中国樱桃AP2/ERF转录因子在花芽休眠解除过程的表达与作用研究
发布时间：2021-06-21 19:41
中国樱桃（Prunus pseurdocerasus）是蔷薇科（Rosaceae）李亚科（Prunoideae）李属（Prunus）的落叶乔木果树,因其果实味道鲜美,营养丰富等特点,深受广大消费者的喜爱;又因其果实成熟期早,成为我国重要的经济栽培果树之一。中国樱桃与其它落叶果树一样,都存在典型的自然休眠现象,而花芽的休眠与休眠解除则与开花率、座果率有着复杂而密切的联系,最终影响果实的产量和品质。目前认为足够的低温积累是诱导中国樱桃花芽休眠解除的关键因素之一,低温积累不足则会影响花芽休眠及休眠解除,因此开展低温积累诱导花芽休眠解除分子机制有重要意义。AP2/ERF是一类植物中普遍存在的转录因子,广泛参与植物的生长发育,具有响应低温等功能。本研究从’短柄’樱桃花芽转录组文库（Genbank accession SRX695147）中筛选了具有完整ORF的AP2/ERF类基因,分析了其生物信息学特征;利用实时定量PCR技术（Real-timePCR）分析所有基因在低温诱导花芽休眠解除过程中的表达特性,筛选了一个与休眠解除相关基因的AP2/ERF转录因子,命名为PpcERFI,利用农杆菌介导法...
【文章来源】：浙江师范大学浙江省
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．１中国楼桃ＥＲＦ保守基序??Ｆｉｇ．?１．１?Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?ｍｏｔｉｆｓ?ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ?ｆｒｏｍ?ＥＲＦ?ｏｆ?Ｃｈｉｎｅｓｅ?ｃｈｅｒｒｙ?ｕｓｉｎｇ?ＭＥＭＥ??
１）°Ｃ处理和常温２２（±１）／１５?（士?１°０处理，处理时间设置为９６ｈ，?１９２ｈ，?２８８??ｈ，?３８４ｈ，４８０?ｈ，５７６ｈ和６７２?ｈ，采用ｑＰＣＲ技术对２１个／＾五ｍ在冷积累过??程中的表达模式进行研究分析（图２．２）。??４?■??Ｉ?３．４６?１４??Ｈ?０?Ｖ，，?°－７°?＼〇＾＾〇?＾４３??０?９６ｈ?１９２ｈ?２８８ｈ?３８４ｈ?４８０ｈ?５７６ｈ?６７２ｈ?０?９６ｈ?１９２ｈ?２８８ｈ?３８４ｈ?４８０ｈ?５７６ｈ?６７２ｈ??ＫＴ３６９５３３?时间／Ｔｉｍｅ?时间?ｍｍｅ??ＫＩ?Ｊ〇ｙ５Ｊ５??２??２??ｃ??５?１?？５３?．?＿?＃崳?Ｓｔ?，＾００?■??ｉｊ?１０６?ｉ??０?－?一?—?—?－??????０??：???０?９６ｈ?１９２ｈ?２８８ｈ?３８４ｈ?４８０ｈ?５７６ｂ?６７２ｈ?０?９６ｈ?１９２ｈ?２８８ｈ?３８４ｈ?４８０ｈ?５７６ｈ?６７２ｈ??ＫＴ３６９５３６时一?奶麵?时间＾??２６??
野生型拟南芥和超表达作基因拟南芥种子均播种于１／２?ＭＳ培养基??上，待种子萌发成幼苗后，转移到灭过菌的营养土上，种植于光周期为１６ｈ／８ｈ、??温度周期为２５?（±１）?°Ｃ／２０?（±１）?°Ｃ、湿度为７５％的拟南芥专用人工气候培养??箱。??冻存于－８０°Ｃ超低温冰箱中的中国樱桃休眠花芽用于总ＲＮＡ提取。??用作瞬时表达实验材料的烟草－本氏烟草，种植在??光暗周期为１６ｈ／８ｈ、温度周期为２５?（±１）?－Ｃ／２０?（±１）。〇、湿度为７５％的人??工气候培养箱内，至长出５－７片叶片，选取长势一致、生长优良的植株用于后续??试验。??２．１．２供菌体及载体??大肠杆囷（ｆ．ｃｏｆ／）?ＤＨ５ａ购于ＴＡＫＡＲＡ公司；根瘤农杆菌??／ｗｍＷｆｌｄｅｆｉｓ）?ＧＶ３１０１；?ｐＧｒｅｅｎｎ〇８００－ＬＵＣ?载体（３８９４ｂｐ）由浙江大学徐昌杰教??授馈赠（图１）。??／Ｓｔｅａｌ??Ｓ？ｃ）ｌ??
【参考文献】：
期刊论文
[1]药用植物转录因子AP2/ERF研究与展望[J]. 季爱加,罗红梅,徐志超,张鑫,宋经元,陈士林. 科学通报. 2015(14)
[2]组织特异性启动子在作物基因工程中的研究进展[J]. 贺红霞,陈亮,林春晶,柳青. 中国农学通报. 2014(09)
[3]A Proximal Promoter Region of Arabidopsis DREB2C Confers Tissue-specific Expression under Heat Stress[J]. Jihyun Je,Chieun Song,Jung Eun Hwang,Chae Oh Lim. Journal of Integrative Plant Biology. 2012(09)
[4]植物AP2/ERF类转录因子研究进展[J]. 张计育,王庆菊,郭忠仁. 遗传. 2012(07)
[5]棉花中ERF亚族转录因子抗逆育种潜力的研究进展[J]. 单国芳,刘坤,张朝军,刘传亮,武芝侠,李付广. 中国农学通报. 2012(12)
[6]光周期对油桃叶芽休眠诱导期抗氰呼吸的影响[J]. 李冬梅,谭秋平,张海森,高东升,于芹. 应用与环境生物学报. 2010(06)
[7]植物基因启动子的克隆及其功能研究进展[J]. 聂丽娜,夏兰琴,徐兆师,高东尧,李琳,于卓,陈明,李连城,马有志. 植物遗传资源学报. 2008(03)
[8]ERF类转录因子的结构与功能[J]. 葛宝宇,林轶,侯和胜. 安徽农学通报. 2007(20)
[9]Arabidopsis RAV1 is down-regulated by brassinosteroid and may act as a negative regulator during plant development[J]. Yu Xin HU~*, Yong Hong WANG~*, Xin Fang LIU, Jia Yang LI~(**) Institute of Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China.. Cell Research. 2004(01)
[10]影响落叶果树芽休眠的因素[J]. 李宪利,袁志友,高东升. 山东农业大学学报(自然科学版). 2001(03)
博士论文
[1]MYB-bHLH-WD40对杨梅花青苷生物合成的转录调控机制[D]. 刘晓芬.浙江大学 2013
硕士论文
[1]中国樱桃PpcERF基因克隆与功能研究[D]. 张弘.浙江师范大学 2015
本文编号：3241288
【文章来源】：浙江师范大学浙江省
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．１中国楼桃ＥＲＦ保守基序??Ｆｉｇ．?１．１?Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?ｍｏｔｉｆｓ?ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ?ｆｒｏｍ?ＥＲＦ?ｏｆ?Ｃｈｉｎｅｓｅ?ｃｈｅｒｒｙ?ｕｓｉｎｇ?ＭＥＭＥ??
１）°Ｃ处理和常温２２（±１）／１５?（士?１°０处理，处理时间设置为９６ｈ，?１９２ｈ，?２８８??ｈ，?３８４ｈ，４８０?ｈ，５７６ｈ和６７２?ｈ，采用ｑＰＣＲ技术对２１个／＾五ｍ在冷积累过??程中的表达模式进行研究分析（图２．２）。??４?■??Ｉ?３．４６?１４??Ｈ?０?Ｖ，，?°－７°?＼〇＾＾〇?＾４３??０?９６ｈ?１９２ｈ?２８８ｈ?３８４ｈ?４８０ｈ?５７６ｈ?６７２ｈ?０?９６ｈ?１９２ｈ?２８８ｈ?３８４ｈ?４８０ｈ?５７６ｈ?６７２ｈ??ＫＴ３６９５３３?时间／Ｔｉｍｅ?时间?ｍｍｅ??ＫＩ?Ｊ〇ｙ５Ｊ５??２??２??ｃ??５?１?？５３?．?＿?＃崳?Ｓｔ?，＾００?■??ｉｊ?１０６?ｉ??０?－?一?—?—?－??????０??：???０?９６ｈ?１９２ｈ?２８８ｈ?３８４ｈ?４８０ｈ?５７６ｂ?６７２ｈ?０?９６ｈ?１９２ｈ?２８８ｈ?３８４ｈ?４８０ｈ?５７６ｈ?６７２ｈ??ＫＴ３６９５３６时一?奶麵?时间＾??２６??
野生型拟南芥和超表达作基因拟南芥种子均播种于１／２?ＭＳ培养基??上，待种子萌发成幼苗后，转移到灭过菌的营养土上，种植于光周期为１６ｈ／８ｈ、??温度周期为２５?（±１）?°Ｃ／２０?（±１）?°Ｃ、湿度为７５％的拟南芥专用人工气候培养??箱。??冻存于－８０°Ｃ超低温冰箱中的中国樱桃休眠花芽用于总ＲＮＡ提取。??用作瞬时表达实验材料的烟草－本氏烟草，种植在??光暗周期为１６ｈ／８ｈ、温度周期为２５?（±１）?－Ｃ／２０?（±１）。〇、湿度为７５％的人??工气候培养箱内，至长出５－７片叶片，选取长势一致、生长优良的植株用于后续??试验。??２．１．２供菌体及载体??大肠杆囷（ｆ．ｃｏｆ／）?ＤＨ５ａ购于ＴＡＫＡＲＡ公司；根瘤农杆菌??／ｗｍＷｆｌｄｅｆｉｓ）?ＧＶ３１０１；?ｐＧｒｅｅｎｎ〇８００－ＬＵＣ?载体（３８９４ｂｐ）由浙江大学徐昌杰教??授馈赠（图１）。??／Ｓｔｅａｌ??Ｓ？ｃ）ｌ??
【参考文献】：
期刊论文
[1]药用植物转录因子AP2/ERF研究与展望[J]. 季爱加,罗红梅,徐志超,张鑫,宋经元,陈士林. 科学通报. 2015(14)
[2]组织特异性启动子在作物基因工程中的研究进展[J]. 贺红霞,陈亮,林春晶,柳青. 中国农学通报. 2014(09)
[3]A Proximal Promoter Region of Arabidopsis DREB2C Confers Tissue-specific Expression under Heat Stress[J]. Jihyun Je,Chieun Song,Jung Eun Hwang,Chae Oh Lim. Journal of Integrative Plant Biology. 2012(09)
[4]植物AP2/ERF类转录因子研究进展[J]. 张计育,王庆菊,郭忠仁. 遗传. 2012(07)
[5]棉花中ERF亚族转录因子抗逆育种潜力的研究进展[J]. 单国芳,刘坤,张朝军,刘传亮,武芝侠,李付广. 中国农学通报. 2012(12)
[6]光周期对油桃叶芽休眠诱导期抗氰呼吸的影响[J]. 李冬梅,谭秋平,张海森,高东升,于芹. 应用与环境生物学报. 2010(06)
[7]植物基因启动子的克隆及其功能研究进展[J]. 聂丽娜,夏兰琴,徐兆师,高东尧,李琳,于卓,陈明,李连城,马有志. 植物遗传资源学报. 2008(03)
[8]ERF类转录因子的结构与功能[J]. 葛宝宇,林轶,侯和胜. 安徽农学通报. 2007(20)
[9]Arabidopsis RAV1 is down-regulated by brassinosteroid and may act as a negative regulator during plant development[J]. Yu Xin HU~*, Yong Hong WANG~*, Xin Fang LIU, Jia Yang LI~(**) Institute of Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China.. Cell Research. 2004(01)
[10]影响落叶果树芽休眠的因素[J]. 李宪利,袁志友,高东升. 山东农业大学学报(自然科学版). 2001(03)
博士论文
[1]MYB-bHLH-WD40对杨梅花青苷生物合成的转录调控机制[D]. 刘晓芬.浙江大学 2013
硕士论文
[1]中国樱桃PpcERF基因克隆与功能研究[D]. 张弘.浙江师范大学 2015
本文编号：3241288
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