葡萄ufgt基因克
发布时间：2021-07-10 18:37
花色苷（Anthocyanins）,不仅能够提高植株适应和抵御逆境的能力,而且具有明显的保健功能,是决定红葡萄酒品质和感官质量的重要因素之一。植物体内UFGT是合成花色苷的最后一个关键酶,直接影响花色苷的含量。本试验以赤霞珠（Vitis vinifera L.cv Cabernet Sauvignon）葡萄为试材,在获得ufgt基因全长的基础上,制备多克隆抗体；定期对葡萄植株进行UV-C照射,在转录和翻译水平上研究UV-C照射对ufgt表达和花色苷积累的影响,主要结果如下：扩增葡萄果实ufgt基因全长1371 bp,并构建克隆载体。将克隆载体与表达载体pET-30a进行双酶切,重组得到表达载体pET-ufgt。优化蛋白表达条件,使UFGT蛋白高效表达并纯化,以此为抗原,免疫新西兰白兔,制备UFGT多克隆抗体。以赤霞珠葡萄果实为试材,研究对照和UV-C照射10 min后UFGT对花色苷含量变化规律的影响。采用荧光定量技术分析ufgt基因表达规律,结果表明UV-C照射10 min并未明显诱导ufgt基因的表达,其表达规律与对照大致相同；采用Western-blotting技术,分析UFGT...
【文章来源】：山西农业大学山西省
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图７葡萄果实总ＲＮＡ电泳图??Ｆｉｇ．７?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｆｒｏｍ?ｇｒａｐｅ?ｂｅｒｒｉｅｓ??
■??Ｈ??图７葡萄果实总ＲＮＡ电泳图??Ｆｉｇ．７?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｆｒｏｍ?ｇｒａｐｅ?ｂｅｒｒｉｅｓ??３．２?居ｆ基因的民Ｔ－ＰＣ民扩增??用Ｔａｋａｒａ公司的反转录试剂盒将葡萄果实总民ＮＡ反转录成ｃＤＮＡ，再板进行ＰＣＲ扩增，琼脂糖凝胶检测得到长度约为１５００?ｂｐ的基因片段，与已／ｇｆ编码框基因大致相符。??１?Ｍ??
图９菌液ＰＣ民鉴定目的基因??Ｍ：?ＤＬ２，０００?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；Ｌｉｎｅｌ－２：菌液?ＰＣ民产物??Ｆｉｇ．９?Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?＾ｅ?ｔａｒｇｅｔ?ｇｅｎｅ?ｂｙ?ＰＣ民?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ??Ｍ：?ＤＬ２，０００?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；?Ｌａｎｅ?１－２：化ｅ?化ｉ＊ｇｅｔ?ｇｅｎｅ?ｂｙ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ??挑取单菌落于５ｍｌ?ＬＢ／Ａｍｐ＋液体培养基中３７?°Ｃ培养１２?ｈ，菌液用于ＰＣＲ果如图所示：Ｌａｎｅ?１，２是菌液的ＰＣ民产物，琼脂糖凝胶电泳检测发现均扩增出度约为１５００?ｂｐ的ＤＮＡ片断，与己发表的１（／封编码枢化闪大数相符。??３．３．２?ｙ居／基因测序序列结果和分析??取ＰＣ民鉴定｜｜；娜的曲液１?ｍｌ送华大基因公司测序？，结果如附巧所示－，用ＤＮ将ＮＣＢＩ公布序列Ｉ；；＇测化所得巧巧化行比较，Ｉ?Ｉ的化ｌＡ＇ｉ?ｇ他萄ｙ／知化州ＩＩ］源性％，且开放阅读没化移＜門，ＷＷ化行－Ｋ邮的试验。??３．４ＵＦＧＴ蛋白信息分析??３．４．１?ＵＦＧＴ蛋白一级结构及基本信息??
【参考文献】：
期刊论文
[1]洋葱UFGT基因的克隆和表达分析[J]. 张洪伟,梁毅,刘小义,谭武平. 核农学报. 2015(09)
[2]苹果花色苷研究进展[J]. 刘文. 安徽农业科学. 2015(26)
[3]基于酚类物质的酿酒红葡萄品种特性分析[J]. 张娟,王晓宇,田呈瑞,赵旗峰,马小河,唐晓萍,马婷婷,马锦锦. 中国农业科学. 2015(07)
[4]影响葡萄果皮颜色的MYB类转录因子的研究进展[J]. 江楠,张雷,李春霞,任晨琛,周步海. 中国农学通报. 2014(13)
[5]不同海拔和树冠层次对金冠苹果着色及相关酶活性的影响[J]. 李丽琼,廖明安,阳世莹. 核农学报. 2014(03)
[6]红富士苹果采后1-MCP处理对果皮色素及其相关酶活性的影响[J]. 李秀芳,饶景萍,马秋诗,孙振营,韩叶. 园艺学报. 2014(03)
[7]高等植物花色苷生物合成调控的研究进展[J]. 陈文龙,赵昶灵,支伟特,陈中坚,缪康汝,王文亚,翁晨. 中国农学通报. 2013(33)
[8]环剥和脱落酸处理对‘夏黑’葡萄果实着色及相关基因表达的影响[J]. 任俊鹏,李小红,董瑞奇,宋新新,顾克余,沈月芳,陶建敏. 果树学报. 2013(06)
[9]紫甘薯花色苷研究进展[J]. 汤琳菲,雷艳,汪沛,熊兴耀,胡新喜. 湖南农业科学. 2013(15)
[10]葡萄浆果着色与UFGT和MYBA基因表达量的关系研究[J]. 任国慧,陶然,王晨,孙欣,房经贵. 南京农业大学学报. 2013(04)
博士论文
[1]苹果果皮花色苷代谢及相关基因调控的研究[D]. 王丽辉.中国农业大学 2014
[2]香雪兰UDP-葡萄糖：类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶基因的克隆及其功能鉴定[D]. 隋昕.东北师范大学 2011
[3]中国红色砂梨着色过程及其生理变化的研究[D]. 黄春辉.浙江大学 2008
硕士论文
[1]葡萄果实MybA2基因克隆、原核表达及其表达规律的研究[D]. 郜志栋.山西农业大学 2014
[2]云南‘火把梨’结构基因UFGT及转录因子克隆与分析[D]. 孟富宣.西南林业大学 2014
[3]干旱区红地球葡萄果实色素积累的光响应机制研究[D]. 王枝翠.石河子大学 2013
[4]蓝莓花色苷的提取、纯化、稳定性研究[D]. 石光.大连工业大学 2008
本文编号：3276452
【文章来源】：山西农业大学山西省
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图７葡萄果实总ＲＮＡ电泳图??Ｆｉｇ．７?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｆｒｏｍ?ｇｒａｐｅ?ｂｅｒｒｉｅｓ??
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图９菌液ＰＣ民鉴定目的基因??Ｍ：?ＤＬ２，０００?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；Ｌｉｎｅｌ－２：菌液?ＰＣ民产物??Ｆｉｇ．９?Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?＾ｅ?ｔａｒｇｅｔ?ｇｅｎｅ?ｂｙ?ＰＣ民?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ??Ｍ：?ＤＬ２，０００?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ；?Ｌａｎｅ?１－２：化ｅ?化ｉ＊ｇｅｔ?ｇｅｎｅ?ｂｙ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ??挑取单菌落于５ｍｌ?ＬＢ／Ａｍｐ＋液体培养基中３７?°Ｃ培养１２?ｈ，菌液用于ＰＣＲ果如图所示：Ｌａｎｅ?１，２是菌液的ＰＣ民产物，琼脂糖凝胶电泳检测发现均扩增出度约为１５００?ｂｐ的ＤＮＡ片断，与己发表的１（／封编码枢化闪大数相符。??３．３．２?ｙ居／基因测序序列结果和分析??取ＰＣ民鉴定｜｜；娜的曲液１?ｍｌ送华大基因公司测序？，结果如附巧所示－，用ＤＮ将ＮＣＢＩ公布序列Ｉ；；＇测化所得巧巧化行比较，Ｉ?Ｉ的化ｌＡ＇ｉ?ｇ他萄ｙ／知化州ＩＩ］源性％，且开放阅读没化移＜門，ＷＷ化行－Ｋ邮的试验。??３．４ＵＦＧＴ蛋白信息分析??３．４．１?ＵＦＧＴ蛋白一级结构及基本信息??
【参考文献】：
期刊论文
[1]洋葱UFGT基因的克隆和表达分析[J]. 张洪伟,梁毅,刘小义,谭武平. 核农学报. 2015(09)
[2]苹果花色苷研究进展[J]. 刘文. 安徽农业科学. 2015(26)
[3]基于酚类物质的酿酒红葡萄品种特性分析[J]. 张娟,王晓宇,田呈瑞,赵旗峰,马小河,唐晓萍,马婷婷,马锦锦. 中国农业科学. 2015(07)
[4]影响葡萄果皮颜色的MYB类转录因子的研究进展[J]. 江楠,张雷,李春霞,任晨琛,周步海. 中国农学通报. 2014(13)
[5]不同海拔和树冠层次对金冠苹果着色及相关酶活性的影响[J]. 李丽琼,廖明安,阳世莹. 核农学报. 2014(03)
[6]红富士苹果采后1-MCP处理对果皮色素及其相关酶活性的影响[J]. 李秀芳,饶景萍,马秋诗,孙振营,韩叶. 园艺学报. 2014(03)
[7]高等植物花色苷生物合成调控的研究进展[J]. 陈文龙,赵昶灵,支伟特,陈中坚,缪康汝,王文亚,翁晨. 中国农学通报. 2013(33)
[8]环剥和脱落酸处理对‘夏黑’葡萄果实着色及相关基因表达的影响[J]. 任俊鹏,李小红,董瑞奇,宋新新,顾克余,沈月芳,陶建敏. 果树学报. 2013(06)
[9]紫甘薯花色苷研究进展[J]. 汤琳菲,雷艳,汪沛,熊兴耀,胡新喜. 湖南农业科学. 2013(15)
[10]葡萄浆果着色与UFGT和MYBA基因表达量的关系研究[J]. 任国慧,陶然,王晨,孙欣,房经贵. 南京农业大学学报. 2013(04)
博士论文
[1]苹果果皮花色苷代谢及相关基因调控的研究[D]. 王丽辉.中国农业大学 2014
[2]香雪兰UDP-葡萄糖：类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶基因的克隆及其功能鉴定[D]. 隋昕.东北师范大学 2011
[3]中国红色砂梨着色过程及其生理变化的研究[D]. 黄春辉.浙江大学 2008
硕士论文
[1]葡萄果实MybA2基因克隆、原核表达及其表达规律的研究[D]. 郜志栋.山西农业大学 2014
[2]云南‘火把梨’结构基因UFGT及转录因子克隆与分析[D]. 孟富宣.西南林业大学 2014
[3]干旱区红地球葡萄果实色素积累的光响应机制研究[D]. 王枝翠.石河子大学 2013
[4]蓝莓花色苷的提取、纯化、稳定性研究[D]. 石光.大连工业大学 2008
本文编号：3276452
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