜根系蛋白双向电泳时,最佳蛋白上样量为1000gg,采用Trizol沉淀法提取蛋白,幼苗根系用量不得少于1.5g。3.通过对根肿菌侵染和未接菌的大白菜根系蛋白进行2-DE凝胶电泳,并经PDQuest8.0.1软分析,得到重复凝胶图上的蛋白点均达400多个。找出蛋白质丰度差异变化在2倍以上差异蛋白点共有48个,选取其中的19个差异点,进行质谱鉴定,鉴定成功的差异蛋白点共有18个,它们的Pro...
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
1 文献综述
1.1 根肿菌及根肿病的概述
1.1.1 根肿菌分类地位及生活史
1.1.2 根肿菌发病条件及生活史
1.1.3 根肿菌的生理小种
1.2 大白菜抗根肿病遗传规律及抗病基因的研究进展
1.2.1 大白菜抗根肿病遗传规律的研究
1.2.2 大白菜抗根肿病基因的研究进展
1.3 植物防卫反应研究进展
1.3.1 植物-病原物互作的防卫反应中相关基因的研究进展
1.3.2 大白菜-根肿病互作的防卫反应相关研究进展
1.4 双向电泳在植物中的应用
1.4.1 生物胁迫
1.4.2 非生物胁迫
1.4.3 蛋白质组学在抗病分子机制研究中的应用
1.5 研究的目的和意义
2 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 试材
2.1.2 根肿菌来源
2.2 方法
2.2.1 配制根肿菌休眠孢子悬浮液的方法
2.2.2 水培苗的获得
2.2.3 接菌与观察
2.2.4 取样与制备蛋白质样品
2.2.5 双向电泳(2-DE)
2.2.6 质谱鉴定
2.2.7 生物信息学分析
3 结果与分析
3.1 侵染初期的确定
3.2 上样量对2-DE图谱的影响
3.3 大白菜侵染初期根系最佳用量的优化
3.4 分析2-DE图谱及差异蛋白点
3.5 质谱鉴定
3.6 生物信息学分析
3.6.1 Gene Ontology(GO)分析
3.6.2 KEGG分析
3.7 几个防卫基因的功能预测
3.7.1 差异点3414的功能预测
3.7.2 差异点3038的功能预测
3.7.3 差异点2358的功能预测
3.7.4 差异点4043的功能预测
3.7.5 差异点3129的功能预测
4 讨论
4.1 水培接菌及侵染初期的确定
4.2 根肿菌与防卫信号传导途径
4.2.1 水杨酸介导的防卫反应相关蛋白分析
4.2.2 茉莉酸和乙烯介导的防卫反应相关蛋白分析
结论
参考文献
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于根肿菌早期侵染量的白菜抗性分析[J]. 朱红丽,肖崇刚,陈国康,马冠华,青玲. 植物保护学报. 2015(04)
[2]土壤pH值与十字花科作物根肿病相互关系研究[J]. 黄蓉,黄瑞荣,胡建坤,华菊玲,闵跃中. 江西农业大学学报. 2015(01)
[3]大白菜根系蛋白质双向电泳体系优化[J]. 赵玲玲,毕青,周雪,冀瑞琴,冯辉. 分子植物育种. 2015(01)
[4]十字花科白菜根肿病菌在不同温度、pH值条件下致病性差异研究[J]. 杨明英,杨子林,马桂明,裴卫华,曹继芬,杨佩文,毕云青,林兴华,周丽凤,李向东. 西南农业学报. 2014(04)
[5]油菜根肿病发病条件初探[J]. 胡琼,郑东影,汪春,范洪亮,宋炜,檀根甲. 江西农业大学学报. 2014(04)
[6]云南和西藏十字花科蔬菜根肿病菌生理小种鉴定[J]. 刘峰,张丽辉,姬广海. 中国蔬菜. 2013(20)
[7]我国8省市十字花科蔬菜根肿病菌生理小种的鉴定[J]. 丁云花,简元才,余阳俊,汪维红,耿丽华,康俊根. 中国蔬菜. 2013(16)
[8]湖北省长阳县十字花科蔬菜根肿病菌生理小种鉴定及抗源筛选[J]. 汪维红,余阳俊,丁云花,张凤兰,于拴仓,张德双,赵岫云,卢桂香. 中国蔬菜. 2013(12)
[9]油菜根肿病病原主要生理小种和品种抗病性鉴定[J]. 季海雯,任莉,陈坤荣,徐理,刘凡,孙超超,李俊,刘胜毅,方小平. 中国油料作物学报. 2013(03)
[10]大白菜抗根肿病CRb基因紧密连锁标记的开发与定位[J]. 陈慧慧,张腾,梁珊,陈兵,张椿雨,朴钟云. 中国农业科学. 2012(17)
博士论文
[1]低温胁迫下野牛草生理生化响应及蛋白质组学研究[D]. 康俊梅.中国农业科学院 2008
硕士论文
[1]大白菜根响应根肿菌侵染的基因表达研究[D]. 谭翀.云南农业大学 2014
[2]大白菜根肿病抗性基因分子标记与定位[D]. 薛银鸽.郑州大学 2014
[3]白菜类作物抗根病种质资源遗传多样性分析及分子标记辅助选择[D]. 董森森.郑州大学 2014
[4]大白菜抗霜霉病防御信号途径中相关基因的表达分析[D]. 高婷婷.扬州大学 2013
[5]芸薹根肿菌生活史研究I[D]. 罗红春.西南大学 2013
[6]番茄叶色黄化突变体差异蛋白研究及分析[D]. 徐磊.东北农业大学 2012
本文编号：3199938
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
1 文献综述
1.1 根肿菌及根肿病的概述
1.1.1 根肿菌分类地位及生活史
1.1.2 根肿菌发病条件及生活史
1.1.3 根肿菌的生理小种
1.2 大白菜抗根肿病遗传规律及抗病基因的研究进展
1.2.1 大白菜抗根肿病遗传规律的研究
1.2.2 大白菜抗根肿病基因的研究进展
1.3 植物防卫反应研究进展
1.3.1 植物-病原物互作的防卫反应中相关基因的研究进展
1.3.2 大白菜-根肿病互作的防卫反应相关研究进展
1.4 双向电泳在植物中的应用
1.4.1 生物胁迫
1.4.2 非生物胁迫
1.4.3 蛋白质组学在抗病分子机制研究中的应用
1.5 研究的目的和意义
2 材料与方法
2.1 材料
2.1.1 试材
2.1.2 根肿菌来源
2.2 方法
2.2.1 配制根肿菌休眠孢子悬浮液的方法
2.2.2 水培苗的获得
2.2.3 接菌与观察
2.2.4 取样与制备蛋白质样品
2.2.5 双向电泳(2-DE)
2.2.6 质谱鉴定
2.2.7 生物信息学分析
3 结果与分析
3.1 侵染初期的确定
3.2 上样量对2-DE图谱的影响
3.3 大白菜侵染初期根系最佳用量的优化
3.4 分析2-DE图谱及差异蛋白点
3.5 质谱鉴定
3.6 生物信息学分析
3.6.1 Gene Ontology(GO)分析
3.6.2 KEGG分析
3.7 几个防卫基因的功能预测
3.7.1 差异点3414的功能预测
3.7.2 差异点3038的功能预测
3.7.3 差异点2358的功能预测
3.7.4 差异点4043的功能预测
3.7.5 差异点3129的功能预测
4 讨论
4.1 水培接菌及侵染初期的确定
4.2 根肿菌与防卫信号传导途径
4.2.1 水杨酸介导的防卫反应相关蛋白分析
4.2.2 茉莉酸和乙烯介导的防卫反应相关蛋白分析
结论
参考文献
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于根肿菌早期侵染量的白菜抗性分析[J]. 朱红丽,肖崇刚,陈国康,马冠华,青玲. 植物保护学报. 2015(04)
[2]土壤pH值与十字花科作物根肿病相互关系研究[J]. 黄蓉,黄瑞荣,胡建坤,华菊玲,闵跃中. 江西农业大学学报. 2015(01)
[3]大白菜根系蛋白质双向电泳体系优化[J]. 赵玲玲,毕青,周雪,冀瑞琴,冯辉. 分子植物育种. 2015(01)
[4]十字花科白菜根肿病菌在不同温度、pH值条件下致病性差异研究[J]. 杨明英,杨子林,马桂明,裴卫华,曹继芬,杨佩文,毕云青,林兴华,周丽凤,李向东. 西南农业学报. 2014(04)
[5]油菜根肿病发病条件初探[J]. 胡琼,郑东影,汪春,范洪亮,宋炜,檀根甲. 江西农业大学学报. 2014(04)
[6]云南和西藏十字花科蔬菜根肿病菌生理小种鉴定[J]. 刘峰,张丽辉,姬广海. 中国蔬菜. 2013(20)
[7]我国8省市十字花科蔬菜根肿病菌生理小种的鉴定[J]. 丁云花,简元才,余阳俊,汪维红,耿丽华,康俊根. 中国蔬菜. 2013(16)
[8]湖北省长阳县十字花科蔬菜根肿病菌生理小种鉴定及抗源筛选[J]. 汪维红,余阳俊,丁云花,张凤兰,于拴仓,张德双,赵岫云,卢桂香. 中国蔬菜. 2013(12)
[9]油菜根肿病病原主要生理小种和品种抗病性鉴定[J]. 季海雯,任莉,陈坤荣,徐理,刘凡,孙超超,李俊,刘胜毅,方小平. 中国油料作物学报. 2013(03)
[10]大白菜抗根肿病CRb基因紧密连锁标记的开发与定位[J]. 陈慧慧,张腾,梁珊,陈兵,张椿雨,朴钟云. 中国农业科学. 2012(17)
博士论文
[1]低温胁迫下野牛草生理生化响应及蛋白质组学研究[D]. 康俊梅.中国农业科学院 2008
硕士论文
[1]大白菜根响应根肿菌侵染的基因表达研究[D]. 谭翀.云南农业大学 2014
[2]大白菜根肿病抗性基因分子标记与定位[D]. 薛银鸽.郑州大学 2014
[3]白菜类作物抗根病种质资源遗传多样性分析及分子标记辅助选择[D]. 董森森.郑州大学 2014
[4]大白菜抗霜霉病防御信号途径中相关基因的表达分析[D]. 高婷婷.扬州大学 2013
[5]芸薹根肿菌生活史研究I[D]. 罗红春.西南大学 2013
[6]番茄叶色黄化突变体差异蛋白研究及分析[D]. 徐磊.东北农业大学 2012
本文编号：3199938
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