番茄褪绿病毒的分子鉴定及荧光定量PCR检测体系的建立与应用
发布时间：2021-07-04 13:20
番茄褪绿病毒（Tomato chlorosis virus,ToCV）作为危害番茄生产的重要病毒。研究快速、高效的识别及检测该病毒的方法,有助于及时发现病毒并采取相应预防措施,从而减少其造成的经济损失。本研究通过RT-PCR对天津市、河北省番茄产区的番茄及周边寄主ToCV发生情况及ToCV与番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV）复合侵染情况进行检测鉴定,并建立了ToCV SYBR Green I实时荧光定量PCR快速检测方法,并对番茄不同品种、不同发病时期及不同发病部位的病毒含量进行了初步定量。主要结果如下:（1）对天津市、河北省的番茄产区采集的319份番茄样品和55份杂草样品进行ToCV检测。其中番茄样品ToCV检出率为16.0%,杂草上未检测到该病毒。获得的分离物序列（GenBank登录号KP219722/KP226698、KP217199/KP217201、KP217196/KP217197、KP217195/KP217202、KP217200/KP217198）与中国、日本和美国的分离物都聚类在同一个组上。（2）对感染ToCV...
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
ToCV病毒粒子的电子显微镜照片（Orílioetal.,2014）
山东农业大学硕士学位论文 et al., 2014; kil et al., 2015）等众多国家和地区均有 ToCV 的分在台湾地区报道该病毒病的发生（Tsai et al., 2004），随后在北京北省、天津市、河南省等地区的番茄植株上检测到 ToCV（Zhao ., 2013; Zhao et al., 2014; 高利利 等, 2015; 吴淑华, 2016），并且增的趋势（图 1-3）。
ToCV 与番茄侵染性褪绿病毒（Tomato infectious chlorosis virus, TICV）在症状表十分相似，很难区分，需要通过鉴别寄主进行甄别（Hanssen et al., 2010），此外，以通过分子探针进行区别。其典型症状还与“缺素症”导致的褪绿黄化类似。感病发病初期，下部老叶开始发病，叶片脉间褪绿黄化，叶脉颜色不变仍保持绿色，叶厚变脆易折断；发病中期，植株由下至上蔓延，叶片由叶缘向内逐渐干枯坏死；发期，整个植株变黄，迅速衰老死亡，果实膨大受到限制，果实商品性能受到严重影茄褪绿病毒病会给番茄植株生长带来毁灭性的灾害，造成严重的经济损失（图 1-外，在我国已经有 ToCV 和 TYLCV 复合侵染的相关报道。发生复合侵染的植株部条上叶片边缘褪绿黄化、叶片皱缩卷曲及增厚等典型 TYLCV 症状，枝条顶梢症状；而有的枝条叶片则脉间均匀褪绿黄化，叶片增厚变脆易折，严重时出现坏死斑等 ToCV 症状。感病植株后期还会出现叶片均向上纵卷的现象（赵黎明 等, 2014）（5）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]江苏省番茄黄化曲叶病毒和褪绿病毒复合侵染的分子检测[J]. 吴淑华,李廷芳,赵文浩,程兆榜,郭青云,赵统敏,余文贵,朱叶芹,季英华. 园艺学报. 2016(01)
[2]天津地区番茄褪绿病毒的分子检测和鉴定[J]. 高利利,孙国珍,王勇,高苇,张春祥,张安胜,竺晓平. 华北农学报. 2015(03)
[3]番茄褪绿病毒与番茄黄化曲叶病毒复合侵染的分子鉴定[J]. 赵黎明,李刚,刘永光,国家进,魏家鹏,竺晓平. 中国蔬菜. 2014(12)
[4]番茄褪绿病毒在山东暴发及其防治措施[J]. 刘永光,魏家鹏,乔宁,李美芹,刘晓明,竺晓平. 中国蔬菜. 2014(05)
[5]环介导恒温扩增技术在植物病原物检测中的应用[J]. 秦文韬,王忠跃,张昊. 中国农业科技导报. 2013(03)
[6]烟粉虱是一个物种复合体[J]. 刘树生. 中国生物防治学报. 2012(04)
[7]逆转录环介导等温扩增技术检测花生条纹病毒[J]. 谢宏峰,迟玉成,许曼琳,樊堂群,张建建,吴菊香,许婷婷. 植物病理学报. 2011(06)
[8]番茄黄化曲叶病毒研究进展[J]. 李廷刚,李长松. 中国农学通报. 2011(02)
[9]山东省局部地区番茄黄化曲叶病毒的分子鉴定[J]. 褚栋,侯丽霞,刘国霞,高长生,Judith K Brown. 山东农业科学. 2010(02)
[10]山东省番茄黄化曲叶病毒病的发生及其防治[J]. 孙作文,杨进绪,张美珍,李向东. 中国蔬菜. 2009(21)
博士论文
[1]我国烟粉虱生物型、遗传分化及对常用杀虫剂的抗性机理研究[D]. 饶琼.华中农业大学 2010
硕士论文
[1]番茄斑萎病毒实时荧光定量PCR快速检测方法的建立[D]. 习凤妮.中南大学 2013
[2]北方三省番茄黄化曲叶病毒的检测鉴定及变异分析[D]. 刘文浩.山东农业大学 2012
本文编号：3264862
【文章来源】：山东农业大学山东省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
ToCV病毒粒子的电子显微镜照片（Orílioetal.,2014）
山东农业大学硕士学位论文 et al., 2014; kil et al., 2015）等众多国家和地区均有 ToCV 的分在台湾地区报道该病毒病的发生（Tsai et al., 2004），随后在北京北省、天津市、河南省等地区的番茄植株上检测到 ToCV（Zhao ., 2013; Zhao et al., 2014; 高利利 等, 2015; 吴淑华, 2016），并且增的趋势（图 1-3）。
ToCV 与番茄侵染性褪绿病毒（Tomato infectious chlorosis virus, TICV）在症状表十分相似，很难区分，需要通过鉴别寄主进行甄别（Hanssen et al., 2010），此外，以通过分子探针进行区别。其典型症状还与“缺素症”导致的褪绿黄化类似。感病发病初期，下部老叶开始发病，叶片脉间褪绿黄化，叶脉颜色不变仍保持绿色，叶厚变脆易折断；发病中期，植株由下至上蔓延，叶片由叶缘向内逐渐干枯坏死；发期，整个植株变黄，迅速衰老死亡，果实膨大受到限制，果实商品性能受到严重影茄褪绿病毒病会给番茄植株生长带来毁灭性的灾害，造成严重的经济损失（图 1-外，在我国已经有 ToCV 和 TYLCV 复合侵染的相关报道。发生复合侵染的植株部条上叶片边缘褪绿黄化、叶片皱缩卷曲及增厚等典型 TYLCV 症状，枝条顶梢症状；而有的枝条叶片则脉间均匀褪绿黄化，叶片增厚变脆易折，严重时出现坏死斑等 ToCV 症状。感病植株后期还会出现叶片均向上纵卷的现象（赵黎明 等, 2014）（5）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]江苏省番茄黄化曲叶病毒和褪绿病毒复合侵染的分子检测[J]. 吴淑华,李廷芳,赵文浩,程兆榜,郭青云,赵统敏,余文贵,朱叶芹,季英华. 园艺学报. 2016(01)
[2]天津地区番茄褪绿病毒的分子检测和鉴定[J]. 高利利,孙国珍,王勇,高苇,张春祥,张安胜,竺晓平. 华北农学报. 2015(03)
[3]番茄褪绿病毒与番茄黄化曲叶病毒复合侵染的分子鉴定[J]. 赵黎明,李刚,刘永光,国家进,魏家鹏,竺晓平. 中国蔬菜. 2014(12)
[4]番茄褪绿病毒在山东暴发及其防治措施[J]. 刘永光,魏家鹏,乔宁,李美芹,刘晓明,竺晓平. 中国蔬菜. 2014(05)
[5]环介导恒温扩增技术在植物病原物检测中的应用[J]. 秦文韬,王忠跃,张昊. 中国农业科技导报. 2013(03)
[6]烟粉虱是一个物种复合体[J]. 刘树生. 中国生物防治学报. 2012(04)
[7]逆转录环介导等温扩增技术检测花生条纹病毒[J]. 谢宏峰,迟玉成,许曼琳,樊堂群,张建建,吴菊香,许婷婷. 植物病理学报. 2011(06)
[8]番茄黄化曲叶病毒研究进展[J]. 李廷刚,李长松. 中国农学通报. 2011(02)
[9]山东省局部地区番茄黄化曲叶病毒的分子鉴定[J]. 褚栋,侯丽霞,刘国霞,高长生,Judith K Brown. 山东农业科学. 2010(02)
[10]山东省番茄黄化曲叶病毒病的发生及其防治[J]. 孙作文,杨进绪,张美珍,李向东. 中国蔬菜. 2009(21)
博士论文
[1]我国烟粉虱生物型、遗传分化及对常用杀虫剂的抗性机理研究[D]. 饶琼.华中农业大学 2010
硕士论文
[1]番茄斑萎病毒实时荧光定量PCR快速检测方法的建立[D]. 习凤妮.中南大学 2013
[2]北方三省番茄黄化曲叶病毒的检测鉴定及变异分析[D]. 刘文浩.山东农业大学 2012
本文编号：3264862
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