‘凤丹’种子萌发过程中关键蛋白和基因的表达分析研究

发布时间：2021-10-30 01:34

　　为进一步探究‘凤丹’种子休眠和萌发的分子机制,本文以萌发过程中不同时期的‘凤丹’种胚为材料,研究其生理生化指标,比较其蛋白条带差异,并鉴定这些差异蛋白种类,分析这些差异蛋白的基因表达模式。其中对鉴定出热激蛋白70基因进行克隆,并进行生物信息学分析和表达模式分析,揭示HSP70基因在‘凤丹’种子萌发过程中的表达机制。1.‘凤丹’种胚生理生化特性研究‘凤丹’种胚的吸胀和生活力测定结果表明,完成生理后熟的‘凤丹’种子在吸胀2 d后再进行播种,可大大提高‘凤丹’种子的出芽率。酶活性结果说明,在干胚时期,‘凤丹’种子内活性氧自由基和过氧化氢的含量较高。在吸胀完全时,‘凤丹’种胚内此时多酚类物质含量较高。在种子萌发的过程中,种子中油脂类物质在逐渐分解,为种子萌发提供养料和能量。在种子胚根形成期间,‘凤丹’种胚内IAAO活性下降导致IAA含量上升,以促进‘凤丹’种子的生根。在胚根伸长至3cm时,胚根已经开始了木质化或者木质化程度增加。在经赤霉素处理后,‘凤丹’种胚中有大量的α-淀粉酶的合成以及大量的淀粉被分解供能,以满足种子萌发需要;同时,此时种子受到过氧化氢的影响较大。2.不同处理的‘凤丹’种胚的... 

【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校

【文章页数】：93 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

‘凤丹’种子吸水量变化

.3 ‘凤丹’种胚相关酶活性的变化3.1 α-淀粉酶（α-AL）活性的变化从α-AL 酶测定的结果（图 2.2）中可以看出，吸胀后的α-AL 酶活性高于前，说明‘凤丹’种子在吸胀过程中对种胚内的淀粉有消耗；在‘凤丹’生根过程中，种胚的α-AL 酶活性随时期的不同而发生着变化，α-淀粉酶过 GA3处理后酶活性最高。种子萌发过程物质和能量的供给主要源于淀粉，适宜浓度的 GA3可以促进α-AL 酶的合成和提高其活性[41],α-淀粉酶在经GA3处理后酶活性最高，说明经 GA3处理后，‘凤丹’种胚中有大量的α酶的合成以及大量的淀粉被分解供能，以满足种子萌发需要。

3.3.2 过氧化物酶(POD)活性的变化从 POD 酶测定的结果（图 2.3）中可以看到，在‘凤丹’种子萌发过程胚的 POD 活性随着种子萌发而发生变化。在干种子胚中 POD 的活性相对，在进入到吸水饱和期的时候，其活性是降低的；POD 酶活性在吸胀到露段急速上升，说明种子开始萌发时，整个生理代谢活跃起来；在胚根伸长程中，POD 的活性再次上升，且在胚根伸长 3cm 的时候 POD 酶活性最高；根伸长5cm的时候，无论处理与否POD酶活性较低且保持在相对稳定的状于 POD 酶在老化的组织中具有更高的酶活性，并且它可以将组织中的某些化合物转化为木质素[42]，进而推测‘凤丹’种胚在萌发初期，当胚根伸长 3右时，幼嫩的胚根可能已经开始了木质化或者木质化程度开始增加。

【参考文献】：
期刊论文
[1]当归甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因的克隆及组织稳定性分析[J]. 杨雪,雒军,杨彩霞,王振恒,夏琦,王引权.  河南农业大学学报. 2018(06)
[2]不同类型松针提取液对山药多酚氧化酶的抑制作用[J]. 李深慧,唐可仁,方亦可,郭涛,郑雪婷,王振忠.  现代农业科技. 2018(20)
[3]胡萝卜ACC合成酶基因DcACS的克隆与表达分析[J]. 王广龙,却枫,陈伯清,任旭琴,熊爱生.  核农学报. 2018(12)
[4]不同活力小麦种子萌发初期生理性状研究[J]. 王永锋.  农业科技通讯. 2018(10)
[5]滇牡丹类黄酮7-O-葡萄糖基转移酶基因的鉴定与表达分析[J]. 原晓龙,陈剑,陈中华,华梅,王娟,王毅.  西部林业科学. 2018(05)
[6]花生AhFAD2基因抑制表达的转基因后代分析[J]. 徐平丽,唐桂英,毕玉平,柳展基,单雷.  生物工程学报. 2018(09)
[7]牡丹皮历代产地变迁及品质评价[J]. 邓爱平,方文韬,谢冬梅,金艳,赵玉洋,彭代银,詹志来,郭兰萍.  中国现代中药. 2017(06)
[8]滁菊f3’h基因启动子的克隆及分析[J]. 赵维萍,陆李昌,刘洋,徐媛媛,翟璐,蔡华.  华北农学报. 2016(S1)
[9]花生羧酸酯酶AhCXE的克隆与原核表达[J]. 黄桃鹏,许焕焕,李海良,李海芬,李玲,梁炫强.  基因组学与应用生物学. 2017(03)
[10]凤丹种子休眠特性研究[J]. 郭丽萍,张延龙,牛立新,罗建让.  西北林学院学报. 2016(04)

博士论文
[1]植物发育相关基因Tip41在小麦中的遗传效应分析[D]. 耿玉珂.中国农业大学 2014
[2]玉米种子萌发的蛋白质组学研究[D]. 孟令波.东北林业大学 2008
[3]绿芦笋（Asparagus officinalis L.）木质化的生理生化基础及其调控技术研究[D]. 刘尊英.中国农业大学 2003
[4]枯草芽孢杆菌中甲硫氨酸氨基肽酶基因的克隆与功能研究[D]. 吕鸿雁.中国协和医科大学 2002

硕士论文
[1]芍药HSP70基因克隆及其功能研究[D]. 苏江洪.扬州大学 2018
[2]红冬孢酵母类胡萝卜素合成关键酶基因Pdh和Lc的研究[D]. 刘小岭.昆明理工大学 2017
[3]银杏种胚发育的差异蛋白质组学研究[D]. 李佳.沈阳农业大学 2016
[4]天女木兰种子萌发过程碳水化合物变化及相关差异蛋白的筛选[D]. 梅梅.沈阳农业大学 2015
[5]阳春砂种子休眠与萌发过程同工酶及差异蛋白质组学研究[D]. 孙林霞.广州中医药大学 2016
[6]红麻质核互作型雄性不育相关基因atp1的克隆和表达分析[D]. 陈艳翠.中国农业科学院 2013
[7]两种苹果酸脱氢酶的克隆、表达及酶学分析[D]. 陈露露.安徽师范大学 2010
[8]几种牡丹种子萌发的初步研究[D]. 王小芳.北京林业大学 2008
[9]细菌rpoD基因在烟草植物叶绿体中表达的研究[D]. 刘征.山西农业大学 2004
[10]种子处理对玉米种子萌发及幼苗期生理生化的影响[D]. 林彰文.湖南农业大学 2003



本文编号：3465782