番茄中一个抗病基因的遗传转化及抗病性的初步研究
发布时间：2021-09-07 14:32
番茄抗病基因中含有卷曲螺旋结构（coiled-coil,CC）、核苷酸结合位点（Nucleotide binding site, NBS）和富含亮氨酸的重复序列（Leucine-rich repeat, LRR）结构域是植物中最大类抗病家族之一,其中多数的R基因都具有核苷酸结合位点（NBS）和富含亮氨酸的重复序列（LRR）结构域。CC-NBS-LRR结构是R基因重要的结构,对植物的抗病起到很重要的作用。青枯病、早疫病、晚疫病、枯萎病、叶霉病等病害为番茄生产带来了毁灭性的的影响,同时外界不良的环境以及各种病原菌通常会给植物生长发育造成一定侵害,植物在长期的进化过程中已经形成了完善的自我保护机制以抵御病原菌入侵以及外界不良环境的伤害。研究表明植物抗病R基因能够识别病原体引发过敏性反应（Hypersensitive response, HR）,从而提高植物病害的防御能力。本研究中通过酵母双杂筛选获得了DDB1IP9基因,与番茄中重要DDB1基因蛋白具有相互作用,并通过Sol Genomics Network和NCBI （National Center for Biotechnology In...
【文章来源】：合肥工业大学安徽省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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【参考文献】：
期刊论文
[1]番茄NBS-LRR抗病基因家族全基因组分析[J]. 刘云飞,万红建,韦艳萍,李志邈,叶青静,王荣青,阮美颖,姚祝平,周国治,杨悦俭. 核农学报. 2014(05)
[2]植物细胞中瞬时表达系统的建立及研究进展[J]. 周丹丹,俞嘉宁. 中国农学通报. 2013(24)
[3]转基因番茄的研究现状及其产业化[J]. 王傲雪,陈秀玲. 遗传. 2011(09)
[4]A Pid3 allele from rice cultivar Gumei2 confers resistance to Magnaporthe oryzae[J]. Jie Chen~a,Yongfeng Shi~a,Wenzheng Liu~a,Rongyao Chai~b,Yaping Fu~a, Jieyun Zhuang~a,Jianli Wu~(a,*) a State Key Laboratory of Rice Biology,China National Rice Research Institute,Hangzhou 310006,China b Zhejiang Academy of Agricultural Sciences,Hangzhou 310028,China. 遗传学报. 2011(05)
[5]农杆菌介导的烟草瞬时表达试验条件优化[J]. 吴英杰,姜波,张岩,李彦邦,贺琳,王玉成. 东北林业大学学报. 2010(09)
[6]农杆菌介导水稻转基因技术的原理与应用研究进展[J]. 张红霞,邓启云,吴俊. 湖南农业科学. 2010(11)
[7]利用烟草瞬时表达系统检测高等植物基因的剪接加工[J]. 高少培,牛向丽,罗笛,常丽娟,喻旭,李欲翔,刘永胜. 生物化学与生物物理进展. 2010(06)
[8]植物组织培养技术及应用进展[J]. 盛玉婷. 安徽农学通报. 2008(09)
[9]小麦愈伤组织诱导及其植株再生研究进展[J]. 王廷璞,陈荃,崔爱明,刘瑞媛,马伟超. 天水师范学院学报. 2008(02)
[10]植物瞬间表达系统与功能基因组学研究[J]. 王华忠,陈雅平,陈佩度. 生物工程学报. 2007(03)
本文编号：3389718
【文章来源】：合肥工业大学安徽省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３．?ｌＤ￡）Ｗ／ｆ９基因ＰＣ民扩增图??Ｆｉｇ．３．１?Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ＤＤＢ１ＩＰ９?ｂｙ?ＰＣＲ??
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?的０公公／货９片段，证明公公公７／巧基因已经连接到中间载体ｐＥＡＳＹ－Ｂｌｕｎｔ上，如??图３．３所示。其中一个质粒酶切结果出现Ｈ条带，分析由于是平端酶切位点，??酶切速率较慢，有部分质粒未被酶切造成的，因此酶切过程中可尽量加长酶切??时间。???Ｍ?１?２??３??ｓｏｏｏｂｐ—＊?？．?＞?皂?｜??图３．?３?ｐＥＡＳＹ－Ｂｋｍｔ－ＤＤＢｌＩＰ９阳性质粒酶切鉴定图??Ｆｉｇ．?３．?３?Ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｐｌａｓｍｉｄ?ｏｆ?ｐＥＡＳＹ－Ｂ?山?ｎｔ－ＤＤＢｌＩＰ９?ｂｙ?ｅｎｚｙｍｅｓ??Ｍ：?Ｔｒａｎｓ２ＫＤＮＡＭａｒｋｅｒ；?１－３：?ｐＥＡＳＹ－Ｂ山ｎｔ－ＤＤＢｌＩＰ９?质粒双酶切结果，其中?１，３?号鉴定正??确，２号未能酶切完无法确定。??将菌落ＰＣ艮鉴定正确且ｐＥＡＳＹ－Ｂｌｉｍｔ－ＤＤＢｌＩＰ９质粒酶切基因大小正确的大肠??杆菌菌液送到测序公司测序，测序结果比对正确。保存菌液，用１５％的灭菌好的??甘油保存于－８０度冰箱中，Ｗ便于后续实验。并将测序正确目的基因质粒酶切，胶??回收目的基因０公公７／尸乂切胶结果如图３．４所示。实验结果显示，ＤＤ如彷９片段??２５Ｕｂｐ，与被切除的位置一致，双泳道回收，是为了获取更多目的基因酶切产物。??Ｍ?０?１?１??３〇〇〇ｂｐ—??２０００ｂｐ＿??图３．?４?ｐＥＡＳＹ－ＢＩｕｎｔ－ＤＤＢｌＩＰ９质粒中Ｏ公公；／Ｐ９回收图??Ｆｉｇ．３．４?Ｒｅｃｙｃｌｅ?ＤＤＢ１ＩＰ９?ｆｒｏｍ?Ｐｌａｓｍｉｄ?ｏｆ?ｐＥＡＳＹ－Ｂｌｕｎｔ－ＤＤＢｌＩＰ９??Ｍ：打犯ｓ２ＫＤＮＡＭａｒｋｅｒ；?０空白泳道
【参考文献】：
期刊论文
[1]番茄NBS-LRR抗病基因家族全基因组分析[J]. 刘云飞,万红建,韦艳萍,李志邈,叶青静,王荣青,阮美颖,姚祝平,周国治,杨悦俭. 核农学报. 2014(05)
[2]植物细胞中瞬时表达系统的建立及研究进展[J]. 周丹丹,俞嘉宁. 中国农学通报. 2013(24)
[3]转基因番茄的研究现状及其产业化[J]. 王傲雪,陈秀玲. 遗传. 2011(09)
[4]A Pid3 allele from rice cultivar Gumei2 confers resistance to Magnaporthe oryzae[J]. Jie Chen~a,Yongfeng Shi~a,Wenzheng Liu~a,Rongyao Chai~b,Yaping Fu~a, Jieyun Zhuang~a,Jianli Wu~(a,*) a State Key Laboratory of Rice Biology,China National Rice Research Institute,Hangzhou 310006,China b Zhejiang Academy of Agricultural Sciences,Hangzhou 310028,China. 遗传学报. 2011(05)
[5]农杆菌介导的烟草瞬时表达试验条件优化[J]. 吴英杰,姜波,张岩,李彦邦,贺琳,王玉成. 东北林业大学学报. 2010(09)
[6]农杆菌介导水稻转基因技术的原理与应用研究进展[J]. 张红霞,邓启云,吴俊. 湖南农业科学. 2010(11)
[7]利用烟草瞬时表达系统检测高等植物基因的剪接加工[J]. 高少培,牛向丽,罗笛,常丽娟,喻旭,李欲翔,刘永胜. 生物化学与生物物理进展. 2010(06)
[8]植物组织培养技术及应用进展[J]. 盛玉婷. 安徽农学通报. 2008(09)
[9]小麦愈伤组织诱导及其植株再生研究进展[J]. 王廷璞,陈荃,崔爱明,刘瑞媛,马伟超. 天水师范学院学报. 2008(02)
[10]植物瞬间表达系统与功能基因组学研究[J]. 王华忠,陈雅平,陈佩度. 生物工程学报. 2007(03)
本文编号：3389718
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