黄瓜EMS诱变突变体库及TILLING平台的初步构建
发布时间：2022-02-18 14:12
黄瓜（Cucumis sativus L.）是我国和世界的主要蔬菜之一。随着黄瓜基因组测序工作的完成,人们掌握了大量的黄瓜转录组、表达谱数据和众多的基因资源,目前正在对基因功能进行分析。鉴于黄瓜转基因效率较低,为了尽早确定基因的功能,人们多选择拟南芥或烟草作为受体对黄瓜的基因功能进行分析,这在很大程度上延缓了人们对于黄瓜基因功能及其作用机制的理解,进而在一定程度上也延缓了黄瓜分子育种的速度。据上述现状,结合目前黄瓜基因组信息已知,甲基磺酸乙酯诱变（Ethyl methane sulfonate,EMS）结合反向遗传学定向诱导基因组局部突变（Targeting Induced Local Lesions In Genomes,TILIING）技术进行覆盖整个黄瓜基因组的相关突变体库构建以及进行基因功能研究可以作为当前黄瓜转基因效率较低的一个有效的补充手段,加速黄瓜分子育种研究的进程。本研究选用东北农业大学黄瓜课题组提供的黄瓜649为材料,利用EMS诱变技术,创制黄瓜突变体库,结合TILLING技术,选取黄瓜雌性基因F（Cs ACS1G）、苦味基因Bt、以及本课题组前期获得耐低氮相关基因C...
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省211工程院校
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 引言
1.1 黄瓜功能基因组学的研究进展
1.2 植物突变体库研究进展
1.2.1 突变体与植物突变体库
1.2.2 突变体库构建的技术
1.3 TILLING技术
1.3.1 TILLING技术基本原理及特点
1.3.2 TILLING在植物中研究现状
1.4 研究目的及意义
1.4.1 研究目的
1.4.2 研究意义
1.5 主要研究内容
1.5.1 黄瓜EMS诱变突变体库的创制
1.5.2 黄瓜TILLING平台初步构建
1.6 技术路线
2 材料与方法
2.1 黄瓜突变体库的创制
2.1.1 试验材料及试剂
2.1.2 试验方法
2.2 TILLING平台的构建
2.2.1 试验材料及设备
2.2.2 试验方法
3 结果与分析
3.1 EMS诱变构建黄瓜突变体库
3.1.1 EMS浓度的筛选
3.1.2 黄瓜突变体库的创制
3.1.3 M_1和M_2植株突变表型鉴定
3.2 TILLING平台的初步构建
3.2.1 引物序列的设计
3.2.2 外套扩增结果
3.2.3 内套扩增结果
3.2.4 突变位点的检测
4 讨论
4.1 黄瓜TILLING平台的初步构建
4.2 黄瓜EMS诱变浓度筛选及突变体的初步鉴定
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文
【参考文献】：
期刊论文
[1]An ACCUMULATION AND REPLICATION OF CHLOROPLASTS 5 gene mutation confers light green peel in cucumber[J]. Qian Zhou,Shenhao Wang,Bowen Hu,Huiming Chen,Zhonghua Zhang,Sanwen Huang. Journal of Integrative Plant Biology. 2015(11)
[2]Micro-trichome as a class I homeodomain-leucine zipper gene regulates multicellular trichome development in Cucumis sativus[J]. Jun-Long Zhao,Jun-Song Pan,Yuan Guan,Wei-Wei Zhang,Bei-Bei Bie,Yun-Li Wang,Huan-Le He,Hong-Li Lian,Run Cai. Journal of Integrative Plant Biology. 2015(11)
[3]长春密刺黄瓜突变体库的构建和部分性状分析[J]. 王晶,娄群峰,魏庆镇,李子昂,付文苑,陈劲枫. 核农学报. 2015(08)
[4]用转座子TnYLB-1构建枯草芽孢杆菌EDR4突变体库[J]. 陈永轩,王娜娜,高小宁,秦虎强,黄丽丽,韩青梅. 西北农业学报. 2014(11)
[5]第4代航天育种白芷的FTIR分析[J]. 朱艳英,吴鹏乐,刘美义,王志宙,郭西华,关颖. 光谱学与光谱分析. 2012(03)
[6]黄瓜无毛基因gl-2的遗传分析和定位[J]. 杨双娟,苗晗,张圣平,程周超,周健,董邵云,Todd C.Wehner,顾兴芳. 园艺学报. 2011(09)
[7]EMS诱导黄瓜离体变异及分子标记检测[J]. 胡建斌,刘丹华,王建丽,李雅鸽,马兴帅,张美芳,李建吾. 江西农业学报. 2011(04)
[8]RNA干扰（RNAi）文库研究进展[J]. 罗彦忠,王磊. 微生物学通报. 2010(10)
[9]植物突变体库的构建及突变体检测研究进展[J]. 郭建秋,雷全奎,杨小兰,马雯,张向召. 河南农业科学. 2010(06)
[10]黄瓜单性花决定基因M的表达分析[J]. 陶倩怡,李征,何欢乐,潘俊松,蔡润. 遗传. 2010(06)
博士论文
[1]烟草激活标签突变体库的构建与分析[D]. 刘峰.中国农业科学院 2014
[2]甜瓜TILLING平台的构建及多壁碳纳米管与过氧化氢酶互作的研究[D]. 徐美红.上海交通大学 2013
硕士论文
[1]甜瓜突变体库的构建及黄化突变体鉴定和表型分析[D]. 宋燕妮.东北农业大学 2015
[2]EMS诱导黄瓜突变体的初步研究[D]. 张兵.山东农业大学 2012
[3]粳稻“日本晴”突变体库的创建和部分重要性状的遗传分析[D]. 阮伯胜.浙江大学 2008
[4]～（60）Co-γ射线对厚皮甜瓜的生物学效应研究[D]. 刘芹.新疆农业大学 2007
[5]～（60）Co-γ射线辐照创造马铃薯突变株系的研究[D]. 史玮.甘肃农业大学 2006
本文编号：3630982
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省211工程院校
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 引言
1.1 黄瓜功能基因组学的研究进展
1.2 植物突变体库研究进展
1.2.1 突变体与植物突变体库
1.2.2 突变体库构建的技术
1.3 TILLING技术
1.3.1 TILLING技术基本原理及特点
1.3.2 TILLING在植物中研究现状
1.4 研究目的及意义
1.4.1 研究目的
1.4.2 研究意义
1.5 主要研究内容
1.5.1 黄瓜EMS诱变突变体库的创制
1.5.2 黄瓜TILLING平台初步构建
1.6 技术路线
2 材料与方法
2.1 黄瓜突变体库的创制
2.1.1 试验材料及试剂
2.1.2 试验方法
2.2 TILLING平台的构建
2.2.1 试验材料及设备
2.2.2 试验方法
3 结果与分析
3.1 EMS诱变构建黄瓜突变体库
3.1.1 EMS浓度的筛选
3.1.2 黄瓜突变体库的创制
3.1.3 M_1和M_2植株突变表型鉴定
3.2 TILLING平台的初步构建
3.2.1 引物序列的设计
3.2.2 外套扩增结果
3.2.3 内套扩增结果
3.2.4 突变位点的检测
4 讨论
4.1 黄瓜TILLING平台的初步构建
4.2 黄瓜EMS诱变浓度筛选及突变体的初步鉴定
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文
【参考文献】：
期刊论文
[1]An ACCUMULATION AND REPLICATION OF CHLOROPLASTS 5 gene mutation confers light green peel in cucumber[J]. Qian Zhou,Shenhao Wang,Bowen Hu,Huiming Chen,Zhonghua Zhang,Sanwen Huang. Journal of Integrative Plant Biology. 2015(11)
[2]Micro-trichome as a class I homeodomain-leucine zipper gene regulates multicellular trichome development in Cucumis sativus[J]. Jun-Long Zhao,Jun-Song Pan,Yuan Guan,Wei-Wei Zhang,Bei-Bei Bie,Yun-Li Wang,Huan-Le He,Hong-Li Lian,Run Cai. Journal of Integrative Plant Biology. 2015(11)
[3]长春密刺黄瓜突变体库的构建和部分性状分析[J]. 王晶,娄群峰,魏庆镇,李子昂,付文苑,陈劲枫. 核农学报. 2015(08)
[4]用转座子TnYLB-1构建枯草芽孢杆菌EDR4突变体库[J]. 陈永轩,王娜娜,高小宁,秦虎强,黄丽丽,韩青梅. 西北农业学报. 2014(11)
[5]第4代航天育种白芷的FTIR分析[J]. 朱艳英,吴鹏乐,刘美义,王志宙,郭西华,关颖. 光谱学与光谱分析. 2012(03)
[6]黄瓜无毛基因gl-2的遗传分析和定位[J]. 杨双娟,苗晗,张圣平,程周超,周健,董邵云,Todd C.Wehner,顾兴芳. 园艺学报. 2011(09)
[7]EMS诱导黄瓜离体变异及分子标记检测[J]. 胡建斌,刘丹华,王建丽,李雅鸽,马兴帅,张美芳,李建吾. 江西农业学报. 2011(04)
[8]RNA干扰（RNAi）文库研究进展[J]. 罗彦忠,王磊. 微生物学通报. 2010(10)
[9]植物突变体库的构建及突变体检测研究进展[J]. 郭建秋,雷全奎,杨小兰,马雯,张向召. 河南农业科学. 2010(06)
[10]黄瓜单性花决定基因M的表达分析[J]. 陶倩怡,李征,何欢乐,潘俊松,蔡润. 遗传. 2010(06)
博士论文
[1]烟草激活标签突变体库的构建与分析[D]. 刘峰.中国农业科学院 2014
[2]甜瓜TILLING平台的构建及多壁碳纳米管与过氧化氢酶互作的研究[D]. 徐美红.上海交通大学 2013
硕士论文
[1]甜瓜突变体库的构建及黄化突变体鉴定和表型分析[D]. 宋燕妮.东北农业大学 2015
[2]EMS诱导黄瓜突变体的初步研究[D]. 张兵.山东农业大学 2012
[3]粳稻“日本晴”突变体库的创建和部分重要性状的遗传分析[D]. 阮伯胜.浙江大学 2008
[4]～（60）Co-γ射线对厚皮甜瓜的生物学效应研究[D]. 刘芹.新疆农业大学 2007
[5]～（60）Co-γ射线辐照创造马铃薯突变株系的研究[D]. 史玮.甘肃农业大学 2006
本文编号：3630982
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