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香蕉在枯萎病诱导下microRNA的差异表达研究

发布时间:2021-09-29 03:09
  miRNA(microRNA)是一类非编码的单链小分子RNA,约18-25nt长度,主要对靶基因进行转录后调控。miRNA的表达比编码基因更加迅速,翻译过程不受影响,对目标基因的调控效率较高,在植物的生长发育、逆境胁迫、表观遗传等方面起着非常重要的作用。本实验联合采用高通量小RNA测序和降解组测序技术,以香蕉品种“巴西蕉”及尖孢镰刀菌古巴专化型4号小种为遗传材料,构建病原菌侵染四个阶段的小RNA库和降解组库,结合生物信息学分析,建立香蕉在病原菌诱导下不同时段的miRNA差异表达谱,获得香蕉病理反应相关的已知miRNA和新miRNA,并确定各miRNA所对应的靶基因,通过qRT-PCR进行验证,解析香蕉在枯萎病菌诱导下的miRNA及其靶基因的表达模式和调控机理,为香蕉枯萎病的分子病理机制提供新的遗传信息和理论揭示:1、通过小RNA高通量技术进行测序,建立了四个小RNA库:Banana CK、 Banana 4h、Banana 24h、Banana 6d。分别得到16013204、16551770、17733937和18429778条序列。将高质量reads去接头、去污染、去polyA后,... 

【文章来源】:海南大学海南省 211工程院校

【文章页数】:128 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

香蕉在枯萎病诱导下microRNA的差异表达研究


图1-1植物miRNA的生物合成??Fig^l.?The?process?of?miRNA?biogenesis?in?plant??3??

流程图,流程,侧序,小RNA


植物小RNA侧序流程图

流程图,数据分析,流程,测序


?降解组文库测序采用Illumina?Genome?analyzer系统,样品送往华大基因深圳公司完??成。图2-2是降解组测序流程。??RNA^^??Size?fractionation?(18-BOnt》????5-??5*?adaptor?ligation?j???5.——3’??3*?adaptor?ligation?I????5*?3*??RT ̄PC?只?I??曼―—艺?????Sequencing..,爹?5*??图2-1植物小RNA测序流程图??Figure2-1.?small?RNA?sequencing?experiment?process?for?plant??mRNA?-?target?of?nvRNA?mRNA??AAAAAA?(A)^?^?—?-????f?]"??miRNA-directe<3?Cleavage???mRNA?decay?今??,?3*-End?of?cleaved?mRNA?3*-End?of?degraded?mRNA??AAAAAA?(A)。…*?5-Pi—A—画?AAAAAA'A)口??^?PolylA)?RNA?ex帖饥on????5’-P?AAAAAA?W。????5.-RNA?adap巧r?li妒tion??5*?AAAAAA?(A)???命和??Reverse?t?巧?nsc"pt?记o??命?Second?strand?syntttesis?(make?cONA)??y?"g?5.??^?'^y^X?Cleave?化?captu?巧??▼?20-bp?


本文编号:3413078

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