绣球花花色相关转录因子HymMYB2的克隆及功能研究
发布时间：2021-08-24 16:30
植物花色方面的研究一直是人们研究的热点,对植物新品种的培育具有重要作用。在高等植物中,R2R3-MYB转录因子是植物花色苷生物合成途径的重要转录因子,也是研究最广泛的转录因子,通过调控花色苷生物合成途径的单基因或多基因的表达进一步调控花色苷物质的合成,从而使花色呈现不同颜色。绣球花（Hydrangea macrophyla）因花大、花色艳丽等特点,深受人们喜爱,已成为世界上极具发展潜力的花卉品种之一。目前,对绣球花花色形成的分子机制研究较少,本研究通过对绣球花花色相关转录因子进行克隆和功能研究,对阐明绣球花花色形成的分子机制和绣球花花色改良具有重要影响。本研究主要研究结果如下:（1）根据绣球花不孕花转录组数据库中HymMYB2基因的Unigene设计引物,以蓝色绣球花品种‘无尽夏’盛花期不孕花的cDNA和DNA为模板,成功获得了HymMYB2基因的全长序列,该基因不含内含子,开放读码框为939bp,能编码312个氨基酸。生物信息学分析表明,HymMYB2转录因子含有R2、R3结构域,属于典型的R2R3型MYB转录因子。HymMYB2蛋白的氨基酸序列与猕猴桃的MYB2序列的同源性最高。（...
【文章来源】：中南林业科技大学湖南省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．１技术路线??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ?ｒｏａｄｍａｐ??
硕士毕业论文?绣球花花色相关转录因子的克隆及功能研究??（〇Ｄ２６０ｎｍ／ＯＤ２８（ｍｍ）在?１．８－１．９?之间，，总?ＲＮＡ?的比值（ＯＤ２６〇ｎｍ／〇Ｄ２８０ｎｍ）在?１．９－２．０??之间，说明提取的基因组总ＤＮＡ和总ＲＮＡ的纯度较高，可用于后续试验。??２８ｓ?ｒＲＮＡ?Ｗ??１８ｓ?ｒＲＮＡ??ＳｓｒＲＮＡ??ａ）?ｂ）??图２．１绣球花不孕花总ＤＮＡ和总ＲＮＡ电泳图??Ｆｉｇｕｒｅ．?２．１?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｏｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＤＮＡ?ａｎｄ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｏｆ?狀“歷ｃ，叫Ａ少＂ａ?ｋ?ｓｔｅｒｉｌｅ?ｆｌｏｗｅｒ??注：ａ为基因组总ＤＮＡ电泳图；ｂ为总ＲＮＡ电泳图；Ｍ为５０００ｂｐ?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ??Ｎｏｔｅ：?ａ?ｉｓ?ｔｈｅ?ｔｏｔａｌ?ＤＮＡ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｍａｐ；?ｂ?ｉｓ?ｔｈｅ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｍａｐ；?Ｍ?ｉｓ?５０００ｂｐ??ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ??２．３．２?ＨｙｍＭＹＢ２?ＳＩＵ＾ＰＩ??根据绣球花盛花期不孕花转录组数据库中的Ｃｌｕｓｔｅｒ－３３４３５．１５１７７６序列信息设计??的引物，分别以绣球花品种‘无尽夏’盛花期不孕花的基因组总ＤＮＡ和ｃＤＮＡ为模??板进行ＰＣＲ扩增，扩增结果如图２．１所示，以基因组总ＤＮＡ和ｃＤＮＡ为模板均得到??了?ｌＯＯＯｂｐ大小的条带，并且扩增条带单一。测序结果共得到９３９个碱基，与绣球花??盛花期不孕花转录组数据库中Ｃｌｕｓｔｅｒ－３３４３５．１５１７７６的序列信息一致，基因组总ＤＮＡ??和ｃＤＮＡ为模板得到的条带序列一致，表明该基因在绣球花基因组序列中无内
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【参考文献】：
期刊论文
[1]MYB转录因子在植物非生物胁迫中的研究进展[J]. 关淑艳,焦鹏,蒋振忠,齐拙,夏海丰,曲静,马义勇. 吉林农业大学学报. 2019(03)
[2]花青素合成转录因子Vlmyb2遗传转化烟草的研究[J]. 孙婧文,吕立堂,赵德刚. 山地农业生物学报. 2018(01)
[3]Al3+对不同八仙花品种萼片颜色的影响初探[J]. 刁春武,胡波,韩勇,张艳双,高丰,魏猷刚. 上海蔬菜. 2017(04)
[4]绣球和圆锥绣球品种遗传多样性ISSR研究[J]. 彭继庆,徐志高,曹福祥,董旭杰,张鹏鸿. 江苏农业科学. 2017(09)
[5]外源硫酸铝调节八仙花花青苷组成和含量变化的分子生物学机制[J]. 龚仲幸,何勇,杨静,宋亚,叶真逍,朱祝军. 植物营养与肥料学报. 2017(03)
[6]拟南芥MYB转录因子家族研究进展[J]. 冯盼盼,陈鹏,洪文杰,赵小英,刘选明. 生命科学研究. 2016(06)
[7]绣球花品种遗传多样性的ISSR分析及指纹图谱构建[J]. 彭继庆,曹福祥,曹基武,董旭杰,刘志明,任锐,熊亚丽,张鹏鸿. 中南林业科技大学学报. 2016(12)
[8]几种新型植物基因表达载体的构建方法[J]. 张阳璞,杨淑慎. 生物工程学报. 2015(03)
[9]葡萄风信子转录因子MaMYB2的克隆及表达模式分析[J]. 李志根,刘雅莉,杨慧萍,刘妮妮. 西北林学院学报. 2015(02)
[10]观赏植物分子育种研究进展[J]. 戴思兰,黄河,付建新,洪艳. 植物学报. 2013(06)
博士论文
[1]金花茶花色相关基因的克隆及其功能研究[D]. 周兴文.中国林业科学研究院 2012
硕士论文
[1]珙桐苞片优势表达基因DiASR1的功能分析[D]. 高润昕.中南林业科技大学 2019
[2]6种绣球花新引进品种的快繁技术研究[D]. 郭超.中南林业科技大学 2015
[3]多花水仙类黄酮生物合成相关酶基因的克隆与表达分析[D]. 蔡雪玲.福建农林大学 2012
本文编号：3360333
【文章来源】：中南林业科技大学湖南省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．１技术路线??Ｆｉｇｕｒｅ?１．１?Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ?ｒｏａｄｍａｐ??
硕士毕业论文?绣球花花色相关转录因子的克隆及功能研究??（〇Ｄ２６０ｎｍ／ＯＤ２８（ｍｍ）在?１．８－１．９?之间，，总?ＲＮＡ?的比值（ＯＤ２６〇ｎｍ／〇Ｄ２８０ｎｍ）在?１．９－２．０??之间，说明提取的基因组总ＤＮＡ和总ＲＮＡ的纯度较高，可用于后续试验。??２８ｓ?ｒＲＮＡ?Ｗ??１８ｓ?ｒＲＮＡ??ＳｓｒＲＮＡ??ａ）?ｂ）??图２．１绣球花不孕花总ＤＮＡ和总ＲＮＡ电泳图??Ｆｉｇｕｒｅ．?２．１?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｏｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＤＮＡ?ａｎｄ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｏｆ?狀“歷ｃ，叫Ａ少＂ａ?ｋ?ｓｔｅｒｉｌｅ?ｆｌｏｗｅｒ??注：ａ为基因组总ＤＮＡ电泳图；ｂ为总ＲＮＡ电泳图；Ｍ为５０００ｂｐ?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ??Ｎｏｔｅ：?ａ?ｉｓ?ｔｈｅ?ｔｏｔａｌ?ＤＮＡ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｍａｐ；?ｂ?ｉｓ?ｔｈｅ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｍａｐ；?Ｍ?ｉｓ?５０００ｂｐ??ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ??２．３．２?ＨｙｍＭＹＢ２?ＳＩＵ＾ＰＩ??根据绣球花盛花期不孕花转录组数据库中的Ｃｌｕｓｔｅｒ－３３４３５．１５１７７６序列信息设计??的引物，分别以绣球花品种‘无尽夏’盛花期不孕花的基因组总ＤＮＡ和ｃＤＮＡ为模??板进行ＰＣＲ扩增，扩增结果如图２．１所示，以基因组总ＤＮＡ和ｃＤＮＡ为模板均得到??了?ｌＯＯＯｂｐ大小的条带，并且扩增条带单一。测序结果共得到９３９个碱基，与绣球花??盛花期不孕花转录组数据库中Ｃｌｕｓｔｅｒ－３３４３５．１５１７７６的序列信息一致，基因组总ＤＮＡ??和ｃＤＮＡ为模板得到的条带序列一致，表明该基因在绣球花基因组序列中无内
硕士毕业论文?绣球花花色相关转录因子的克隆及功能研究??（〇Ｄ２６０ｎｍ／ＯＤ２８（ｍｍ）在?１．８－１．９?之间，，总?ＲＮＡ?的比值（ＯＤ２６〇ｎｍ／〇Ｄ２８０ｎｍ）在?１．９－２．０??之间，说明提取的基因组总ＤＮＡ和总ＲＮＡ的纯度较高，可用于后续试验。??２８ｓ?ｒＲＮＡ?Ｗ??１８ｓ?ｒＲＮＡ??ＳｓｒＲＮＡ??ａ）?ｂ）??图２．１绣球花不孕花总ＤＮＡ和总ＲＮＡ电泳图??Ｆｉｇｕｒｅ．?２．１?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｏｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＤＮＡ?ａｎｄ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｏｆ?狀“歷ｃ，叫Ａ少＂ａ?ｋ?ｓｔｅｒｉｌｅ?ｆｌｏｗｅｒ??注：ａ为基因组总ＤＮＡ电泳图；ｂ为总ＲＮＡ电泳图；Ｍ为５０００ｂｐ?ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ??Ｎｏｔｅ：?ａ?ｉｓ?ｔｈｅ?ｔｏｔａｌ?ＤＮＡ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｍａｐ；?ｂ?ｉｓ?ｔｈｅ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｍａｐ；?Ｍ?ｉｓ?５０００ｂｐ??ＤＮＡ?Ｍａｒｋｅｒ??２．３．２?ＨｙｍＭＹＢ２?ＳＩＵ＾ＰＩ??根据绣球花盛花期不孕花转录组数据库中的Ｃｌｕｓｔｅｒ－３３４３５．１５１７７６序列信息设计??的引物，分别以绣球花品种‘无尽夏’盛花期不孕花的基因组总ＤＮＡ和ｃＤＮＡ为模??板进行ＰＣＲ扩增，扩增结果如图２．１所示，以基因组总ＤＮＡ和ｃＤＮＡ为模板均得到??了?ｌＯＯＯｂｐ大小的条带，并且扩增条带单一。测序结果共得到９３９个碱基，与绣球花??盛花期不孕花转录组数据库中Ｃｌｕｓｔｅｒ－３３４３５．１５１７７６的序列信息一致，基因组总ＤＮＡ??和ｃＤＮＡ为模板得到的条带序列一致，表明该基因在绣球花基因组序列中无内
【参考文献】：
期刊论文
[1]MYB转录因子在植物非生物胁迫中的研究进展[J]. 关淑艳,焦鹏,蒋振忠,齐拙,夏海丰,曲静,马义勇. 吉林农业大学学报. 2019(03)
[2]花青素合成转录因子Vlmyb2遗传转化烟草的研究[J]. 孙婧文,吕立堂,赵德刚. 山地农业生物学报. 2018(01)
[3]Al3+对不同八仙花品种萼片颜色的影响初探[J]. 刁春武,胡波,韩勇,张艳双,高丰,魏猷刚. 上海蔬菜. 2017(04)
[4]绣球和圆锥绣球品种遗传多样性ISSR研究[J]. 彭继庆,徐志高,曹福祥,董旭杰,张鹏鸿. 江苏农业科学. 2017(09)
[5]外源硫酸铝调节八仙花花青苷组成和含量变化的分子生物学机制[J]. 龚仲幸,何勇,杨静,宋亚,叶真逍,朱祝军. 植物营养与肥料学报. 2017(03)
[6]拟南芥MYB转录因子家族研究进展[J]. 冯盼盼,陈鹏,洪文杰,赵小英,刘选明. 生命科学研究. 2016(06)
[7]绣球花品种遗传多样性的ISSR分析及指纹图谱构建[J]. 彭继庆,曹福祥,曹基武,董旭杰,刘志明,任锐,熊亚丽,张鹏鸿. 中南林业科技大学学报. 2016(12)
[8]几种新型植物基因表达载体的构建方法[J]. 张阳璞,杨淑慎. 生物工程学报. 2015(03)
[9]葡萄风信子转录因子MaMYB2的克隆及表达模式分析[J]. 李志根,刘雅莉,杨慧萍,刘妮妮. 西北林学院学报. 2015(02)
[10]观赏植物分子育种研究进展[J]. 戴思兰,黄河,付建新,洪艳. 植物学报. 2013(06)
博士论文
[1]金花茶花色相关基因的克隆及其功能研究[D]. 周兴文.中国林业科学研究院 2012
硕士论文
[1]珙桐苞片优势表达基因DiASR1的功能分析[D]. 高润昕.中南林业科技大学 2019
[2]6种绣球花新引进品种的快繁技术研究[D]. 郭超.中南林业科技大学 2015
[3]多花水仙类黄酮生物合成相关酶基因的克隆与表达分析[D]. 蔡雪玲.福建农林大学 2012
本文编号：3360333
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