中国水仙类黄酮合成途径bHLH转录因子NtbHLH1的克隆及其功能研究
发布时间：2021-09-16 19:17
中国水仙（Narcissus tazetta var.chinensis）是石蒜科水仙属多年生草本植物,是观赏价值极高的我国传统花卉。由于中国水仙是三倍体植物,高度不育,一般只能通过小鳞茎进行无性繁殖,以传统的杂交育种方式很难培养出新的品种。中国水仙品种比较稀少,花色单一,产业发展受到了影响。通过对中国水仙的花色进行分子机制方面的研究,对中国水仙花色进行创新。本实验以中国水仙‘金盏银台’为材料,从中国水仙花瓣和副冠转录组数据库中筛选出一条与类黄酮合成相关的b HLH转录因子,命名为Ntb HLH1,利用3′RACE技术克隆出这条基因的全长序列,同时对其进行序列分析;通过q-PCR检测Ntb HLH1基因在中国水仙鳞茎盘以及花瓣和副冠在花苞期、始花期和盛花期的相对表达水平;构建植物表达载体,进行烟草稳定转化研究基因功能,并分析转基因植株中类黄酮代谢途径相关结构基因的表达以及转基因植株中总黄酮和花青素含量的变化;通过酵母双杂交实验验证了Ntb HLH1与7个R2R3-MYB转录因子互作的情况;通过双荧光素酶试验分析了Ntb HLH1与7个R2R3-MYB形成复合物对类黄酮合成途径的结构基因...
【文章来源】：福建农林大学福建省
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
植物类黄酮合成途径Fig.1-1Biosynthesispathwayofplantflavonoids
NtbHLH13’末端克隆Fig2-9Cloningof3’endsequenceofNtbHLH1
中国水仙类黄酮途径bHLH基因克隆与表达分析18图2-8NtbHLH13’RACE扩增产物R1：第一轮；R2：第二轮；R3：第三轮；M：MarkerFig.2-83’RACRamplifiedproductofNtbHLH1R1：firstround；R2：secondround；R3：thirdround；M：Marker图2-9NtbHLH13’末端克隆Fig2-9Cloningof3’endsequenceofNtbHLH12.2NtbHLH1基因ORF序列获得与分析用DNAMAN将通过3’RACE获得的NtbHLH1序列与在转录组找到已知的部分保守序列进行拼接，通过对其进行分析可以得出NtbHLH1的ORF大小为1896bp，编码632个氨基酸，GenBank登录号：QDS02912.1。2.3NtbHLH1的ORF扩增根据拼接获得NtbHLH1编码区全长，在起始密码子和终止密码子处设计特
【参考文献】：
期刊论文
[1]花色苷的生物合成及其影响因素研究进展[J]. 徐僡,郑远静,高方平,李欲轲,孙威. 江苏农业学报. 2019(05)
[2]‘云香’水仙NtNAC1基因的克隆及功能分析[J]. 肖瑶宇,李琳,李全超,刘洋,陈晓静. 热带作物学报. 2019(05)
[3]‘云香’水仙NtNAC2基因的克隆及功能分析[J]. 肖瑶宇,刘洋,李全超,李琳,陈晓静. 西北植物学报. 2018(11)
[4]中国水仙NtMYB7基因的克隆及功能初步研究[J]. 王桂青,姚红,吴嘉诚,MUHAMMAD Anwar,曾黎辉. 西北植物学报. 2018(08)
[5]中国水仙R2R3-MYB基因NtMYB5的克隆和功能研究[J]. 吴嘉诚,王桂青,Muhammad Anwar,曾黎辉. 园艺学报. 2018(07)
[6]‘云香’水仙NtWRKYY2基因的克隆及功能分析[J]. 温秀萍,孙申申,杨菲颖,陈晓静. 西北植物学报. 2017(07)
[7]中国水仙NtPI2基因的克隆及遗传转化[J]. 吴菁华,武丹,吴少华. 西北植物学报. 2017(06)
[8]‘云香’水仙NAC基因克隆及表达分析[J]. 李梦思,赵潇俐,吴用,李欢,李科,陈晓静. 热带作物学报. 2017(02)
[9]低温对牡丹切花花色和花青素苷合成的影响[J]. 杜丹妮,张超,高树林,董丽. 植物遗传资源学报. 2016(02)
[10]中国水仙NtSTK基因的克隆、序列和组织表达分析[J]. 吴菁华,吴少华,杨超,张志忠,林文雄. 热带作物学报. 2015(10)
博士论文
[1]中国水仙类黄酮代谢抑制基因NtMYB2,NtMYB3和NtMYB4的鉴定及功能研究[D]. Muhammad Anwar.福建农林大学 2018
[2]桃花青苷着色及原花青素合成的调控机制研究[D]. 周晖.中国科学院研究生院(武汉植物园) 2015
[3]香雪兰UDP-葡萄糖：类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶基因的克隆及其功能鉴定[D]. 隋昕.东北师范大学 2011
[4]苹果bHLH转录因子MdTTL1对低温诱导花青苷合成和果实着色的多途径调控[D]. 谢兴斌.山东农业大学 2011
[5]中国水仙花型、花色发育基因（NTMADS1、NtMADS3、NTPDS1和NTPZDS1）的克隆与转化[D]. 陈段芬.中国林业科学研究院 2008
硕士论文
[1]中国水仙类黄酮代谢途径2个R2R3-MYB基因的克隆与功能研究[D]. 吴嘉诚.福建农林大学 2018
[2]中国水仙花转录组分析及类黄酮代谢MYB基因功能研究[D]. 王桂青.福建农林大学 2018
[3]香雪兰类黄酮代谢相关bHLH转录因子基因的克隆及其功能鉴定[D]. 单晓彤.东北师范大学 2016
[4]茶树黄酮醇糖苷积累的研究及CsFLS基因功能的验证[D]. 吴亚会.安徽农业大学 2016
[5]小麦黄酮醇合成酶基因TaFLS2在植物抗旱和发育中的作用[D]. 齐月英.山东大学 2016
[6]漳州水仙鳞茎盘转录组分析及类黄酮合成途径基因的表达[D]. 罗鹏.福建农林大学 2014
[7]云南红梨果皮转录因子MYB、bHLH和WD40互作及调控果皮着色机理研究[D]. 崔道雷.昆明理工大学 2013
[8]Hpt为选择标记中国水仙遗传转化体系的建立及导入LYCB基因研究[D]. 曾原飞.福建农林大学 2012
[9]不同LED光源对番茄果实转色过程中生理特性及果实品质的影响[D]. 陈强.山东农业大学 2009
[10]中国水仙花色相关基因的分离和反义Psy基因的遗传转化[D]. 邹清成.浙江大学 2006
本文编号：3397144
【文章来源】：福建农林大学福建省
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
植物类黄酮合成途径Fig.1-1Biosynthesispathwayofplantflavonoids
NtbHLH13’末端克隆Fig2-9Cloningof3’endsequenceofNtbHLH1
中国水仙类黄酮途径bHLH基因克隆与表达分析18图2-8NtbHLH13’RACE扩增产物R1：第一轮；R2：第二轮；R3：第三轮；M：MarkerFig.2-83’RACRamplifiedproductofNtbHLH1R1：firstround；R2：secondround；R3：thirdround；M：Marker图2-9NtbHLH13’末端克隆Fig2-9Cloningof3’endsequenceofNtbHLH12.2NtbHLH1基因ORF序列获得与分析用DNAMAN将通过3’RACE获得的NtbHLH1序列与在转录组找到已知的部分保守序列进行拼接，通过对其进行分析可以得出NtbHLH1的ORF大小为1896bp，编码632个氨基酸，GenBank登录号：QDS02912.1。2.3NtbHLH1的ORF扩增根据拼接获得NtbHLH1编码区全长，在起始密码子和终止密码子处设计特
【参考文献】：
期刊论文
[1]花色苷的生物合成及其影响因素研究进展[J]. 徐僡,郑远静,高方平,李欲轲,孙威. 江苏农业学报. 2019(05)
[2]‘云香’水仙NtNAC1基因的克隆及功能分析[J]. 肖瑶宇,李琳,李全超,刘洋,陈晓静. 热带作物学报. 2019(05)
[3]‘云香’水仙NtNAC2基因的克隆及功能分析[J]. 肖瑶宇,刘洋,李全超,李琳,陈晓静. 西北植物学报. 2018(11)
[4]中国水仙NtMYB7基因的克隆及功能初步研究[J]. 王桂青,姚红,吴嘉诚,MUHAMMAD Anwar,曾黎辉. 西北植物学报. 2018(08)
[5]中国水仙R2R3-MYB基因NtMYB5的克隆和功能研究[J]. 吴嘉诚,王桂青,Muhammad Anwar,曾黎辉. 园艺学报. 2018(07)
[6]‘云香’水仙NtWRKYY2基因的克隆及功能分析[J]. 温秀萍,孙申申,杨菲颖,陈晓静. 西北植物学报. 2017(07)
[7]中国水仙NtPI2基因的克隆及遗传转化[J]. 吴菁华,武丹,吴少华. 西北植物学报. 2017(06)
[8]‘云香’水仙NAC基因克隆及表达分析[J]. 李梦思,赵潇俐,吴用,李欢,李科,陈晓静. 热带作物学报. 2017(02)
[9]低温对牡丹切花花色和花青素苷合成的影响[J]. 杜丹妮,张超,高树林,董丽. 植物遗传资源学报. 2016(02)
[10]中国水仙NtSTK基因的克隆、序列和组织表达分析[J]. 吴菁华,吴少华,杨超,张志忠,林文雄. 热带作物学报. 2015(10)
博士论文
[1]中国水仙类黄酮代谢抑制基因NtMYB2,NtMYB3和NtMYB4的鉴定及功能研究[D]. Muhammad Anwar.福建农林大学 2018
[2]桃花青苷着色及原花青素合成的调控机制研究[D]. 周晖.中国科学院研究生院(武汉植物园) 2015
[3]香雪兰UDP-葡萄糖：类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶基因的克隆及其功能鉴定[D]. 隋昕.东北师范大学 2011
[4]苹果bHLH转录因子MdTTL1对低温诱导花青苷合成和果实着色的多途径调控[D]. 谢兴斌.山东农业大学 2011
[5]中国水仙花型、花色发育基因（NTMADS1、NtMADS3、NTPDS1和NTPZDS1）的克隆与转化[D]. 陈段芬.中国林业科学研究院 2008
硕士论文
[1]中国水仙类黄酮代谢途径2个R2R3-MYB基因的克隆与功能研究[D]. 吴嘉诚.福建农林大学 2018
[2]中国水仙花转录组分析及类黄酮代谢MYB基因功能研究[D]. 王桂青.福建农林大学 2018
[3]香雪兰类黄酮代谢相关bHLH转录因子基因的克隆及其功能鉴定[D]. 单晓彤.东北师范大学 2016
[4]茶树黄酮醇糖苷积累的研究及CsFLS基因功能的验证[D]. 吴亚会.安徽农业大学 2016
[5]小麦黄酮醇合成酶基因TaFLS2在植物抗旱和发育中的作用[D]. 齐月英.山东大学 2016
[6]漳州水仙鳞茎盘转录组分析及类黄酮合成途径基因的表达[D]. 罗鹏.福建农林大学 2014
[7]云南红梨果皮转录因子MYB、bHLH和WD40互作及调控果皮着色机理研究[D]. 崔道雷.昆明理工大学 2013
[8]Hpt为选择标记中国水仙遗传转化体系的建立及导入LYCB基因研究[D]. 曾原飞.福建农林大学 2012
[9]不同LED光源对番茄果实转色过程中生理特性及果实品质的影响[D]. 陈强.山东农业大学 2009
[10]中国水仙花色相关基因的分离和反义Psy基因的遗传转化[D]. 邹清成.浙江大学 2006
本文编号：3397144
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