Mn离子对枯草芽胞杆菌R31生物被膜形成和香蕉根际定殖的影响
发布时间：2021-09-15 14:05
枯草芽胞杆菌R31是一株广谱抗真菌植物内生芽胞杆菌,在盆栽和大田试验中对香蕉枯萎病有一定的防治效果,但防治效果受到接种浓度和香蕉枯萎病初始发病率的影响而不稳定。Mn离子可以促进R31生物被膜形成和钝化香蕉枯萎病菌毒素主要成分镰刀菌酸对R31生物被膜形成的抑制,可以考虑用于R31的增效剂以稳定R31的防治效果并减少R31的使用量。本研究首先测定了不同浓度Mn离子促进R31在DSM2培养基中的生长和生物被膜形成的效果,其次利用实时荧光定量PCR技术测定不同浓度Mn离子添加到DSM2培养基中后对R31生物被膜形成和细胞分化调控相关基因表达的影响,并测定不同浓度Mn离子与R31联合灌根后对巴西蕉种苗不同时间点根系MnSOD活性和过氧化氢产生的影响,然后利用绿色荧光蛋白标记的R31测定不同浓度Mn离子对R31在香蕉根际定殖的影响,最后测定120μg/mL MnSO4、9μg/mL镰刀菌酸（FA）与不同浓度R31处理对巴西蕉根系MnSOD和过氧化氢含量的影响。研究结果可以指导R31在不同情况下的香蕉枯萎病大田防治。结果如下:1.Mn...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１枯草芽胞杆菌不同细胞类型相关的基因调控网络（Ｌｏｐｅｚ?ｅｔａ１２００９ｓ〇??Ｆｉｇ，?１－１?Ｎｅｔｗｏｒｋ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｇｅｎｅｔｉｃｓ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｔｏ?ｃｅｌｌ?ｄｉｆＴｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ?ｉｎ??Ｂａｃｉｌｌｕｓ?ｓｕｂｔｉｌｉｓ（?Ｌｏｐｅｚ?ｅｔ?ａｌ?２００９ａ）??
?Ｍｎ离子对枯草芽胞杆菌Ｒ３１生物被膜形成和香蕉根际定殖的影响???ｒ??Ｌ?Ｊｌ?Ｊ??图２－１?Ｍｎ离子促进Ｒ３１在ＤＳＭ２中形成生物被膜??（ａ?为?ＣＫ，ｂ?为加?４０?ｐｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４，ｃ?为加?８０?ｐｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４，ｄ?为加?１２０?ｐｇ／ｍＬ??ＭｎＳ〇４，ｅ?为加?１６０?ｊｉｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４）??Ｆｉｇ．２－１?Ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｍａｎｇａｎｅｓｅ?ｉｏｎ?ｏｎ?Ｒ３１?ｂｉｏｆｉｌｍ?ｆｏｒｍａｔｉｏｎ?ｉｎ?ＤＳＭ２?ｃｕｌｔｕｒｅ??（ａ：?ＣＫ，?ｂ：?４０?（ｉｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４，?ｃ：?８０?｜ｉｇ／ｍＬ?ＭｎＳＣＵ，?ｄ：?１２０?｜ｉｇ／ｍＬ?Ｍ１１ＳＯ４，?ｅ：?１６０?ｊｉｇ／ｍＬ??ＭｎＳＣＵ）??２．４．２?Ｍｎ离子对Ｒ３１在ＤＳＭ２培养基上菌落直径的影响??表２－１?Ｍｎ离子对Ｒ３１菌落直径的影响??Ｔａｂｌｅ２－１?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｍａｎｇａｎｅｓｅ?ｉｏｎ?ｏｎ?Ｒ３１?ｃｏｌｏｎｙ?ｄｉａｍｅｔｅｒ?ｉｎ?ＤＳＭ２?ｍｅｄｉｕｍ??处理方式?菌落直径（ｃｍ）??ＤＳＭ２＋１２０?＾ｇ／ｍＬ?ＭｎＳ０４?３．５９１７?±０．１９６０?ａ??ＤＳＭ２＋Ｉ６Ｏ?ｐｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４?３．４３３３土０．２５５１?ａ??ＤＳＭ２＋８Ｏ?Ｍｇ／ｍＬ?ＭｎＳ０４?２．５５００±０．６９７９ｂ??ＤＳＭ２＋４０?＾ｇ／ｍＬ?ＭｎＳ０４?２．０７５０土０．０４１８ｃ??ＣＫ?０．４０００±０．０００ｄ??Ｍｎ离子对Ｒ３１在ＤＳＭ２培养基上菌落生长的影响如图２－２所示。菌落直径统计??结果如表２－１所示，不同浓度的Ｍ
?华中农业大学２０１６届硕士研究生学位论文???直径随着Ｍｎ离子的浓度增加而增大，当ＭｎＳ０４的浓度达到１２０?ｐｇ／ｍＬ时达到最佳，??当ＭｎＳ０４的浓度达到１６０?ｐｇ／ｍＬ时，结果和１２０?ｎｇ／ｍＬ没有显著差异。结合薄皮和??菌落实验，确定ＭｎＳ〇４在１２０（ａｇ／ｍＬ时具有最佳的生物被膜促进作用。??ＬＪＵ??图２－２?Ｍｎ离子对Ｒ３１在ＤＳＭ２上形成菌落的影响??（ａ?为?ＣＫ，?ｂ?为加?４０?｜ｉｇ／ｍＬＭｎＳ〇４，ｃ?为加?８０?｜ｉｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４，ｄ?为加?１２０?ｐｇ／ｍＬ??ＭｎＳ〇４，ｅ?为加?１６０?ｐｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４）??Ｆｉｇ．２－２?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｍａｎｇａｎｅｓｅ?ｉｏｎ?ｏｎ?Ｒ３１?ｆｏｒｍｉｎｇ?ｃｏｌｏｎｙ?ｉｎ?ＤＳＭ２?ｃｕｌｔｕｒｅ??（ａ：?ＣＫ，ｂ：?４０?ｊｉｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４，?ｃ：?８０?｜ｉｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４，?ｄ：?１２０?（ｉｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４，?ｅ：?１６０?｜ｉｇ／ｍＬ??ＭｎＳＣＵ）??２．４．３?Ｍｎ离子对Ｒ３１在ＤＳＭ２Ｇ培养基上生物被膜形成的影响??１％的甘油添加到ＤＳＭ２培养基中，得到ＤＳＭ２Ｇ培养基，Ｒ３１在ＤＳＭ２Ｇ培养基中??可以形成比ＤＳＭ２中更加皱褶的薄皮，但是形成的菌落与ＤＳＭ２中的差异不明显（图??２－３）。在ＤＳＭ２Ｇ培养基中加入不同浓度的ＭｎＳ〇４均可以有效促进Ｒ３１生成更加皱褶??的薄皮，但对Ｒ３１的菌落特征，不同浓度的Ｍｎ离子影响情况存在差异。４０？１２０ｊｘｇ／ｍＬ??ＭｎＳ０４添加增加了Ｒ３１在ＤＳＭ２Ｇ培养基上菌落的大小，其中１２０?ｐｇ／ｒｎＬ?ＭｎＳ０４处理的??菌落直径最大，菌落表
【参考文献】：
期刊论文
[1]植物中活性氧信号转导及其检测方法研究进展[J]. 赵晓玉,薛娴,卢存福,林金星,万迎朗. 电子显微学报. 2014(02)
[2]绿色荧光蛋白标记的枯草芽胞杆菌R31在西芹根际定殖研究[J]. 陈燕红,黎永坚,喻国辉,陈远凤. 中国农学通报. 2014(09)
[3]ywbB基因对枯草芽胞杆菌NCD-2菌株生物膜形成和根际定殖能力的影响[J]. 郭庆港,吴园园,李社增,鹿秀云,王洪港,马平. 植物保护学报. 2013(01)
[4]枯草芽孢杆菌R31和TR21菌株防治香蕉枯萎病田间药效试验[J]. 黎永坚,程萍,喻国辉,陈燕红. 广东农业科学. 2012(23)
[5]铜、锌元素对香蕉枯萎病的防治效果与机理[J]. 姬华伟,郑青松,董鲜,周金燕,沈其荣,郭世伟. 园艺学报. 2012(06)
[6]FOC4的2个过氧化氢酶基因的克隆与表达分析及其引起的香蕉苗活性氧迸发研究[J]. 齐兴柱,杨腊英,黄俊生. 中国农学通报. 2012(15)
[7]枯草芽孢杆菌TR21对香蕉抗病相关基因表达的诱导作用[J]. 喻国辉,周林,程萍,黎永坚,杨紫红. 中国生物防治学报. 2012(01)
[8]枯草芽胞杆菌R31在香芽蕉根部的定殖能力测定[J]. 李荣,程萍,喻国辉,汤浩,黎永坚. 广东农业科学. 2011(24)
[9]枯草芽孢杆菌TR21对香蕉抗病相关酶活的诱导作用[J]. 周林,程萍,喻国辉,黎永坚,杨紫红. 中国农学通报. 2011(02)
[10]枯草芽胞杆菌TR21叶腋喷施防治巴西蕉枯萎病[J]. 牛春艳,喻国辉,程萍,黎永坚,张吉斌,周林. 热带作物学报. 2010(11)
硕士论文
[1]枯草芽胞杆菌R31对香蕉枯萎病生防机制研究[D]. 李荣.华中农业大学 2012
[2]抗香蕉枯萎病4号小种的枯草芽胞杆菌R31的发酵条件优化[D]. 李红美.华中农业大学 2010
本文编号：3396215
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
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【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１枯草芽胞杆菌不同细胞类型相关的基因调控网络（Ｌｏｐｅｚ?ｅｔａ１２００９ｓ〇??Ｆｉｇ，?１－１?Ｎｅｔｗｏｒｋ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｇｅｎｅｔｉｃｓ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ｒｅｌａｔｅｄ?ｔｏ?ｃｅｌｌ?ｄｉｆＴｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ?ｉｎ??Ｂａｃｉｌｌｕｓ?ｓｕｂｔｉｌｉｓ（?Ｌｏｐｅｚ?ｅｔ?ａｌ?２００９ａ）??
?Ｍｎ离子对枯草芽胞杆菌Ｒ３１生物被膜形成和香蕉根际定殖的影响???ｒ??Ｌ?Ｊｌ?Ｊ??图２－１?Ｍｎ离子促进Ｒ３１在ＤＳＭ２中形成生物被膜??（ａ?为?ＣＫ，ｂ?为加?４０?ｐｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４，ｃ?为加?８０?ｐｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４，ｄ?为加?１２０?ｐｇ／ｍＬ??ＭｎＳ〇４，ｅ?为加?１６０?ｊｉｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４）??Ｆｉｇ．２－１?Ｐｏｓｉｔｉｖｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｍａｎｇａｎｅｓｅ?ｉｏｎ?ｏｎ?Ｒ３１?ｂｉｏｆｉｌｍ?ｆｏｒｍａｔｉｏｎ?ｉｎ?ＤＳＭ２?ｃｕｌｔｕｒｅ??（ａ：?ＣＫ，?ｂ：?４０?（ｉｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４，?ｃ：?８０?｜ｉｇ／ｍＬ?ＭｎＳＣＵ，?ｄ：?１２０?｜ｉｇ／ｍＬ?Ｍ１１ＳＯ４，?ｅ：?１６０?ｊｉｇ／ｍＬ??ＭｎＳＣＵ）??２．４．２?Ｍｎ离子对Ｒ３１在ＤＳＭ２培养基上菌落直径的影响??表２－１?Ｍｎ离子对Ｒ３１菌落直径的影响??Ｔａｂｌｅ２－１?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｍａｎｇａｎｅｓｅ?ｉｏｎ?ｏｎ?Ｒ３１?ｃｏｌｏｎｙ?ｄｉａｍｅｔｅｒ?ｉｎ?ＤＳＭ２?ｍｅｄｉｕｍ??处理方式?菌落直径（ｃｍ）??ＤＳＭ２＋１２０?＾ｇ／ｍＬ?ＭｎＳ０４?３．５９１７?±０．１９６０?ａ??ＤＳＭ２＋Ｉ６Ｏ?ｐｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４?３．４３３３土０．２５５１?ａ??ＤＳＭ２＋８Ｏ?Ｍｇ／ｍＬ?ＭｎＳ０４?２．５５００±０．６９７９ｂ??ＤＳＭ２＋４０?＾ｇ／ｍＬ?ＭｎＳ０４?２．０７５０土０．０４１８ｃ??ＣＫ?０．４０００±０．０００ｄ??Ｍｎ离子对Ｒ３１在ＤＳＭ２培养基上菌落生长的影响如图２－２所示。菌落直径统计??结果如表２－１所示，不同浓度的Ｍ
?华中农业大学２０１６届硕士研究生学位论文???直径随着Ｍｎ离子的浓度增加而增大，当ＭｎＳ０４的浓度达到１２０?ｐｇ／ｍＬ时达到最佳，??当ＭｎＳ０４的浓度达到１６０?ｐｇ／ｍＬ时，结果和１２０?ｎｇ／ｍＬ没有显著差异。结合薄皮和??菌落实验，确定ＭｎＳ〇４在１２０（ａｇ／ｍＬ时具有最佳的生物被膜促进作用。??ＬＪＵ??图２－２?Ｍｎ离子对Ｒ３１在ＤＳＭ２上形成菌落的影响??（ａ?为?ＣＫ，?ｂ?为加?４０?｜ｉｇ／ｍＬＭｎＳ〇４，ｃ?为加?８０?｜ｉｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４，ｄ?为加?１２０?ｐｇ／ｍＬ??ＭｎＳ〇４，ｅ?为加?１６０?ｐｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４）??Ｆｉｇ．２－２?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｍａｎｇａｎｅｓｅ?ｉｏｎ?ｏｎ?Ｒ３１?ｆｏｒｍｉｎｇ?ｃｏｌｏｎｙ?ｉｎ?ＤＳＭ２?ｃｕｌｔｕｒｅ??（ａ：?ＣＫ，ｂ：?４０?ｊｉｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４，?ｃ：?８０?｜ｉｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４，?ｄ：?１２０?（ｉｇ／ｍＬ?ＭｎＳ〇４，?ｅ：?１６０?｜ｉｇ／ｍＬ??ＭｎＳＣＵ）??２．４．３?Ｍｎ离子对Ｒ３１在ＤＳＭ２Ｇ培养基上生物被膜形成的影响??１％的甘油添加到ＤＳＭ２培养基中，得到ＤＳＭ２Ｇ培养基，Ｒ３１在ＤＳＭ２Ｇ培养基中??可以形成比ＤＳＭ２中更加皱褶的薄皮，但是形成的菌落与ＤＳＭ２中的差异不明显（图??２－３）。在ＤＳＭ２Ｇ培养基中加入不同浓度的ＭｎＳ〇４均可以有效促进Ｒ３１生成更加皱褶??的薄皮，但对Ｒ３１的菌落特征，不同浓度的Ｍｎ离子影响情况存在差异。４０？１２０ｊｘｇ／ｍＬ??ＭｎＳ０４添加增加了Ｒ３１在ＤＳＭ２Ｇ培养基上菌落的大小，其中１２０?ｐｇ／ｒｎＬ?ＭｎＳ０４处理的??菌落直径最大，菌落表
【参考文献】：
期刊论文
[1]植物中活性氧信号转导及其检测方法研究进展[J]. 赵晓玉,薛娴,卢存福,林金星,万迎朗. 电子显微学报. 2014(02)
[2]绿色荧光蛋白标记的枯草芽胞杆菌R31在西芹根际定殖研究[J]. 陈燕红,黎永坚,喻国辉,陈远凤. 中国农学通报. 2014(09)
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[4]枯草芽孢杆菌R31和TR21菌株防治香蕉枯萎病田间药效试验[J]. 黎永坚,程萍,喻国辉,陈燕红. 广东农业科学. 2012(23)
[5]铜、锌元素对香蕉枯萎病的防治效果与机理[J]. 姬华伟,郑青松,董鲜,周金燕,沈其荣,郭世伟. 园艺学报. 2012(06)
[6]FOC4的2个过氧化氢酶基因的克隆与表达分析及其引起的香蕉苗活性氧迸发研究[J]. 齐兴柱,杨腊英,黄俊生. 中国农学通报. 2012(15)
[7]枯草芽孢杆菌TR21对香蕉抗病相关基因表达的诱导作用[J]. 喻国辉,周林,程萍,黎永坚,杨紫红. 中国生物防治学报. 2012(01)
[8]枯草芽胞杆菌R31在香芽蕉根部的定殖能力测定[J]. 李荣,程萍,喻国辉,汤浩,黎永坚. 广东农业科学. 2011(24)
[9]枯草芽孢杆菌TR21对香蕉抗病相关酶活的诱导作用[J]. 周林,程萍,喻国辉,黎永坚,杨紫红. 中国农学通报. 2011(02)
[10]枯草芽胞杆菌TR21叶腋喷施防治巴西蕉枯萎病[J]. 牛春艳,喻国辉,程萍,黎永坚,张吉斌,周林. 热带作物学报. 2010(11)
硕士论文
[1]枯草芽胞杆菌R31对香蕉枯萎病生防机制研究[D]. 李荣.华中农业大学 2012
[2]抗香蕉枯萎病4号小种的枯草芽胞杆菌R31的发酵条件优化[D]. 李红美.华中农业大学 2010
本文编号：3396215
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