黄龙病菌对寄主植物淀粉代谢相关酶的影响及检测技术研究
发布时间：2021-07-24 16:32
柑橘黄龙病（Citrus Huanglongbing,简称HLB）是由候选韧皮部杆菌（Candidatus Liberibacter spp.）所引起的一种柑橘生产上的毁灭性病。随着全球柑橘产业的发展,在亚洲、非洲、美洲等柑橘主产区均有该病发生,几乎危害柑橘属的所有栽培品种,严重影响了柑橘产业的健康发展。淀粉代谢异常是黄龙病菌感染柑橘后出现的最主要现象,柑橘染病后,在叶和茎中出现明显的淀粉累积。本研究以砂糖橘为植物材料,从柑橘糖代谢过程中的颗粒结合淀粉合成酶（Granule-bound starch synthase,GBSS）、腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶（ADP-glucose pyrophosphorylase,AGPase）和淀粉分解酶（Amylolytic enzyme）入手,分析砂糖橘被黄龙病菌亚洲种（“Ca.L.asiaticus”）侵染后,植株体内淀粉合成、分解相关酶类的变化情况,进一步揭示砂糖橘感病叶片累积淀粉这一病理变化的机制。黄龙病菌的分子检测技术需要熟练的技术人员,昂贵的仪器设备和试剂等,不适合在田间大规模的检测。如果能够掌握黄龙病菌侵染引起植株变化的特性,研制一...
【文章来源】：华南农业大学广东省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
快速检测技术的实验步骤图
图 2 快速检测结果判定标准注：红线左侧为阳性样品检测结果图，红线右侧为阴性样品检测结果图3 结果与分析3.1 黄龙病菌侵染寄主植物造成淀粉积累的机理研究3.1.1 嫁接后砂糖橘叶片中“Ca. L. asiaticus”的浓度变化利用实时荧光定量 PCR 对温室中嫁接染病的砂糖橘叶片和健康对照砂糖橘进行逐月连续检测，研究叶片中“Ca. L. asiaticus”的滴定度变化，根据重复三次的 Ct 值的平均值算出样品中黄龙病菌的拷贝数（图 3）。嫁接染病的砂糖橘在 4 月份证实“Ca. Lasiaticus”阳性，此时的菌拷贝数为 8.96×104GECN/g 柑橘组织，随后在 5、6、7 月份菌拷贝数缓慢增长至 1.25×105GECN/g 柑橘组织，然后在 8 月份出现大幅度增长，达到 8.50×105GECN/g 柑橘组织，9 月份菌拷贝数小幅度下降到 9.03×105GECN/g 柑橘组
红线右侧为阴性样品检测结果图3 结果与分析3.1 黄龙病菌侵染寄主植物造成淀粉积累的机理研究3.1.1 嫁接后砂糖橘叶片中“Ca. L. asiaticus”的浓度变化利用实时荧光定量 PCR 对温室中嫁接染病的砂糖橘叶片和健康对照砂糖橘进行逐月连续检测，研究叶片中“Ca. L. asiaticus”的滴定度变化，根据重复三次的 Ct 值的平均值算出样品中黄龙病菌的拷贝数（图 3）。嫁接染病的砂糖橘在 4 月份证实“Ca. L.asiaticus”阳性，此时的菌拷贝数为 8.96×104GECN/g 柑橘组织，随后在 5、6、7 月份菌拷贝数缓慢增长至 1.25×105GECN/g 柑橘组织，然后在 8 月份出现大幅度增长，达到 8.50×105GECN/g 柑橘组织，9 月份菌拷贝数小幅度下降到 9.03×105GECN/g 柑橘组织
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于分子技术的柑橘黄龙病研究进展[J]. 许美容,戴泽翰,孔维文,邓晓玲. 果树学报. 2015(02)
[2]广东柑橘黄龙病发生情况与防控对策浅析[J]. 周春娜,吴仕豪,曹俐. 中国植保导刊. 2015(01)
[3]不同柑橘品种对黄龙病的抗性鉴定[J]. 刘登全,崔朝宇,蒋军喜,龙珑. 江西农业大学学报. 2014(01)
[4]柑橘黄龙病研究进展[J]. 程春振,曾继吾,钟云,闫化学,姜波,钟广炎. 园艺学报. 2013(09)
[5]柑橘黄龙病诊断方法的研究进展[J]. 高玉霞,卢占军,刘志芳,钟八莲. 赣南师范学院学报. 2013(03)
[6]柑橘黄龙病病原菌非洲种和美洲种23S-5S rDNA序列的克隆及分析[J]. 廖惠红,李杨瑞,杨丽涛,徐宁. 中国农业科学. 2011(17)
[7]有百年历史的日益严重的毁灭性柑桔病害——黄龙病[J]. J·seph Marie Bove,付惠敏,陈传武,白先进,赵学源. 广西农学报. 2011(04)
[8]中国柑橘黄龙病发生情况及防治现状[J]. 李雪燕,项宇,胡文召. 中国植保导刊. 2011(04)
[9]常规和巢式PCR对柑橘黄龙病菌的检测灵敏度比较[J]. 鹿连明,胡秀荣,张利平,黄振东,陈国庆. 热带作物学报. 2010(08)
[10]柑橘黄龙病病原研究进展[J]. 胡文召,周常勇. 植物保护. 2010(03)
博士论文
[1]Candidatus liberibacter asiaticus诱导的柑橘转录组学及蛋白组学研究[D]. 钟云.湖南农业大学 2012
[2]柑橘宿主对黄龙病病原菌侵染的应答机制[D]. 樊晶.重庆大学 2010
硕士论文
[1]柑橘黄龙病菌侵染对甜橙叶片糖代谢的影响研究[D]. 吴越.西南大学 2014
[2]缺硼对柑橘生理生化的影响[D]. 韩霜.福建农林大学 2007
本文编号：3301019
【文章来源】：华南农业大学广东省
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
快速检测技术的实验步骤图
图 2 快速检测结果判定标准注：红线左侧为阳性样品检测结果图，红线右侧为阴性样品检测结果图3 结果与分析3.1 黄龙病菌侵染寄主植物造成淀粉积累的机理研究3.1.1 嫁接后砂糖橘叶片中“Ca. L. asiaticus”的浓度变化利用实时荧光定量 PCR 对温室中嫁接染病的砂糖橘叶片和健康对照砂糖橘进行逐月连续检测，研究叶片中“Ca. L. asiaticus”的滴定度变化，根据重复三次的 Ct 值的平均值算出样品中黄龙病菌的拷贝数（图 3）。嫁接染病的砂糖橘在 4 月份证实“Ca. Lasiaticus”阳性，此时的菌拷贝数为 8.96×104GECN/g 柑橘组织，随后在 5、6、7 月份菌拷贝数缓慢增长至 1.25×105GECN/g 柑橘组织，然后在 8 月份出现大幅度增长，达到 8.50×105GECN/g 柑橘组织，9 月份菌拷贝数小幅度下降到 9.03×105GECN/g 柑橘组
红线右侧为阴性样品检测结果图3 结果与分析3.1 黄龙病菌侵染寄主植物造成淀粉积累的机理研究3.1.1 嫁接后砂糖橘叶片中“Ca. L. asiaticus”的浓度变化利用实时荧光定量 PCR 对温室中嫁接染病的砂糖橘叶片和健康对照砂糖橘进行逐月连续检测，研究叶片中“Ca. L. asiaticus”的滴定度变化，根据重复三次的 Ct 值的平均值算出样品中黄龙病菌的拷贝数（图 3）。嫁接染病的砂糖橘在 4 月份证实“Ca. L.asiaticus”阳性，此时的菌拷贝数为 8.96×104GECN/g 柑橘组织，随后在 5、6、7 月份菌拷贝数缓慢增长至 1.25×105GECN/g 柑橘组织，然后在 8 月份出现大幅度增长，达到 8.50×105GECN/g 柑橘组织，9 月份菌拷贝数小幅度下降到 9.03×105GECN/g 柑橘组织
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于分子技术的柑橘黄龙病研究进展[J]. 许美容,戴泽翰,孔维文,邓晓玲. 果树学报. 2015(02)
[2]广东柑橘黄龙病发生情况与防控对策浅析[J]. 周春娜,吴仕豪,曹俐. 中国植保导刊. 2015(01)
[3]不同柑橘品种对黄龙病的抗性鉴定[J]. 刘登全,崔朝宇,蒋军喜,龙珑. 江西农业大学学报. 2014(01)
[4]柑橘黄龙病研究进展[J]. 程春振,曾继吾,钟云,闫化学,姜波,钟广炎. 园艺学报. 2013(09)
[5]柑橘黄龙病诊断方法的研究进展[J]. 高玉霞,卢占军,刘志芳,钟八莲. 赣南师范学院学报. 2013(03)
[6]柑橘黄龙病病原菌非洲种和美洲种23S-5S rDNA序列的克隆及分析[J]. 廖惠红,李杨瑞,杨丽涛,徐宁. 中国农业科学. 2011(17)
[7]有百年历史的日益严重的毁灭性柑桔病害——黄龙病[J]. J·seph Marie Bove,付惠敏,陈传武,白先进,赵学源. 广西农学报. 2011(04)
[8]中国柑橘黄龙病发生情况及防治现状[J]. 李雪燕,项宇,胡文召. 中国植保导刊. 2011(04)
[9]常规和巢式PCR对柑橘黄龙病菌的检测灵敏度比较[J]. 鹿连明,胡秀荣,张利平,黄振东,陈国庆. 热带作物学报. 2010(08)
[10]柑橘黄龙病病原研究进展[J]. 胡文召,周常勇. 植物保护. 2010(03)
博士论文
[1]Candidatus liberibacter asiaticus诱导的柑橘转录组学及蛋白组学研究[D]. 钟云.湖南农业大学 2012
[2]柑橘宿主对黄龙病病原菌侵染的应答机制[D]. 樊晶.重庆大学 2010
硕士论文
[1]柑橘黄龙病菌侵染对甜橙叶片糖代谢的影响研究[D]. 吴越.西南大学 2014
[2]缺硼对柑橘生理生化的影响[D]. 韩霜.福建农林大学 2007
本文编号：3301019
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