月季花组织特异单向嵌合启动子的构建及活性分析

发布时间：2021-12-30 20:12

　　为获得月季新异花色,有效调控花色素代谢途径,需要在月季转基因研究中,首先选择高效的组织特异性的启动子,以提高外源基因在转基因植物中的表达效率。同时为了使后续转基因研究的更为深入,使外源基因在植物受体中表达调控的更为精准,应当尽量避免重复使用相同序列的启动子片段以减小造成基因沉默的风险。本研究旨在克隆得到月季花组织特异性的启动子,使其驱动外源基因在月季花组织中高效的表达,通过对其进行嵌合增强子的改造,为多基因表达载体的构建提供有效的调控元件,以期达到增强组织特异性启动子表达活性的目的。本研究取得的主要结果如下:1.月季花快速繁殖体系的建立以“卡罗拉”月季当年生枝条中段（半木质化）的带芽茎段为外植体,采用MS为基本培养基,添加NAA及6-BA的不同激素组合进行萌发、增殖及生根培养。通过驯化炼苗,在5-6个月内获得健壮的月季快繁植株。“卡罗拉”腋芽萌发的最适培养基为MS+6-BA 2mg·L-1+NAA 0.1mg·L-1,萌发率为96.67%;丛生芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 2mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1,增值系数为3.36;最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.... 

【文章来源】：新疆师范大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1. 文献综述
    1.1 植物启动子概述
        1.1.1 启动子结构与特征
        1.1.2 启动子的分类
        1.1.3 花组织特异性启动子
        1.1.4 CHS启动子
    1.2 增强子
        1.2.1 转录增强子
        1.2.2 翻译增强子
    1.3 嵌合启动子
        1.3.1 嵌合启动子概述
        1.3.2 构建嵌合启动子的研究进展
        1.3.3 嵌合启动子的构建方法与策略
    1.4 本研究的目的、内容及策略
        1.4.1 研究目的及内容
        1.4.2 技术路线
2 月季快速繁殖体系的建立
    2.1 材料与方法
        2.1.1 试验材料
        2.1.2 培养条件
        2.1.3 试验方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 不同浓度植物生长调节剂组合对月季腋芽萌发的影响
        2.2.2 不同浓度植物生长调节剂配比对月季丛生芽增殖的影响
        2.2.3 不同浓度生长素NAA对月季丛生芽生根的影响
        2.2.4 练苗移栽
3 基因枪法瞬时转化月季花瓣的体系建立
    3.1 材料与方法
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 实验方法
    3.2 结果与分析
        3.2.1 氦气压力对gus基因表达的影响
        3.2.2 轰击距离对gus基因表达的影响
4 月季査尔酮合酶CHS单向嵌合启动子的克隆及功能分析
    4.1 试验材料和方法
        4.1.1 试验材料
        4.1.2 试验方法
    4.2 结果与分析
        4.2.1 月季CHS启动子的染色体步移
        4.2.2 启动子核心元件分析
        4.2.3 对照启动子片段的克隆
        4.2.4 嵌合启动子的设计合成
        4.2.5 CHS启动子片段驱动gus基因的植物表达载体的构建
        4.2.6 嵌合启动子片段驱动gus基因的瞬时表达分析
结论
参考文献
在读期间发表的论文
后记


【参考文献】：
期刊论文
[1]植物基因启动子的类型及其应用[J]. 胡廷章,罗凯,甘丽萍,石汝杰.  湖北农业科学. 2007(01)
[2]特异性启动子在植物基因工程中的应用[J]. 于翠梅,马莲菊,张宝石.  生物工程学报. 2006(06)
[3]百合查尔酮合成酶（CHS）基因的克隆与分析[J]. 杨丽,刘雅莉,王跃进,徐伟荣.  西北植物学报. 2006(05)
[4]查尔酮合酶基因对转基因植物花色和育性的影响[J]. 邵莉,李毅,杨美珠,宋云,陈章良,萧师辉.  Acta Botanica Sinica. 1996(07)

博士论文
[1]中国华东葡萄抗白粉病芪合成酶基因及启动子克隆与功能分析[D]. 徐伟荣.西北农林科技大学 2010

硕士论文
[1]高强启动子及其表达载体的研制[D]. 刘石娟.山东农业大学 2002



本文编号：3558893