猕猴桃软腐病拮抗菌筛选及初步拮抗机理研究
发布时间：2021-10-07 07:19
猕猴桃软腐病是猕猴桃采后的主要病害,容易造成严重的经济损失。目前市场上常使用化学杀菌剂进行防治,但试剂残留及化学杀菌剂的使用促使病原菌产生抗性等越来越受到人们的关注,而生物防治健康有效,越来越受到人们的青睐。本研究的目的为筛选猕猴桃软腐病拮抗菌,鉴定筛选到的生防菌,并初步研究其拮抗机理。实验结果如下:1.筛选到可以有效防治猕猴桃软腐病的生防菌株。通过in vitro实验检测,发现了5株对猕猴桃软腐病菌的生长有抑制作用的生防菌株（菌株H-Z和S1-4,菌株bd-5-1以及菌株未1和未3）。利用真菌rDNA ITS序列鉴定出菌株H-Z和S1-4均为威克汉姆酵母属（Wickerhamomyces）的异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）。菌株bd-5-1为塞伯林德纳氏酵母属的（Cyberlindnera）费比恩赛伯林德纳氏酵母（Cyberlindnera fabianii）,利用细菌rDNA 16S序列鉴定出来菌株未1和未3均为芽孢杆菌属（Bacillus）生防细菌。2.对菌株H-Z进行in vivo实验发现,相对于腐烂率为100%的对照组,菌株H-Z浓度为1....
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
猕猴桃软腐病致病性检测Fig.3-1ThePathogenicitytestingofkiwisoftrot注：A:对照，接种无菌水培养7天切开的猕猴桃果实；B：对照，接种无菌水培养7天后的猕猴桃果实；C：接种软腐病菌后培养7天切开的猕猴桃果实；D：接种软腐病菌培养7天后的猕猴桃果实
华中农业大学 2014 级硕士研究生学位论文养基对病原菌菌落生长及产孢影响过对马铃薯胡萝卜培养基、豆芽汁淀粉（蔗糖/葡萄糖）培养基、马铃薯淀/葡萄糖）培养基、燕麦培养基、玉米粉培养基、察氏培养基、Waksmen 培病原菌，28℃恒温培养，发现培养第 3 天，马铃薯葡萄糖（蔗糖）培养基葡萄糖（蔗糖/淀粉）培养基上接种的菌落已铺满平板。培养第 6 天，除马卜培养基外，其他培养基菌落均铺满平板。培养 1 个月后，马铃薯葡萄糖玉米粉培养基、燕麦培养基开始产生黑色分生孢子器。用酒精灯消毒后的分生孢子器后，在光学显微镜下观察后发现，如图 3-2，分生孢子无色透明纺锤形、无隔。孢子大小为 18.6-20.9×3.6-5.5μm。
图 3-3 软腐菌 in vitro 筛选Fig.3-3 the in vitro screening of kiwi soft rot注：A：对照；B：H-Z；C：S1-4；D：未 3；E：未 1；F：bd-5-1Note：A：Control; B: H-Z; C: S1-4; D: Wei3; E: Wei1; F: bd-5-13.3.2 拮抗菌的 in vivo 验证对经过 in vitro 实验筛选的拮抗菌株 H-Z 进行 in vivo 实验，结果如图 3-4，室温培养 7 天后，只接种了病原菌的猕猴桃果实腐烂率为 100%，A 与 B 箭头所指伤口处发生凹陷，伤口附近果肉颜色泛白，发生软腐病变，失去食用价值。而同时接种了菌株 H-Z 的果实腐烂率如图 3-5 所示，只有 36.7%，C 与 D 箭头所指为接种了菌株 H-Z 的果实伤口处，可未发生软腐病变。与对照相比，菌株 H-Z 对猕猴桃软腐菌具有明显的拮抗效果。
【参考文献】：
期刊论文
[1]四川猕猴桃软腐病防治初步研究[J]. 胡容平,石军,林立金,叶慧丽,姚琳,周游. 西南农业学报. 2017(02)
[2]猕猴桃软腐病的病原菌鉴定[J]. 李黎,陈美艳,张鹏,韩飞,刘小莉,钟彩虹. 植物保护学报. 2016(03)
[3]采前喷施壳聚糖复合膜对猕猴桃软腐病的防控及其保鲜作用[J]. 张承,李明,龙友华,吴小毛. 食品科学. 2016(22)
[4]猕猴桃病原真菌拮抗菌筛选[J]. 何应红,钱一鑫,康冀川,雷帮星. 山地农业生物学报. 2016(02)
[5]2种生防菌株对杨树溃疡病原葡萄座腔菌的抑制作用[J]. 杨蕾,周国英,梁军. 林业科学. 2015(08)
[6]蓝莓枝枯病菌Botryosphaeria dothidea的寄主范围研究[J]. 徐成楠,张红军,迟福梅,冀志蕊,董庆龙,张俊祥,曹克强,周宗山. 中国果树. 2015(02)
[7]六种真菌基因组DNA快速提取方法比较[J]. 何慧,何松哲,陈懿,张卫英,余道军. 中华临床感染病杂志. 2015 (01)
[8]秦美猕猴桃营养指标分析及猕猴桃粉的研制[J]. 李宁,邓红. 安徽农业科学. 2015(05)
[9]猕猴桃果实熟腐病菌生物学特性及其寄主抗病性鉴定研究[J]. 李诚,王禄,蒋军喜,王园秀,赵尚高,李帮明,余强,涂贵庆. 江西农业大学学报. 2014(05)
[10]拮抗细菌XM2的鉴定及其对梨采后黑斑病的生防作用[J]. 张晓宇,张永杰,张则君,张姝,韩巨才,刘慧平. 微生物学报. 2014(06)
博士论文
[1]拮抗酵母及结合热空气处理对樱桃番茄采后病害的防治及其机理研究[D]. 赵妍.南京农业大学 2010
[2]荔枝采后主要病原菌的特性及内生细菌对其防治保鲜研究[D]. 蔡学清.福建农林大学 2010
[3]防治哈密瓜细菌性果斑病拮抗酵母菌的筛选及其生防机理研究[D]. 王晓东.华中农业大学 2009
[4]生防制剂在葡萄保鲜中的应用与抑菌机理研究[D]. 秦丹.湖南农业大学 2007
[5]酵母菌的分离、筛选以及对柑橘保鲜的机理研究[D]. 龙超安.华中农业大学 2005
硕士论文
[1]海洋嗜杀酵母Wickerhamomyces anomalus YF07b菌株新型嗜杀因子的研究[D]. 郭风君.中国海洋大学 2013
[2]罗伦隐球酵母结合热空气处理对草莓采后病害的防治及其机理研究[D]. 毛淑波.南京农业大学 2013
[3]拮抗酵母菌对西兰花黑斑病的防治作用机理研究[D]. 王晓枫.天津科技大学 2013
[4]Bacillus subtilis fmbj对桃软腐病菌Rhizopus stolonifer拮抗机理及应用研究[D]. 周小虹.南京农业大学 2011
[5]红阳猕猴桃采后病害生理及臭氧保鲜技术研究[D]. 王瑞玲.四川农业大学 2010
[6]拮抗酵母菌生防机理及应用研究[D]. 刘晓媛.天津科技大学 2009
[7]酵母菌对灵武长枣采后病害的生物防治研究[D]. 李莉.天津科技大学 2009
[8]柑橘采后生防菌34-9抗真菌活性物质的研究[D]. 刘昱佳.华中农业大学 2008
[9]果实采后病害拮抗菌的分离筛选及其抑菌效果的研究[D]. 宋聪.重庆大学 2007
[10]深绿木霉的拮抗机理、促生作用及制剂加工研究[D]. 王芳.甘肃农业大学 2006
本文编号：3421599
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
猕猴桃软腐病致病性检测Fig.3-1ThePathogenicitytestingofkiwisoftrot注：A:对照，接种无菌水培养7天切开的猕猴桃果实；B：对照，接种无菌水培养7天后的猕猴桃果实；C：接种软腐病菌后培养7天切开的猕猴桃果实；D：接种软腐病菌培养7天后的猕猴桃果实
华中农业大学 2014 级硕士研究生学位论文养基对病原菌菌落生长及产孢影响过对马铃薯胡萝卜培养基、豆芽汁淀粉（蔗糖/葡萄糖）培养基、马铃薯淀/葡萄糖）培养基、燕麦培养基、玉米粉培养基、察氏培养基、Waksmen 培病原菌，28℃恒温培养，发现培养第 3 天，马铃薯葡萄糖（蔗糖）培养基葡萄糖（蔗糖/淀粉）培养基上接种的菌落已铺满平板。培养第 6 天，除马卜培养基外，其他培养基菌落均铺满平板。培养 1 个月后，马铃薯葡萄糖玉米粉培养基、燕麦培养基开始产生黑色分生孢子器。用酒精灯消毒后的分生孢子器后，在光学显微镜下观察后发现，如图 3-2，分生孢子无色透明纺锤形、无隔。孢子大小为 18.6-20.9×3.6-5.5μm。
图 3-3 软腐菌 in vitro 筛选Fig.3-3 the in vitro screening of kiwi soft rot注：A：对照；B：H-Z；C：S1-4；D：未 3；E：未 1；F：bd-5-1Note：A：Control; B: H-Z; C: S1-4; D: Wei3; E: Wei1; F: bd-5-13.3.2 拮抗菌的 in vivo 验证对经过 in vitro 实验筛选的拮抗菌株 H-Z 进行 in vivo 实验，结果如图 3-4，室温培养 7 天后，只接种了病原菌的猕猴桃果实腐烂率为 100%，A 与 B 箭头所指伤口处发生凹陷，伤口附近果肉颜色泛白，发生软腐病变，失去食用价值。而同时接种了菌株 H-Z 的果实腐烂率如图 3-5 所示，只有 36.7%，C 与 D 箭头所指为接种了菌株 H-Z 的果实伤口处，可未发生软腐病变。与对照相比，菌株 H-Z 对猕猴桃软腐菌具有明显的拮抗效果。
【参考文献】：
期刊论文
[1]四川猕猴桃软腐病防治初步研究[J]. 胡容平,石军,林立金,叶慧丽,姚琳,周游. 西南农业学报. 2017(02)
[2]猕猴桃软腐病的病原菌鉴定[J]. 李黎,陈美艳,张鹏,韩飞,刘小莉,钟彩虹. 植物保护学报. 2016(03)
[3]采前喷施壳聚糖复合膜对猕猴桃软腐病的防控及其保鲜作用[J]. 张承,李明,龙友华,吴小毛. 食品科学. 2016(22)
[4]猕猴桃病原真菌拮抗菌筛选[J]. 何应红,钱一鑫,康冀川,雷帮星. 山地农业生物学报. 2016(02)
[5]2种生防菌株对杨树溃疡病原葡萄座腔菌的抑制作用[J]. 杨蕾,周国英,梁军. 林业科学. 2015(08)
[6]蓝莓枝枯病菌Botryosphaeria dothidea的寄主范围研究[J]. 徐成楠,张红军,迟福梅,冀志蕊,董庆龙,张俊祥,曹克强,周宗山. 中国果树. 2015(02)
[7]六种真菌基因组DNA快速提取方法比较[J]. 何慧,何松哲,陈懿,张卫英,余道军. 中华临床感染病杂志. 2015 (01)
[8]秦美猕猴桃营养指标分析及猕猴桃粉的研制[J]. 李宁,邓红. 安徽农业科学. 2015(05)
[9]猕猴桃果实熟腐病菌生物学特性及其寄主抗病性鉴定研究[J]. 李诚,王禄,蒋军喜,王园秀,赵尚高,李帮明,余强,涂贵庆. 江西农业大学学报. 2014(05)
[10]拮抗细菌XM2的鉴定及其对梨采后黑斑病的生防作用[J]. 张晓宇,张永杰,张则君,张姝,韩巨才,刘慧平. 微生物学报. 2014(06)
博士论文
[1]拮抗酵母及结合热空气处理对樱桃番茄采后病害的防治及其机理研究[D]. 赵妍.南京农业大学 2010
[2]荔枝采后主要病原菌的特性及内生细菌对其防治保鲜研究[D]. 蔡学清.福建农林大学 2010
[3]防治哈密瓜细菌性果斑病拮抗酵母菌的筛选及其生防机理研究[D]. 王晓东.华中农业大学 2009
[4]生防制剂在葡萄保鲜中的应用与抑菌机理研究[D]. 秦丹.湖南农业大学 2007
[5]酵母菌的分离、筛选以及对柑橘保鲜的机理研究[D]. 龙超安.华中农业大学 2005
硕士论文
[1]海洋嗜杀酵母Wickerhamomyces anomalus YF07b菌株新型嗜杀因子的研究[D]. 郭风君.中国海洋大学 2013
[2]罗伦隐球酵母结合热空气处理对草莓采后病害的防治及其机理研究[D]. 毛淑波.南京农业大学 2013
[3]拮抗酵母菌对西兰花黑斑病的防治作用机理研究[D]. 王晓枫.天津科技大学 2013
[4]Bacillus subtilis fmbj对桃软腐病菌Rhizopus stolonifer拮抗机理及应用研究[D]. 周小虹.南京农业大学 2011
[5]红阳猕猴桃采后病害生理及臭氧保鲜技术研究[D]. 王瑞玲.四川农业大学 2010
[6]拮抗酵母菌生防机理及应用研究[D]. 刘晓媛.天津科技大学 2009
[7]酵母菌对灵武长枣采后病害的生物防治研究[D]. 李莉.天津科技大学 2009
[8]柑橘采后生防菌34-9抗真菌活性物质的研究[D]. 刘昱佳.华中农业大学 2008
[9]果实采后病害拮抗菌的分离筛选及其抑菌效果的研究[D]. 宋聪.重庆大学 2007
[10]深绿木霉的拮抗机理、促生作用及制剂加工研究[D]. 王芳.甘肃农业大学 2006
本文编号：3421599
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