苹果成花诱导阶段MdCOL和MdNF-YB协同调控MdFT1转录的分子机制研究
发布时间：2021-09-15 18:23
FLOWERING LOCUS T（FT）蛋白在成花诱导阶段发挥关键作用,拟南芥CONSTANS（CO）蛋白和Nuclear Factor Y（NF-Y）转录因子家族可以协同调控AtFT的转录。试验以成花能力差异较大的‘长富2号’和‘秦冠’苹果品种为材料,利用酵母单杂交、酵母双杂交等试验方法,系统研究苹果CONSTANS-Like（MdCOL）和MdNF-Y亚家族成员MdNF-YB在协同调控MdFT1转录过程中的作用机制。主要研究成果总结如下:1、MdCOL、MdNF-YB转录因子家族和MdFT1鉴定、表达分析。将MdCOL转录因子家族氨基酸序列与拟南芥AtCOL家族第一组成员（AtCO、AtCOL1至AtCOL5）及AtCOL9的氨基酸序列进行同源性比对;同时将苹果转录因子家族MdNF-YB与拟南芥AtNF-YB2和AtNF-YB3蛋白序列进行同源性比对,综合本实验室转录组数据库分析结果,筛选出7个MdCOL家族基因和1个MdNF-YB家族基因,进行表达量分析。采用实时荧光定量PCR（q-PCR）测定MdCOL、MdNF-YB部分家族成员与MdFT1在不同组织中表达量。结果表明MdF...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 研究背景
1.2 花发育过程
1.2.1 成花诱导
1.2.2 花芽发端
1.2.3 花器官发育
1.3 FT与植物开花关系
1.4 CO和NF-Y调控FT分子机制
1.5 苹果成花调控研究进展
1.6 酵母单杂交及酵母双杂交试验原理
1.7 选题的目的和意义
第二章 MdCOL、MdNF-YB基因家族和MdFT1鉴定、表达分析
2.1 材料
2.2 方法
2.2.1 序列分析
2.2.2 总RNA提取
2.2.3 消化基因组DNA及反转录
2.2.4 实时荧光定量PCR分析
2.3 结果与分析
2.3.1 MdCOL、MdNF-YB家族分析
2.3.2 MdCOL、MdNF-YB部分基因家族成员与MdFT1在不同组织中表达分析
2.3.3 部分MdCOL、MdNF-YB家族成员结构域分析
2.4 讨论
第三章 MdCOL、MdNF-YB家族蛋白成员与MdFT1启动子结合能力分析
3.1 试验材料
3.1.1 植物材料
3.1.2 菌株及载体
3.1.3 试剂
3.1.4 引物合成及测序
3.2 试验方法
3.2.1 构建酵母单杂载体
3.2.2 酵母单杂交
3.3 结果与分析
3.3.1 MdCOL及MdNF-YB3载体构建
3.3.2 MdFT1启动子载体构建
3.3.3 MdCOL与MdNF-YB3蛋白结合MdFT1启动子能力
3.4 讨论
第四章 MdCOL和MdNF-YB家族成员之间相互作用分析
4.1 试验材料
4.1.1 菌株及载体
4.1.2 试剂
4.2 试验方法
4.2.1 构建酵母双杂载体
4.2.2 酵母双杂交
4.3 结果与分析
4.3.1 自激活和毒性检测
4.3.2 蛋白相互作用鉴定
4.4 讨论
第五章 小结与展望
5.1 小结
5.2 展望
参考文献
附录 1
致谢
作者简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]The CONSTANS-like 4 transcription factor,AtCOL4,positively regulates abiotic stress tolerance through an abscisic acid-dependent manner in Arabidopsis[J]. Ji-Hee Min,Jung-Sung Chung,Kyeong-Hwan Lee,Cheol Soo Kim. Journal of Integrative Plant Biology. 2015(03)
[2]PBO对苹果幼树生长、叶片品质及成花的影响[J]. 邢利博,张庆伟,韩明玉,赵彩平,陈锡龙,侯玉珏,刘航空. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2013(05)
[3]赤霉素对凯特芒果开花特性调控研究[J]. 李贵利,潘宏兵,杜邦,刘斌,周文静. 湖北农业科学. 2011(14)
[4]CO基因的调控表达与植物光周期反应[J]. 吴连成,常丽丽,陈晓,库丽霞. 中国农学通报. 2010(02)
[5]拉枝角度对富士苹果树生理特性和果实品质的影响[J]. 韩明玉,李永武,范崇辉,赵彩萍. 园艺学报. 2008(09)
[6]植物开花转换的分子生物学研究[J]. 陈晓,陈彦惠,任永哲. 分子植物育种. 2005(04)
[7]果树花芽分化机理研究进展[J]. 曹尚银,张秋明,吴顺. 果树学报. 2003(05)
[8]GA3和PP333调控苹果花芽孕育机理的研究[J]. 曹尚银,汤一卒,江爱华. 园艺学报. 2001(04)
[9]GA3对杨梅叶片木质素水平及其相关酶活性和成花的影响[J]. 李兴军,李三玉,吕均良,汪国云. 园艺学报. 2001(02)
[10]苹果梨花芽形态分化观察[J]. 李秉真,李雄,王维霞,邬全红. 北方园艺. 1999(01)
硕士论文
[1]喷施6-BA和IAA对富士幼树花芽孕育期间激素与相关基因表达的影响[D]. 李有梅.西北农林科技大学 2015
[2]苹果Flowering locus T （FT）基因及其启动子的克隆及表达分析[D]. 郑小一.南京农业大学 2010
本文编号：3396565
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 研究背景
1.2 花发育过程
1.2.1 成花诱导
1.2.2 花芽发端
1.2.3 花器官发育
1.3 FT与植物开花关系
1.4 CO和NF-Y调控FT分子机制
1.5 苹果成花调控研究进展
1.6 酵母单杂交及酵母双杂交试验原理
1.7 选题的目的和意义
第二章 MdCOL、MdNF-YB基因家族和MdFT1鉴定、表达分析
2.1 材料
2.2 方法
2.2.1 序列分析
2.2.2 总RNA提取
2.2.3 消化基因组DNA及反转录
2.2.4 实时荧光定量PCR分析
2.3 结果与分析
2.3.1 MdCOL、MdNF-YB家族分析
2.3.2 MdCOL、MdNF-YB部分基因家族成员与MdFT1在不同组织中表达分析
2.3.3 部分MdCOL、MdNF-YB家族成员结构域分析
2.4 讨论
第三章 MdCOL、MdNF-YB家族蛋白成员与MdFT1启动子结合能力分析
3.1 试验材料
3.1.1 植物材料
3.1.2 菌株及载体
3.1.3 试剂
3.1.4 引物合成及测序
3.2 试验方法
3.2.1 构建酵母单杂载体
3.2.2 酵母单杂交
3.3 结果与分析
3.3.1 MdCOL及MdNF-YB3载体构建
3.3.2 MdFT1启动子载体构建
3.3.3 MdCOL与MdNF-YB3蛋白结合MdFT1启动子能力
3.4 讨论
第四章 MdCOL和MdNF-YB家族成员之间相互作用分析
4.1 试验材料
4.1.1 菌株及载体
4.1.2 试剂
4.2 试验方法
4.2.1 构建酵母双杂载体
4.2.2 酵母双杂交
4.3 结果与分析
4.3.1 自激活和毒性检测
4.3.2 蛋白相互作用鉴定
4.4 讨论
第五章 小结与展望
5.1 小结
5.2 展望
参考文献
附录 1
致谢
作者简介
【参考文献】：
期刊论文
[1]The CONSTANS-like 4 transcription factor,AtCOL4,positively regulates abiotic stress tolerance through an abscisic acid-dependent manner in Arabidopsis[J]. Ji-Hee Min,Jung-Sung Chung,Kyeong-Hwan Lee,Cheol Soo Kim. Journal of Integrative Plant Biology. 2015(03)
[2]PBO对苹果幼树生长、叶片品质及成花的影响[J]. 邢利博,张庆伟,韩明玉,赵彩平,陈锡龙,侯玉珏,刘航空. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2013(05)
[3]赤霉素对凯特芒果开花特性调控研究[J]. 李贵利,潘宏兵,杜邦,刘斌,周文静. 湖北农业科学. 2011(14)
[4]CO基因的调控表达与植物光周期反应[J]. 吴连成,常丽丽,陈晓,库丽霞. 中国农学通报. 2010(02)
[5]拉枝角度对富士苹果树生理特性和果实品质的影响[J]. 韩明玉,李永武,范崇辉,赵彩萍. 园艺学报. 2008(09)
[6]植物开花转换的分子生物学研究[J]. 陈晓,陈彦惠,任永哲. 分子植物育种. 2005(04)
[7]果树花芽分化机理研究进展[J]. 曹尚银,张秋明,吴顺. 果树学报. 2003(05)
[8]GA3和PP333调控苹果花芽孕育机理的研究[J]. 曹尚银,汤一卒,江爱华. 园艺学报. 2001(04)
[9]GA3对杨梅叶片木质素水平及其相关酶活性和成花的影响[J]. 李兴军,李三玉,吕均良,汪国云. 园艺学报. 2001(02)
[10]苹果梨花芽形态分化观察[J]. 李秉真,李雄,王维霞,邬全红. 北方园艺. 1999(01)
硕士论文
[1]喷施6-BA和IAA对富士幼树花芽孕育期间激素与相关基因表达的影响[D]. 李有梅.西北农林科技大学 2015
[2]苹果Flowering locus T （FT）基因及其启动子的克隆及表达分析[D]. 郑小一.南京农业大学 2010
本文编号：3396565
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