解脂亚罗酵母对苹果采后病害生防效力及诱导苹果抗性相关基因影响的研究

发布时间：2021-07-19 14:54

　　苹果在世界果蔬中占有重要地位且品种多样,其“红富士”品种是我国重要的经济作物,产量巨大。然而,苹果在采后往往会受到环境中各种病菌的侵染而腐烂导致经济损失,其中有两种病菌最为常见:扩展青霉（Penicil li um ex pansum）和灰葡萄孢（Bot ryt is cinerea）。本研究以富士苹果为材料,在20℃的条件下利用解脂亚罗酵母（Yar row ia lipol yt ica）对其采后两种病害进行生物防治,并初步探索了其诱导苹果抗性的生理和分子机制。结果表明:1,用不同浓度的Y.lipol yt ica来处理苹果都能显著抑制由P.expansum及B.cine rea引起的发病率,减小苹果采后腐烂直径,其中最适宜浓度为1×108cells/mL。Y.lipol yt ica处理常温储藏下的苹果也能降低其采后病害发病率,且不影响果实的贮藏品质。2,测定Y.lipolyt ica处理苹果后其组织中的几种抗性相关酶:过氧化物酶（PO D）,多酚氧化酶（PPO）,苯丙氨酸解氨酶（PAL）和几丁质酶（C HI）的酶活结果表明,这四种酶活性均有提高,说明抗性相关酶在苹果果实抗病过程中... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 苹果产业状况及采后腐烂情况
        1.1.1 苹果产业状况
        1.1.2 苹果主要采后病害
    1.2 控制苹果采后病害的主要防治方法
        1.2.1 化学杀菌剂
        1.2.2 物理防治技术
        1.2.3 生物防治
        1.2.4 诱导宿主抗性
    1.3 基于果蔬采后抗性表达的组学机制的研究
        1.3.1 蛋白质组学技术在果蔬抗性表达中的研究进展
        1.3.2 转录组学技术在果蔬抗性表达中的研究进展
    1.4 本课题研究的目的、意义及内容
第二章 解脂亚罗酵母抑制苹果采后病害生防效果的研究
    2.1 引言
    2.2 材料和方法
        2.2.1 主要仪器
        2.2.2 水果
        2.2.3 拮抗酵母
        2.2.4 病原菌
        2.2.5 Y.lipolytica抑制苹果采后两种霉菌的生防效力
        2.2.6 Y.lipolytica在苹果果实伤口处的生长动态
        2.2.7 Y.lipolytica酵母对苹果自然储藏品质的影响
        2.2.8 数据统计与分析
    2.3 结果与分析
        2.3.1 Y.lipolytica抑制苹果采后两种霉菌的生防效力
        2.3.2 Y.lipolytica在苹果果实伤口处的生长动态
        2.3.3 Y.lipolytica酵母对苹果贮藏品质的影响
    2.4 讨论
第三章 解脂亚罗酵母处理对苹果果实抗病性生理机制的研究
    3.1 引言
    3.2 材料和方法
        3.2.1 主要仪器
        3.2.2 水果
        3.2.3 拮抗酵母
        3.2.4 Y.lipolytica对苹果诱导抗性生理机制的影响
    3.3 结果与分析
        3.3.1 Y.lipolytica对苹果多酚氧化酶活性的影响
        3.3.2 Y.lipolytica对苹果过氧化物酶活性的影响
        3.3.3 Y.lipolytica对苹果几丁质酶活性的影响
        3.3.4 Y.lipolytica对苹果苯丙氨酸解氨酶活性的影响
    3.4 讨论
第四章 解脂亚罗酵母对苹果果实组织抗性蛋白质组学的研究
    4.1 引言
    4.2 材料和方法
        4.2.1 主要仪器及化学试剂
        4.2.2 拮抗酵母
        4.2.3 果实处理
        4.2.4 果实总蛋白提取
        4.2.5 双向电泳操作方法
        4.2.6 凝胶图谱分析
        4.2.7 质谱实验操作流程
        4.2.8 蛋白鉴定
    4.3 结果与分析
        4.3.1 苹果果实蛋白质双向电泳图
        4.3.2 Y.lipolytic酵母诱导苹果果实蛋白差异点质谱鉴定结果
        4.3.3 差异蛋白的GO分类
        4.3.4 差异蛋白质的功能分类及动态分析
    4.4 讨论
第五章 解脂亚罗酵母对苹果果实转录组的影响及生物信息学的分析
    5.1 引言
    5.2 材料和方法
        5.2.1 主要仪器
        5.2.2 水果
        5.2.3 拮抗酵母
        5.2.4 苹果果实组织样品制备
    5.3 果实伤口组织中总RN A的提取
    5.4 苹果转录组测序及分析
        5.4.1 测序流程
        5.4.2 文库的构建
        5.4.3 生物信息分析流程
    5.5 结果与分析
        5.5.1 转录组测序结果
        5.5.2 Y.lipolytica诱导苹果果实差异表达基因分析
        5.5.3 DEGs的GO和K EGG分类
    5.6 讨论
第六章 RT-QPCR的验证
    6.1 材料与试剂
        6.1.1 材料
        6.1.2 主要试剂
        6.1.3 主要仪器设备
        6.1.4 引物设计
    6.2 实验方法
        6.2.1 cDN A的合成
        6.2.2 RT-qPCR
    6.3 RT-qPCR结果分析
第七章 总结与展望
    7.1 主要结论
    7.2 展望
参考文献
致谢
硕士期间学术研究成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]采后果实病程相关蛋白研究进展[J]. 薛耀碧,周雅涵,邓丽莉,曾凯芳.  食品工业科技. 2015(06)
[2]短波紫外线照射对苹果采后灰霉病抗性诱导作用[J]. 张晓晓,周会玲,田蓉,周晓婉,樊胜.  食品科学. 2015(02)
[3]蛋白质组学在果实成熟衰老机理方面的研究进展[J]. 李欣,毕阳,王军节,龚迪.  食品科学. 2014(07)
[4]灰葡萄孢菌致病机理研究进展[J]. 赵红霞,苟萍.  生物技术. 2014(01)
[5]PR10的结构、信号转导以及功能的研究进展[J]. 杨瑞瑞,易小娅,曾幼玲.  中国农学通报. 2014(04)
[6]组学技术及其在食品科学中应用的研究进展[J]. 王龑,许文涛,赵维薇,郝俊冉,黄昆仑.  生物技术通报. 2011(11)
[7]山药中多酚氧化酶活性的测定及其护色研究[J]. 杜德红,陈勇,肖军霞.  安徽农业科学. 2011(27)
[8]低温处理对小麦几丁质酶活性的影响[J]. 徐恩静,闫小燕,王志学,周志良.  安徽农业科学. 2011(22)
[9]热处理结合β-氨基丁酸对苹果采后青霉病的控制[J]. 李永才,尹燕,陈松江,毕阳,申晓晶,吴岳华.  食品科学. 2011(06)
[10]基于双向电泳技术的植物差异蛋白质组学研究进展[J]. 任丽萍,范海延,宋铁锋,王珊珊,刘晶瑜.  中国农学通报. 2011(05)

博士论文
[1]海洋拮抗酵母Rhodosporidium paludigenum对柑橘果实抗性的增强效应及其生物学机理研究[D]. 路来风.浙江大学 2015

硕士论文
[1]酵母菌对柑橘采后病害的生物防治及防治机理的研究[D]. 彭景贤.福建农林大学 2006
[2]采后热处理对苹果贮藏品质的影响以及贮期主要病害的控制[D]. 赵艺泽.南京农业大学 2005



本文编号：3290901